The effects of ovalbumin as a protein source during the in vitro production of bovine embryos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Desempenho de diferentes estádios embrionários no cultivo in vitro de embriões de 'Pêra Rio' x 'Poncã'

Objetivou-se verificar qual o melhor estádio embrionário para o cultivo de embriões imaturos oriundos de frutos provenientes de hibridação entre 'Pêra Rio' x 'Poncã' , bem como o efeito de diferentes concentrações do meio de cultura MT. Os embriões em diferentes estádios de desenvolvimento (globulares, torpedo e cordiforme) foram excisados e inoculados em tubos de ensaio contendo 15 mL do meio MT com diferentes concentrações (0; 50; 100 e 150% da composição original e acrescido de 50 g.L-1 de sacarose). Após a inoculação, os embriões foram incubados à 27±1ºC, fotoperíodo de 16 horas e irradiância de 32 mmol.m-2.s-1. Após 90 dias, avaliou-se o comprimento da parte aérea e do sistema radicular, massa fresca e número de folhas das plântulas. Melhor desenvolvimento dos embriões imaturos foi obtido em estádio cotiledonar e com a concentração de 150% do meio MT.

Degradação in vitro de tecidos da lâmina foliar e do colmo de gramíneas forrageiras tropicais, em função do estádio de desenvolvimento

O experimento foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito da idade sobre o potencial de degradação dos diferentes tecidos da lâmina foliar e do colmo de capim-braquiária (Brachiaria decumbens), capim-gordura (Melinis minutiflora) e capim-tifton 85 (Cynodon sp). Foram amostradas a 7ª (capim-braquiária e capim-gordura) e a 11ª (capim-tifton 85) lâminas foliares, no dia da exposição da lígula e 20 dias após. Por meio de observações ao microscópio foram estimadas a extensão da digestão in vitro dos tecidos da lâmina e do colmo e a redução na espessura da parede de células do esclerênquima do colmo. Lâminas foliares e segmentos de colmos jovens apresentaram maiores áreas digeridas. Permaneceram intactos os tecidos com células de parede espessada e lignificada, a bainha parenquimática dos feixes, o esclerênquima, o xilema e a epiderme do colmo. Tecidos com células de parede delgada, normalmente não-lignificada, o mesofilo, o floema e o parênquima, desapareceram completamente. O avanço na idade reduziu a digestão do mesofilo, em lâminas de capim-braquiária e capim-gordura, e do parênquima em colmos, principalmente de capim-gordura. A epiderme na lâmina foliar foi parcialmente digerida, independentemente da idade e da espécie. Embora aparentemente intactas, células esclerenquimáticas do colmo sofreram redução da espessura da parede com a incubação em líquido ruminal. A porcentagem de redução variou de 7 a 37% e a taxa de redução da espessura de 0,007 a 0,018 µm/h.

Resposta do híbrido de sorgo-sudão à adubação nitrogenada e potássica: composição química e digestibilidade in vitro da matéria orgânica

A pesquisa foi instalada no Setor de Forragicultura da FCAV/UNESP-Jaboticabal, objetivando avaliar a composição química e a digestibilidade in vitro da matéria orgânica (DIVMO) do híbrido de Sorgo-sudão cv. AG 2501C, no outono e inverno. O manejo da pastagem foi conduzido simulando o sistema de lotação intermitente. O experimento foi desenvolvido de março a setembro de 2002. A forrageira foi submetida a nove tratamentos: três níveis de nitrogênio (100, 200 e 300 kg de N/ha) e três níveis de potássio (0, 80 e 160 kg de K2O/ha), em delineamento experimental em blocos casualizados e parcelas subdivididas. A adubação nitrogenada e potássica não foram significativas para a DIVMO. O nitrogênio influenciou a proteína bruta (PB) com valores de 15,1; 16,4 e 15,7 %, a fibra em detergente neutro (FDN) com valores de 65,3; 65,8 e 64,5% e fibra em detergente ácido (FDA) com 35,5; 37,8 e 39,6% para 100; 200 e 300 kg N/ha. O potássio aumentou significativamente a lignina das plantas. O melhor nível obtido foi 100 kg/ha de nitrogênio, sem potássio.

Use of repellents for honeybees (Apis mellifera L.) in vitro in the yellow passion-fruit (Passiflora edulis Deg) crop and in confined beef cattle feeders

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Composição química, fracionamento de carboidratos e proteínas e digestibilidade in vitro de forrageiras tropicais em diferentes idades de corte

Objetivou-se avaliar o valor nutritivo de três espécies forrageiras tropicais: capim-tanzânia (Panicum maximum Jacq.), capim-marandu (Brachiaria brizantha) e capim-tifton 85 (Cynodon spp), em duas épocas do ano (janeiro-março e abril-junho) e em três idades de rebrota (28, 35 e 42 dias), por meio da composição química, do fracionamento de proteínas e carboidratos e da digestibilidade in vitro da matéria seca (DIVMS) e da matéria orgânica (DIVMO). O capim-marandu destacou-se no período de janeiro-março, com menores conteúdos de parede celular e fração B2 dos carboidratos e maiores valores de proteína bruta, fração A + B1, DIVMS e DIVMO, em comparação aos capins tanzânia e tifton 85, independentemente da idade de corte. O aumento da concentração de parede celular em detrimento ao conteúdo celular com o avanço da maturidade das plantas foi evidente no capim-marandu no período de janeiro-março, quando foram observados maior valor da fração B2, maior conteúdo de fibra em detergente neutro (FDN) e menor concentração da fração carboidratos não-fibrosos. No período de abril-junho, a composição em parede celular não apresentou diferenças evidentes com aumento da idade, devido às condições ambientais observadas. O capim-tanzânia apresenta, de modo geral, baixos valores de parede celular e altos valores de carboidratos não-fibrosos, DIVMS e DIVMO nesse período, seguido pelos capins marandu e tifton 85, respectivamente.

Produção in vitro de embriões bovinos: utilização de diferentes fontes de gonadotrofinas na maturação dos oócitos

O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar o efeito da utilização de diferentes fontes de gonadotrofinas para maturação in vitro dos oócitos bovinos fecundados e desenvolvidos in vitro sobre as taxas de clivagem (TC) e de blastocistos (TBL). Oócitos imaturos provenientes de ovários de vacas de abatedouro foram submetidos a maturação in vitro sob diferentes condições: meio TCM 199, acrescido de 10% de soro de vaca em estro (SVE), aditivos, hepes, NaHCO3, piruvato de sódio, antibióticos (meio B-199), 20 UI/mL de PMSG e 10 UI/mL de hCG (PMSG/hCG) ou meio B-199, acrescido de 5 mig/mL de FSH e 5 mig/mL de LH (FSH/LH). Seguidos 24 h de cultura a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2, os oócitos maturos foram incubados com sêmen descongelado durante 18 a 21 horas. Após esse período, os oócitos foram transferidos para placas contendo microgotas de meio Ménezo suplementado com 10% de SVE e células epiteliais do oviduto bovino em suspensão, cobertas com óleo de silicone, os quais permaneceram em cultura por mais 9 dias. Os dados foram analisados pelo teste do Qui-quadrado. A TC e a TBL, para PMSG/hCG e FSH/LH, foram 60 e 13,9% e 61,2 e 10,6%, respectivamente. Não houve diferença entre os tratamentos com relação a TC ou a TBL. Esses resultados sugerem que ambas as fontes de gonadotrofinas podem ser utilizadas para maturação in vitro dos oócitos fecundados e desenvolvidos in vitro.

In vitro acaricidal activity of neem (Azadirachta indica) seed extracts with known azadirachtin concentrations against Rhipicephalus microplus

The effect of four extracts from neem seeds (Azadirachta indica) containing 2000, 5000, 9000 and 10,000 ppm of azadirachtin A (AZA), quantified by high-performance liquid chromatography (HPLC) and diluted to 1.25%; 2.5%; 5.0%; 10.0% and 12.8% was verified by in vitro tests with engorged females and larvae of the cattle tick Rhipicephalus micro plus. The results from the bioassays with the engorged females showed that the main toxic effect of the extracts was reduction of the reproductive parameters, with a sharp drop in the number of eggs laid and the hatching rate, mainly when the extracts were diluted to 10.0% and 12.8%. The product effectiveness (PE) calculations for all the solutions tested showed that the AZA solution at 10,000 ppm (N10) was the most effective. However, statistical analysis of the PE data obtained for the proportional AZA concentrations in the different diluted extracts showed significance (P<0.05) of the effects included in the model (extract dilution, principle effect (classificatory) of the assay (extract) and the interaction between the two), indicating significant variations due to the dilution, the test and the interaction between the two factors in the tests with engorged females. For solutions N2, N5, and N9, it was not possible to estimate LC(90) values in the dilution range tested. The lowest LC(50) was observed for extract N5, and although extract N10 was the only extract for which the LC(90) could be estimated within the range tested, the LC(50) was higher than for N5 and N9. These results suggest that substances other than AZA present in the extracts influenced the efficacy, especially up to a certain LC range. In the tests with larvae, no mortality was observed, indicating zero effectiveness of all the extracts tested. The results of the tests with engorged females showed that the neem extracts had acaricide activity, inhibiting egg laying and the larval hatching rate. Complementary studies are necessary to develop new methods to isolate and/or identify other substances besides AZA contained in this plant, to enable using products made from it as acaricides. (C) 2011 Elsevier B.V. All rights reserved.

Influência de diferentes meios de cultura sobre o crescimento de Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen (Amaranthaceae) para conservação in vitro

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Crescimento micelial in vitro de cinco linhagens de Agaricus bisporus submetidas a diferentes condições de temperatura

Avaliou-se o crescimento micelial in vitro das linhagens ABI-05/03, ABI-06/04, ABI-04/02, ABI-06/05 e ABI-01/01 de Agaricus bisporus em meios de cultura sólidos à base de composto. As avaliações foram realizadas por meio de medições de quatro diâmetros das colônias, a cada 48h, durante 12 dias de incubação, no escuro, a 20 e 25ºC. O delineamento experimental foi o de blocos casualizados, com uso do teste de Tukey para a comparação das médias. Co m base nos resultados obtidos, verificou-se que: o crescimento micelial de A. bisporus é influenciado pela temperatura de incubação; a temperatura de 25ºC foi mais favorável para o crescimento micelial de todas as linhagens de A. bisporus; na temperatura de 20ºC, o melhor crescimento foi obtido com as linhagens ABI-06/05 e ABI-01/01; na temperatura de 25ºC, a linhagem ABI-01/01 apresentou crescimento significativamente maior que todas as demais.

Synthesis and in vitro evaluation of potential antichagasic hydroxymethyinitrofurazone (NFOH-121): A new nitrofurazone prodrug

The synthesis of mutual prodrugs of nitrofurazone with primaquine, using specific and nonspecific spacer groups, has been previously attempted seeking selective antichagasic agents. The intermediate reaction product, hydroxymethylnitrofurazone (NFOH-121), was isolated and tested in LLC-MK2 culture cells infected with trypomastigotes forms of Trypanosoma cruzi showing higher trypanocidal activity than nitrofurazone and benznidazol in all stages. The mutagenicity tests showed that the prodrug was less toxic than the parent drug. Degradation assays were carried out in pH 1.2 and 7.4. (C) 2003 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Comparative in vitro study of the inhibition of human and hen esterases by methamidophos enantiomers

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Eficiência de argila silicatada no controle de Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae, in vitro e em mudas de maracujazeiro-amarelo

A mancha bacteriana do maracujá, causada pela bactéria Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae, ocorre em todas as regiões produtoras do País, sendo responsável por grandes perdas econômicas na cultura do maracujazeiro-amarelo. O presente trabalho teve como objetivos testar a eficiência de argila silicatada na inibição da bactéria X. axonopodis pv. passiflorae in vitro e no controle preventivo e curativo da mancha bacteriana em mudas de maracujazeiro-amarelo. A argila silicatada foi adicionada ao meio de cultura batata-dextrose-ágar fundente, nas concentrações de 0,0; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0%; vertido em placas de Petri. Após resfriamento do meio, repicou-se a suspensão bacteriana (10(7) UFC.mL-1) com uma alça, incubando-se as placas a 28 °C por três dias, quando se avaliou o crescimento bacteriano. Posteriormente, o produto, nas mesmas concentrações citadas, foi pulverizado em mudas de maracujá 'Afruvec' de forma preventiva ou curativa. A inoculação da bactéria foi realizada através de pulverização foliar da suspensão bacteriana (10(7) UFC.mL-1), 24 h antes ou após os tratamentos curativo e preventivo, respectivamente. A severidade da doença foi avaliada com auxílio de uma escala diagramática nas quatro primeiras folhas verdadeiras contadas de baixo para cima. Nas concentrações avaliadas, a argila silicatada inibiu a bactéria in vitro e os sintomas da mancha bacteriana no tratamento curativo, enquanto no tratamento preventivo, controle significativo foi obtido a partir de 1,0% de argila silicatada. Com base nestes resultados, a argila silicada pode ser recomendada, na concentração de 1,0-2,0%, para o controle da mancha bacteriana do maracujazeiro em pulverizações foliares.

Analysis of the efficiency of silicate clay on the control of Xanthomonas axonopodis PV. passiflorae in vitro and in seedlings of yellow passion fruit contaminated

The bacterial spot in yellow passion fruit plants, caused by the bacteria Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae, occurs in all producing areas of the country, and is responsible for great economic losses in the culture of passion fruit. This study aimed to test the efficiency of the silicate clay in the inhibition of the bacteria Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae in vitro, and in both preventive and curative control of the bacterial spot in seedlings of yellow passion fruit plants. The silicate clay was added to the growth medium at concentrations of. 0.5, 1.0, 1.5 and 2.0%, placed in Petri dishes. After the culture medium was cooler, the bacterial suspension was inoculates (10(7) UFC.mL(-1)) with a handle, and left incubating at 28 degrees C for three days, and then the bacterial growth was evaluated. Subsequently, the product at the same concentrations above was sprayed on seedlings of 'Afruvec' passion fruit, as preventive or curative. The inoculation of the bacteria was made by foliar spraying of bacterial suspension (10(7) ufc.mL(-1)), 24 hours before or after the curative and preventive treatments, respectively. The severity of the disease was measured comparing each four true leaves from bottom up, with a diagrammatic scale. In the concentrations evaluated, the silicate clay inhibited both bacteria in vitro and symptoms of bacterial spot in the curative treatment. In preventive treatment, significant results were obtained using more than 1.0% of clay silicates. Based on these results, the clay silicate can be recommended, the concentration of 1.0-2.0% for the control of bacterial spot of passion fruit plants, in foliar sprays.

Lack of effect of prior treatment with fluoride on genotoxicity of two chemical agents in vitro

The goal of this study was to investigate the ability of fluoride to modulate the genotoxic effects induced by the oxidative agent hydrogen peroxide (H2O2) and the alkylating agent methyl methanesulfonate (MMS) in vitro by the single-cell gel ( comet) assay. Chinese hamster ovary cells were exposed in culture for 1 h at 37 degrees C to sodium fluoride at 7-100 mu g/ml. NaF-treated and control cells were then incubated with 0-10 mu M MMS in phosphate-buffered saline (PBS) for 15 min at 37 degrees C, or 7-100 mu M H2O2 in distilled water for 5 min on ice. Negative control cells were treated with PBS for 1 h at 37 degrees C. Clear concentration-related effects were observed for the two genotoxins. Increase of DNA damage induced by either MMS or H2O2 was not significantly altered by pretreatment with NaF. The data indicate that NaF does not modulate alkylation-induced genotoxicity or oxidative DNA damage as measured by the single-cell gel ( comet) assay. Copyright (c) 2007 S. Karger AG, Basel