Investigation of biofilm production and icaA and icaD genes in Staphylococcus aureus isolated from heifers and cows with mastitis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

B-Mode and doppler sonography of the mammary glands in dairy goats for mastitis diagnosis

Contents This study aimed to evaluate the sonographic characteristics of the udder and teats and to determine the Doppler indexes of mammary artery in healthy and undergoing subclinical and clinical mastitis goats. Thirty animals among Saanen and Alpine Brown goats were arranged in three groups, healthy goats (HG), goats with subclinical mastitis (SMG) and goats with clinical mastitis (CMG). Using the B-mode, the sonographic characteristics (echotexture and echogenicity) and biometry (diameter and area of the udder cistern, diameter and area of the teat cistern and thickness of the teat wall) were evaluated. Using Doppler ultrasonography, the vascular indexes of the mammary artery were obtained. It was observed hyperechogenicity with solid component in the gland cistern when comparing animals with clinical mastitis and healthy mammary tissue. Regarding the echotexture of the breast tissue, there was heterogeneity in the mammary parenchyma on the three groups, for the milk, it was observed homogeneity for animals on HG and SMG and heterogeneity for animals on CMG. Grey-scale quantitative assessment revealed increase in echogenicity (mean value) for all the structures when comparing the three groups. Biometry did not reveal statistical difference between groups, for none of the evaluated structures. Doppler examination of the mammary artery showed the decrease of end diastolic velocity and raise of pulsatility index between groups. The association of B-mode and Doppler ultrasonography is useful for the evaluation of the udder of dairy goats with mastitis. It is a sensitive and specific method for the study of this disease. Doppler mode was unable to establish reliable criteria for diagnosis of subclinical mastitis. Moreover, the quantification of echogenicity is a useful technique for the evaluation of the milk in animals with mastitis; therefore, it is suggested that it can be used as complementary technique for the diagnosis of mastitis in goats.

Effect of essential oils of Syzygium aromaticum and Cinnamomum zeylanicum and their major components on biofilm production in Staphylococcus aureus strains isolated from milk of cows with mastitis

Bovine mastitis is an inflammation of the mammary glands of cows and causes significant economic losses in dairy cattle. Staphylococcus aureus is one of the microorganisms most commonly isolated. Novel agents are required in agricultural industries to prevent the development of mastitis. The production of biofilm by Staph. aureus facilitates the adhesion of bacteria to solid surfaces and contributes to the transmission and maintenance of these bacteria. The effect of the essential oils of Syzygium aromaticum (clove; EOSA) and Cinnamomum zeylanicum (cinnamon; EOCZ) and their major components, eugenol and cinnamaldehyde, on Staph. aureus biofilm formation on different surfaces was investigated. The results showed a significant inhibition of biofilm production by EOSA on polystyrene and stainless steel surfaces (69.4 and 63.6%, respectively). However, its major component, eugenol, was less effective on polystyrene and stainless steel (52.8 and 19.6%, respectively). Both EOCZ and its major component, cinnamaldehyde, significantly reduced biofilm formation on polystyrene (74.7 and 69.6%, respectively) and on stainless steel surfaces (45.3 and 44.9%, respectively). These findings suggest that EOSA, EOCZ, and cinnamaldehyde may be considered for applications such as sanitization in the food industry.

Microbiologic characterization of equine mastitis

Mastitis occurrence in mares is low if compared to other livestock species. The microorganisms often isolated and detected in milk and mammary gland secretions of mares are Streptococcus beta-haemolytica, Staphylococcus spp., Pseudomonas aeruginosa, Actinobacillus spp., and enterobacter. The present experiment was designed to evaluate the main microorganisms present in the milk of healthy mares and having a mammary infection. One hundred and ten mammary glands from 55 lactating mares were analyzed, ranging from 15 to 150 d post-partum. The mastitis diagnostic was performed through analysis of the milk via the screened test of the mug with dark background (Tamis), mammary gland inflammation and/or systemic signs. The subclinical mammary gland infection was characterized via the California Mastitis Test (CMT). From the 55 lactating mares, 2 (3.64%) had clinical mastitis. Following the CMT, the mares presented: 13 (23.60%), 7 (12.72%), and 12 (21.88%) scores from 1+, 2+, and 3+, respectively. From the 110 mamary glands were analysed, in 47 (85.45%) of these samples strains of microorganisms were isolated. In summary, results from our experiment suggest a low occurrence of clinical mastitis in lactating mares.

Molecular epidemiology of Staphylococcus aureus isolates at different sites in the milk producing dairy farms

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Proteinograma e teores de cobre, ferro e zinco no soro sanguíneo de ovelhas da raça Santa Inês com mastite experimental por Staphylococcus aureus

Costa N.A., Simao L.C.V., Santos R.A., Afonso J.A.B., Fagliari J.J., Cardoso E.C., Soares P.C. & Mendonca C.L. 2010. [Proteinogram and serum concentrations of copper, iron and zinc in Santa Ines ewes with Staphylococcus aureus experimentally induced mastitis.] Proteinograma e teores de cobre, ferro e zinco no soro sanguineo de ovelhas da raca Santa Ines com mastite experimental por Staphylococcus aureus. Pesquisa Veterinaria Brasileira 30(5):435-442. Clinica de Bovinos, Campus Garanhuns, Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE), Avenida Bom Pastor s/n, Boa Vista, Caixa Postal 152, Garanhuns, PE 55292-901, Brazil. E-mail: carlalopes.mendonca@gmail.comThe aim of the present study was to evaluate the effect of Staphylococcus aureus experimentally induced mastitis on proteinogram and serum concentrations of cupper, iron and zinc levels of Santa Ines primiparous ewes. The right mammary gland of ten healthy ewes was inoculated with 1,0x10(4) UFC/mL of S. aureus. Clinical examination and determination of serum concentrations of proteins by electrophoresis in polyacrylamide gel (SDS-PAGE), cupper, iron and zinc, as well plasma level of fibrinogen were measured before the inoculation (control) and 12h, 24h, 36h, 48h, 60h, 72h, 84h, 96h, 108h, 120h, 132h, 168h, 180h, 288h and 336h after bacteria inoculation. All animals experimentally infected presented clinical mastitis and subsequent loss of mammary gland function. The electrophoretogram allowed the identification of 23 proteins with molecular weights (MW) ranged from 26.000 to 185.000 daltons (Da) including acute-phase proteins, IgG and IgA. A significant increase (P<0,05) in haptoglobin, ceruloplasmin, IgG and IgA concentrations was observed. Antitrypsin and acid glicoprotein concentrations did not alter. The levels of iron and zinc decreased and the cupper concentration increased. A positive correlation between plasma fibrinogen and serum ceruloplasmin (r=0.74), haptoglobin (r=0.62) and IgA (r=0.62) was also identified. Results showed the importance of ceruloplasmin and haptoglobin as acute-phase proteins in ewes with intramammary infections and confirms fibrinogen as an inflammatory marker because its high correlation with specific proteins. The alterations in the serum levels of Cu, Fe and Zn suggest the action of inflammatory mediators triggered by S. aureus.

Produção de enterotoxinas e da toxina da síndrome do choque tóxico por cepas de Staphylococcus aureus isoladas na mastite bovina

A total of 72 strains of Staphylococcus aureus were examined for the production of staphylococcal enterotoxins (SE) A, B, C, D and toxic shock syndrome toxin (TSST-1). The strains were isolated from milk samples from cows with mastitis in dairy herds of São Paulo State, Brazil. Off 72 isolates, 38 (52.8%) produced SEA, 38 (52.8%) SEB, 32 (44.4%) SED, 28 (38.9%) SEC and 27 (37.5%) TSST-1. From the 72 strains, 66 (91.7%) produced, at least, one or more toxin, including TSST-1.

Ocorrência de Staphylococcus sp. em água utilizada em propriedades leiteiras do Estado de São Paulo

Com o objetivo de verificar o papel da água utilizada durante a produção do leite como via de transmissão de Staphylococcus sp., fez-se a contagem de Staphylococcus coagulase negativa e Staphylococcus aureus nas amostras de água das fontes, dos reservatórios e dos estábulos de 30 propriedades leiteiras situadas na região Nordeste do Estado de São Paulo. As maiores ocorrências de isolamentos (10,0 e 16,6%) e os maiores valores médios (4,3×10(4) e 2,5×10(4)) de contagens desses microrganismos foram encontrados nas amostras de água dos estábulos utilizada na obtenção de leite. Estes resultados são importantes pois evidenciam a possibilidade de contaminação do leite ou dos animais por cepas patogênicas.

Free and total GMP (glycomacropeptide) contents of milk during bovine lactation

Amostras quinzenais, desde o parto até o final do período de lactação, obtidas de 34 vacas de três diferentes raças e propriedades, foram analisadas quanto à presença de GMP livre. Um pool das amostras quinzenais de cada rebanho foi analisada tanto para o conteúdo de GMP livre quanto para o GMP total (liberado da k-caseína pela ação da renina), correlacionando-os com as condições sanitárias do animal e do úbere, à fase da lactação e à produção de leite. A maioria dos problemas sanitários concentrou-se próximo ao parto, com poucas e espaçadas ocorrências de mastites clínicas. Os resultados do teste de CMT mostraram reações compatíveis às fases da lactação. Para o GMP livre as maiores variações ocorreram em função do período de lactação e em conseqüência de mastites clínicas e subclínicas. Valores elevados foram observados no início da lactação (5,87mg de ácido siálico/L de leite), normalizando para valores próximos de 3,30mg/L já ao final do segundo mês e voltando a elevar-se no terço final da lactação. em média, as mesmas tendências foram observadas para o teor de GMP total liberado pela ação de coalho comercial, iniciando com valores ligeiramente elevados (35,59mg/L), tornando-se normal e assim se mantendo até o sexto mês com valores próximos a 27,15mg/L, e novamente elevando-se gradualmente até o final da lactação, com 58,35mg de ácido siálico/L de leite. Esses resultados mostram-se úteis para a correta interpretação de métodos aplicados à seleção do leite, seja em relação ao status proteolítico da matéria-prima ou mesmo para coibição de fraudes por adição de soro ao leite.

Occurrence of Staphylococcus aureus in raw milk produced in dairy farms in São Paulo state, Brazil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Comportamento da condutividade elétrica e do conteúdo de cloretos do leite como métodos auxiliares de diagnóstico na mastite subclínica bovina

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Qualidade da carne ovina submetida ao processo de salga

Foi estudada a qualidade da carne ovina submetida a diferentes teores de sal no processo de salga, utilizando-se 18 pernas desossadas provenientes de cordeiros ½ Ile de France ½ Ideal, machos inteiros, com peso vivo médio de 30kg. Os tratamentos constituíram-se em: T1 - controle; T2 - salga a 15% e T3 - salga a 20%. As mantas de carne foram lavadas rapidamente em água corrente para remoção do excesso de sal e secadas à sombra. As análises foram realizadas antes da salga e 67 horas após o início da mesma. As perdas de peso ao cozimento, maciez, cor, umidade (2, 4, 16, 28, 40 e 67 horas após o início da salga) e número de TBARS, substâncias reativas ao ácido 2-tiobarbitúrico, foram realizadas no músculo Semimembranosus. Os diferentes teores de sal não influenciaram (P>0,05) na luminosidade da carne, entretanto os teores de vermelho e amarelo, que foram influenciados (P<0,05). As perdas de peso ao cozimento e a umidade foram menores (P<0,05) nas carnes salgadas. A carne dos tratamentos controle e com 15% de salga, apresentou maior (P<0,05) maciez, em relação à carne do tratamento com 20% de salga. A carne que foi submetida a 20% de salga, apresentou maior oxidação lípidica, não diferindo da salga a 15%. A salga a 15% forneceu melhores resultados com valores de perdas de peso ao cozimento, cor, umidade e número de TBARS semelhante a salga a 20%, porém com maior maciez.

Características físico-químicas e sensoriais da carne de cordeiros terminados com dietas contendo cana-de-açúcar ou silagem de milho e dois níveis de concentrado

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeitos genéticos e de ambiente sobre a produção de leite e a contagem de células somáticas em vacas holandesas

Visando estudar as associações genéticas e fenotípicas entre a contagem de células somáticas (CCS) e a produção de leite até 305 dias (P305) e avaliar as perspectivas de utilização da CCS como critério de seleção em bovinos leiteiros, utilizaram-se dados obtidos pelo Programa de Análise da Eficiência de Rebanhos Leiteiros e da Qualidade do Leite, desenvolvido pelo Laboratório de Qualidade do Leite da ESALQ - USP. Por não apresentar distribuição normal, a contagem de células somáticas (CCS) foi transformada para uma escala logarítmica (ECS). Foram estimados os parâmetros genéticos para a P305 dias e a média dos escores de células somáticas (MECS). A média da produção de leite até 305 dias foi de 7.519,51 kg e a da MECS, de 4,04. As herdabilidades estimadas para P305 e MECS foram de 0,22 e 0,13, respectivamente, nas análises univariadas. Valores semelhantes foram estimados pela análise bivariada. A correlação genética entre a P305 e MECS foi de -0,16. Por apresentar correlação genética negativa, mas de baixa magnitude, a seleção para produção de leite não ocasionaria, a princípio, aumento indesejável da MECS.

Caracterização molecular de estafilococos isolados de vacas com mastite subclínica e ordenhadores

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)