Caracterização do gene da proteína capsidial do Grapevine virus A em videiras afetadas pela acanaladura do lenho de Kober no Estado de São Paulo

O presente trabalho caracteriza o gene codificador da proteína capsidial do isolado do Grapevine virus A (GVA) encontrado no Estado de São Paulo (GVA-SP). RNA total foi extraído de folhas e pecíolos de plantas de videira (Vitis spp.) da variedade 'Kober 5BB' e submetido a RT-PCR usando oligonucleotídeos desenhados para amplificar um fragmento entre as posições 6409 e 7175 do RNA do GVA (GenBank, acesso X75433). Foi obtido um fragmento de tamanho esperado (767 nt) que inclui o gene da proteína capsidial, codificando 198 aminoácidos. A seqüência do GVA-SP apresentou similaridade de nucleotídeos e aminoácidos de, respectivamente, 86-92,3% e 94,5-98% com isolados do GVA da Europa, África e Japão (Acessos X75433, AF441234, AF007415, AB039841) e da região Sul do Brasil (Acesso AF494187), sendo, entretanto, mais similar aos isolados africano e italiano.

Detecção do Grapevine virus A e Grapevine virus B por hibridização dot-blot com sondas moleculares não radioativas

O vírus A da videira (Grapevine virus A, GVA) e o vírus B da videira (Grapevirus virus B, GVB) estão associados à acanaladura do lenho de Kober (Kober stem grooving) e ao fendilhamento cortical da videira (grapevine corky bark), respectivamente. Este trabalho descreve o uso de sondas moleculares de cDNA na detecção de isolados do GVA (GVA-SP) e do GVB (GVB-C-SP e GVB-I-SP) em videiras (Vitis spp.) e fumo (Nicotiana occidentalis). As sondas marcadas com digoxigenina foram produzidas por RT-PCR utilizando oligonucleotídeos específicos para os genes da proteína capsidial. Os RNA totais foram extraídos de 45 plantas de diversas variedades de videira e de 13 plantas de fumo inoculadas mecanicamente com o GVB. Os RNA extraídos das plantas infetadas, indexadas biologicamente, hibridizaram com as sondas, não se verificando reação com plantas sadias. Para confirmar os resultados de hibridização, foram também feitos testes de RT-PCR. A utilização de hibridização dot-blot com sondas de cDNA mostrou-se eficaz na detecção dos vírus com especificidade e sensibilidade, ressaltando-se que, preferencialmente, folhas maduras e ramos dormentes devem ser utilizados nos testes diagnósticos para o GVB e GVA, respectivamente.

Detecção do Grapevine leafroll-associated virus 5 no Estado de São Paulo

O enrolamento da folha da videira (grapevine leafroll) é uma doença atribuída a pelo menos nove vírus sorologicamente distintos, Grapevine leafroll-associated viruses 1 a 9 e designados GLRaV-1 a GLRaV-9. No Brasil, já é conhecida a existência do GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3 e GLRaV-6. Neste trabalho, foi demonstrada a ocorrência do GLRaV-5 em amostras de videiras cultivadas no Estado de São Paulo, mediante teste de Biotina-ELISA. O vírus foi detectado com baixa incidência nas cultivares avaliadas, exceto na 'Cardinal', que apresentou 100% de infecção. Este é o primeiro relato da ocorrência do GLRaV-5 no Brasil.

Caracterização do gene da proteína capsidial de dois isolados, patologicamente distintos e sorologicamente semelhantes, do Grapevine virus B em videiras no Estado de São Paulo

No presente trabalho, descreve-se a caracterização do gene codificador da proteína capsidial de dois isolados sintomatologicamente distintos do Grapevine virus B (GVB). Para isto, RNA totais foram extraídos de folhas e pecíolos de videiras (Vitis spp.) infetadas, cultivares Rubi (GVB-C SP) e Itália (GVB-I SP) e utilizados para amplificar, por RT/PCR, um fragmento entre as posições 6425 e 7118 (694 nucleotídeos, nt) do RNA do GVB (GenBank, acesso X75448). O fragmento obtido inclui o gene da proteína capsidial (594 nt) codificando 197 aminoácidos com massa molecular estimada em aproximadamente 21.600 Da. A seqüência do GVB-C SP apresentou maior similaridade de nucleotídeos e aminoácidos deduzidos com o isolado italiano (acesso X75448), enquanto que o GVB-I SP foi mais similar a um outro isolado brasileiro do GVB descrito no Rio Grande do Sul (GVB BR1, acesso AF438410). Os dois isolados paulistas do GVB podem ser diferenciados por digestão com a enzima de restrição EcoRI, uma vez que há um sítio interno no GVB-C SP que está ausente no isolado GVB-I SP.

Reação de porta-enxertos de videira a Pratylenchus brachyurus e Pratylenchus zeae

Nesse trabalho, o objetivo foi avaliar a reação de oito porta-enxertos de videira aos nematoides das lesões radiculares. As estacas dos porta-enxertos Kober, SO4, 101-14, R99, 420-A, Rupestris du Lot, Riparia do Traviú e Telek 5C, cedidas pelo Centro APTA de Frutas/IAC, foram plantadas em vasos contendo mistura de solo:areia na proporção 2:1 (v:v) e mantidas em casa de vegetação. Após quatro meses, os porta-enxertos foram inoculados com 1.200 espécimes de Pratylenchus brachyurus ou P. zeae, e o milho foi usado para comprovar a viabilidade do inóculo. Aos 180 dias após a inoculação, avaliou-se o número de nematoides por sistema radicular e em 100 cm³ de solo. O milho foi avaliado aos 90 dias após a inoculação e cada vaso recebeu uma nova planta, que foi avaliada juntamente com os porta-enxertos. No milho, as populações finais de P. brachyurus e P. zeae foram respectivamente iguais a 8.040 e 6.940 indivíduos. Todos os porta-enxertos comportaram-se como imunes a P. brachyurus e P. zeae, isto é, a população final dos nematoides e o fator de reprodução foram iguais a zero. Recuperaram-se seis e 11 espécimes de P. zeae nas amostras de solo cultivadas com os porta-enxertos Kober e 420-A, respectivamente. Conclui-se que os porta-enxertos estudados apresentam potencial para serem usados em áreas infestadas com esses nematoides das lesões.

PRODUÇÃO DE MUDAS DE VIDEIRA 'RUBI' PELO MÉTODO DE ENXERTIA DE MESA em ESTACAS HERBÁCEAS DOS PORTA-ENXERTOS IAC 313 'TROPICAL' E IAC 766 'CAMPINAS'

Com o objetivo de estudar o método de enxertia de mesa em estacas herbáceas para a obtenção de mudas de videira, experimentos foram desenvolvidos em câmara de nebulização, localizada no ripado do Departamento de Produção Vegetal da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias da UNESP, no período de novembro de 1997 a dezembro de 1999. Foram utilizadas estacas herbáceas dos porta-enxertos IAC 313 'Tropical' e IAC 766 'Campinas' e borbulhas e garfos da cultivar Rubi. Foram testados os métodos de enxertia de garfagem em fenda cheia e de borbulhia em placa, em estacas herbáceas sem raízes e enraizadas, o tipo de proteção do enxerto, o tamanho das estacas e o recipiente de enraizamento. Foram avaliados o enraizamento e o pegamento de enxertos. O método de enxertia de mesa com garfagem e com proteção do enxerto com saco plástico apresentou maior pegamento de enxerto aos 30 (45,25%) e 60 dias (66,20%) após a enxertia. O tamanho da estaca não afetou o pegamento dos enxertos. Contudo, em todos os experimentos, o índice de sobrevivência dos enxertos foi muito baixo ou nulo. Estacas sem enxertia proporcionaram maior porcentagem de enraizamento (65,62%) em relação às estacas enxertadas. O método de enxertia de mesa em estacas herbáceas dos porta-enxertos IAC 313 'Tropical' e IAC 766 'Campinas' não foi eficiente para a formação de mudas de videira.

Aplicação de bioestimulante nas características ampelométricas da infrutescência da videira 'Tieta'

O ensaio foi conduzido em 2003, em vinhedo de 'Tieta'. O objetivo foi avaliar o efeito de bioestimulante nas características dos cachos de uva. Foi aplicado o produto Stimulate® que contém em sua fórmula 0,09g L-1 de cinetina (citocinina), 0,05g L-1 de ácido giberélico (giberelina) e 0,05mg L-1 de ácido indolbutírico (auxina). Os tratamentos consistiram na imersão dos cachos, 15 dias após o florescimento, em solução aquosa de 0,5% do adjuvante Natura'l Óleo, acrescidos de 5 doses de Stimulate®: 0; 28; 56; 84 e 112 ml L-1. Analisaram-se o comprimento, a largura e o peso dos cachos, bagos e engaço e o diâmetro do pedicelo. O delineamento estatístico foi em blocos ao acaso, com cinco repetições. Concluiu-se que a maior massa fresca dos cachos foi obtida em função do aumento do número de bagos fixados na ráquis e da massa do engaço. O Stimulate® associado ao Natura'l Óleo provocou o aparecimento de manchas marrons nos bagos e depreciando na qualidade, diminuiu o tamanho dos bagos e atrasou a maturação dos frutos.

Enraizamento de estacas herbáceas dos porta-enxertos de videira Campinas (IAC 766) e Jales (IAC) 572 em diferentes substratos

O presente trabalho teve por objetivo avaliar o enraizamento de estacas herbáceas de dois porta-enxertos de videiras ( Campinas - IAC 766 e Jales - IAC 572) em três tipos de substratos (casca de arroz carbonizada, vermiculita de grânulos finos e vermiculita de grânulos médios). Para tanto, estacas retiradas de plantas matrizes livres de vírus foram preparadas a partir das porções medianas de ramos tenros e verdes. O enraizamento foi realizado em caixas plásticas perfuradas contendo os substratos em câmara de nebulização. O delineamento experimental empregado foi o inteiramento casualizado com 6 tratamentos e 5 repetições, sendo cada parcela composta por 10 estacas. Após quatro semanas da estaquia, o efeito dos fatores (porta-enxertos e substratos) foi avaliado, e se pode concluir que: a) a porcentagem média de enraizamento dos porta-enxertos nos diferentes substratos é alta (90%); b) a casca de arroz carbonizada propicia os melhores resultados de enraizamento para os porta-enxertos estudados; e c) o Campinas é superior em relação ao Jales quanto ao número de raízes emitidas por estaca e à matéria do seu sistema radicular.

Identificação de marcas moleculares associadas à ausência de sementes em videira

A ausência de sementes tem sido uma característica bastante exigida pelos consumidores de uvas de mesa. O objetivo deste trabalho foi identificar marcas moleculares associadas à ausência de sementes, utilizando as técnicas RAPD e fAFLP. Foram utilizadas folhas jovens de 19 cultivares. Na análise RAPD 30, iniciadores possibilitaram amplificação de todas as amostras, produzindo 392 bandas polimórficas. Foi possível encontrar uma marca específica para a ausência de sementes, utilizando o iniciador UBC 443, que poderá futuramente ser utilizado para o desenvolvimento de marcadores SCAR, possibilitando a criação de um teste de identificação rápida e precoce de apirenia em videira. A análise fAFLP proporcionou a visualização de um dendrograma com grupos específicos de cultivares com sementes, sem sementes e porta enxertos.

Teores foliares de nutrientes, índice relativo de clorofila e teores de nitrato e de potássio na seiva do pecíolo na videira 'Niagara Rosada

A nutritional survey was carried out in 93 vineyards of the wine regions of Jundiai, Sao Miguel Arcanjo and Jales (state of São Paulo-Brazil), aiming to compare the nutrient concentration in leaf samples, the concentration of nitrate and potassium in the petiole sap and the relative chlorophyll index (IRC) of 'Niagara Rosada' vineyard. Leaves, blade and petiole in full bloom vines were sampled in 20 plants selected from each vineyard, and evaluations of the IRC in the leaf blade and the levels of NO3-and K in the petioles sap were realized. Macro and micronutrients concentrations were measured in leaf samples. The sampled vineyards were grouped by region of study, and each vineyard was considered as a replicate sample, totaling 45, 24 and 24 repetitions, in Jundiai, Sao Miguel Arcanjo and Jales, respectively. Sampled vineyards from the Jales region showed higher leaf concentrations of P, K, Ca, Mg, S, Fe and Mn, and also higher IRC and levels of nitrate and potassium in the petiole. These differences were related to the different rootstocks used, which were 'IAC 766', 'IAC 572' and 'Riparia of Traviu', respectively, for Jundiai, Jales and Sao Miguel Arcanjo. The differences highlight the need to adjust the concentration ranges of nutrients in leaf analysis, through regional trials, taking into account the rootstock and the region under study.

Fate of Some New Fungicides (Cyprodinil, Fludioxonil, Pyrimethanil, and Tebuconazole) from Vine to Wine

The fate of four new fungicides (cyprodinil, fludioxonil, pyrimethanil, and tebuconazole) from the treatment on vine to the production of wine was studied. The influence of clarifying agents (bentonite, charcoal, potassium caseinate, gelatin, and polyvinylpolypyrrolidone) on residue concentrations in wine was also studied. The fungicide residues on grapes showed different decay rates after treatment, with first-order kinetics and half-lives ranging from 8 to 57 days. Grape processing into wine caused considerable residue reduction with cyprodinil (ca. 80%), fludioxonil (ca. 70%), and tebuconazole (ca. 50%) and no reduction with pyrimethanil. The two wine-making techniques employed (with and without maceration) had the same influence on the residue concentrations in wine, except for fludioxonil which showed maximum residue reduction with vinification with maceration. Among the clarifying agents tested, only charcoal showed effective action on the elimination of residue content in wine, proving complete elimination, or almost, of fungicide residues.

Transposon Tn1721 distribution among strains of Xylella fastidiosa

Transposons are mobile genetic elements found within the genomes of various organisms including bacteria, fungi, plants and animals. Fragments of the transposon Tn1721 were found included in the genome of Xylella fastidiosa strain 9a5c. Regions from such fragments were PCR-amplified using specially designed primers (TNP1 and TNP2). In order to detect insertions of the Tn1721 element, both primers were used and one of them included a region of the transposon (TNP1) and the other one had the right repeat and part of the bacterial chromosome (TNP2). The PCR products obtained from strain 9a5c were used as a pattern for fragment size comparisons when DNA samples from other X. fastidiosa strains were used as template for the PCR assays. Differences were observed concerning the PCR products of such amplifications when some X. fastidiosa strains isolated from grapevine and plum were used. For the citrus-derived strains only the strains U187d and GP920b produced fragments with different sizes or weak band intensity. Such variations in the X. fastidiosa genome related to disrupted Tn1721 copies are probably due to the possibility of such a transposon element being still able to duplicate even after deletion events might have taken place and also because the bacterial strains in which the main differences were detected are derived from different host plants cultivated under different climate conditions from the one used as reference. © 2002 Federation of European Microbiological Societies. Published by Elsevier Science B.V. All rights reserved.

Análise isotópica (δ13c) e legalidade em néctares de uva

The aim of this work was to develop an isotopic analysis method to quantify the carbon of C3 photosynthesis cycle in grape nectar and to identify the commercial beverages in disagreement to the Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA) regulation. The nectars were produced in a laboratory, according to the Brazilian Law. Adulterated beverages with quantity of grape juice lower than the legal limit were also produced. Isotopic analysis measured the relative isotopic enrichment of grape nectar and its purified sugar fraction. Based on these results, it was possible to estimated the quantity of source C3 by means of isotopic dilution equation. To determine the existence of adulteration in commercial nectars, it was necessary to create a legal limit according to the Brazilian Law. One of the twelve commercial brands of nectar analyzed was classified as adulterated. The developed methodology proved to be efficient to quantify the carbon of C3 origin and identify the adulterated commercial grape nectar.

Use of grape polyphenols against carcinogenesis: Putative molecular mechanisms of action using in vitro and in vivo test systems

Polyphenols are present in foods and beverages and are related to sensorial qualities such as color, bitterness, and astringency, which are relevant in wine, tea, grape juice, and other products. These compounds occur naturally in forms varying from simple phenolic acids to complex polymerized tannins. Thus, it is reasonable to expect that grape-derived products elaborated in the presence of skins and seeds, such as wine and grape juice, are natural sources of flavonoids in the diet. Carcinogenesis is a multistep process that is characterized by genetic, epigenetic, and phenotypic changes. With increasing knowledge of these mechanisms, and the conclusion that most cases of cancer are preventable, efforts have focused on identifying the agents with potential anticancer properties. The use of grape polyphenols against the carcinogenesis process seems to be a suitable alternative for either prevention and/or therapeutic purposes. The aim of this article is to show the molecular data generated from the use of grape polyphenols against carcinogenesis using in vivo and in vitro test systems. © Mary Ann Liebert, Inc. and Korean Society of Food Science and Nutrition.

Improvement of grapevine iron nutrition by a bovine blood-derived compound

Iron (Fe) is essential for chlorophyll formation and plant growth. Irondeficiency chlorosis is a major nutritional disorder in several fruit trees cultivated in calcareous and alkaline soils, reducing fruit yield and quality and causing heavy economic losses. Since chelated Fe, the most widespread fertilizers used for preventing or curing Fe deficiency, pose risks of environmental pollution, the development of sustainable agronomic alternatives represents a priority for the fruit industry. In this work, we investigated the effectiveness of a bovine blood-derived product (BB; 0,125% Fe) for preventing Fe-deficiency in grapevine plants. During the vegetative season 2011 potted plants of five graft combinations: Sangiovese/S4O, Cabernet Sauvignon/S4O and Cabernet Sauvignon/140 Ruggeri, 140 Ruggeri/Cabernet Sauvignon, Vitis riparia/Cabernet Sauvignon were grown on calcareous soil. Soil treatments included: 1) Control; 2) Fe-EDDHA (Fe 6%); 3) Bovine-Blood (5 g/L); 4) Bovine-Blood (20 g/L). With the exception of Cabernet Sauvignon/S4O plants, Fe-EDDHA increased SPAD units (leaf chlorophyll content). Bovine-blood at low concentrations had similar or higher SPAD units than Fe-EDDHA. Increasing concentration resulted in further increases in SPAD units only in some graft combinations. Data highlight the efficiency of Fe blood-compound in the prevention of grapevine Fe-deficiency over one growing season.