Desenvolvimento e validação do método de difusão em ágar para quantificação de fluconazol cápsulas e aplicação em estudos de estabilidade

O fluconazol é um antifúngico de amplo espectro indicado para o tratamento de infecções fúngicas sistêmicas e superficiais. A determinação da potência dos antimicrobianos é importante no controle e na garantia da qualidade das preparações farmacêuticas e faz-se necessário o desenvolvimento de procedimentos práticos e econômicos que possam ser validados e aplicados no doseamento desses fármacos. Dentre os ensaios microbiológicos, os mais comumente empregados são o de difusão em ágar e o turbidimétrico. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar métodos microbiológicos para determinação da potência do fluconazol cápsulas. O método de difusão em ágar foi desenvolvido empregando ágar Sabouraud e Candida albicans ATCC 64548 como micro-organismo teste. Foi utilizado o delineamento 3 x 3, segundo preconiza a Farmacopeia Brasileira (2010). A validação do método demonstrou linearidade entre o diâmetro dos halos de inibição e o logaritmo da concentração numa faixa de 25,0 a 100,0 µg/mL. Os resultados foram precisos, com desvio padrão relativo igual a 6,15%, e exatos, com intervalo de tolerância de 97,30%, dentro dos limites permitidos. O método foi aplicado ainda em estudos de estabilidade, nas condições de estresse calor úmido, em câmara climática a 40 ºC e 75% de umidade relativa por 90 dias; calor seco, em estufa a 60 ºC por 66 dias e fotodegradação, em câmara espelhada com luz UVC por 66 e 180 dias. Os valores de teor médio calculados foram de 30,27% para calor úmido; 27,72% para calor seco; 33,29% para fotodegradação durante 66 dias e 25,00% para fotodegradação durante 180 dias

Desenvolvimento de protótipos antifúngicos contra biofilmes de Histoplasma capsulatum

A histoplasmose é uma doença respiratória e sistêmica causada pelo fungo dimórfico Histoplasma capsulatum. A micose é endêmica em diversos locais do mundo, incluindo o Rio de Janeiro. Já se sabe que a gravidade de doenças, principalmente das que são causadas por agentes oportunistas, depende principalmente do estado imunológico do paciente. O mesmo se aplica à histoplasmose. Porém, nos últimos anos, tem sido estudada a influência da capacidade de formação de biofilme por esses agentes no desenvolvimento da doença e manifestações das mesmas. Diversos fungos apresentam a habilidade de formar biofilmes e recentemente descobriu-se que o H. capsulatum também possui tal habilidade. Embora a relação dos quadros clínicos de histoplasmose e a formação de biofilme por seu agente ainda não esteja completamente esclarecida, tal habilidade pode estar relacionada à sua defesa contra o sistema imunológico e ao agravamento da doença. Este fato, atrelado à escassez de opções terapêuticas antifúngicas, deixam claro a necessidade de busca por novas substâncias que sejam capazes de inibir os fungos e também que sejam capazes de destruir seus biofilmes ou inibir sua formação. Neste aspecto destacam-se as substâncias de origem vegetal, que já têm sido amplamente estudadas e cuja atividade já foi comprovada. Entre elas estão os compostos fenólicos, presentes em diversas espécies vegetais e que têm como exemplo o ácido protocatecuico, os ésteres, derivados deste e também o ácido cafeico e seus derivados. O estudo em questão teve como objetivo investigar a atividade de tais compostos sobre o H. capsulatum em sua forma leveduriforme livre e em biofilme, através da realização de testes de sensibilidade com diferentes concentrações dos extratos, monitorados e revelados por agentes colorimétricos, como o alamarBlue ® e o sal tetrazólio, XTT. Através da leitura visual e por valores de absorção por ...

Seleção de micro-organismos com potencial de biodegradação de hidrocarbonetos e biodiesel

The oil and biodiesel are oily substances which, if spilled or thrown out in the environment, can cause serious damages. In this context, bioremediation techniques can be used to the recovering of sites degradated by mineral or vegetable oil, besides them, the biodegradation. However, it is necessary that there are microorganism strains used to degradate the contaminant, previously selected for the fast, efficient and minimum impact remediation. The main objective of this study was to isolate microorganism strains coming from different ecological recesses and verify their potentiality on biodegradating oil and biodiesel. Strains of bacteria, fungi and yeasts were isolated from soils contaminated by hydrocarbons (diesel, gasoline, grease) before, by doing striations on culture plates. On the biodegradation tests, it was used the redox indicator, 2,6-dichlorophenol indophenol (DCPIP), then, after the indicador’s discoloration, the absorbance of the suspension obtained was measured. 46 different microorganism strains were isolated, and the oil, when it was used as a carbon resource, it was degradate easier than the biodiesel. The experiments showed that, in a period, the site impacted by oil spills recovers itself by the biodegradation, in aerobic conditions, by the redox activity.

Método de avaliação e biodegradação do poliacrilato de sódio

Polímeros são macromoléculas de alta massa molecular cada vez mais presentes nas atividades humanas. Estas moléculas são utilizadas com frequência para sintetizar plásticos, elastômeros e fibras. Os polímeros podem ser divididos em naturais e sintéticos. Os polímeros de origem natural são aqueles encontrados na natureza, como por exemplo: celulose, hemicelulose, glicogênio, proteínas, amido, lignina, entre outros. Os polímeros sintéticos são aqueles produzidos pela síntese química induzida pelo ser humano, como os diferentes tipos de plásticos. Contudo, alguns destes materiais sintéticos possuem alta durabilidade acarretando grande acúmulo de resíduos que contaminam o meio ambiente. O poliacrilato de sódio (PAS) é uma destas moléculas sintéticas que funciona como superabsorvente utilizado em grande escala nas fraldas descartáveis. A aplicação do PAS nas fraldas permitiu diminuir o volume deste material sem perda da eficácia. Cerca de 136 milhões de quilos de polímeros de poliacrilato são utilizados anualmente. Buscando diminuir a quantidade deste material no meio ambiente, são necessários estudos que viabilizem alternativas de sua decomposição. Dentre as opções viáveis está o processo de biodegradação, que é caracterizado pela ação de seres vivos, sobretudo os pertencentes ao grupo dos microrganismos (bactérias e fungos), que utilizam o material para retirar a energia para o seu desenvolvimento. Este projeto tem como objetivo avaliar a biodegradabilidade do poliacrilato de sódio (PAS) e modificar sua estrutura via degradação microbiana. Análises descritivas e comparativas são as bases para o estudo e compreensão da biodegradação do PAS. Para os testes de biodegradação serão utilizados microrganismos do solo e o fungo Aspergillus niger. Após 8 meses de biodegradação do composto enterrado pôde-se concluir através... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Aspectos da biologia e fisiologia da alimentação do cupim neotropical Cornitermes cumulans (Isoptera, Termitidae)

Os Isoptera são insetos sociais cujas colônias apresentam diversas castas, as quais têm um rígido sistema de divisão de trabalho que visa otimizar a eficiência da colônia. Estas castas apresentam morfologia específica, que capacita estes indivíduos a desenvolverem determinadas tarefas com eficiência. Os cupins apresentam aparelho bucal mastigador, constituído pelas seguintes peças bucais: labro, mandíbulas, maxilas, lábio, epifaringe e hipofaringe. Sua dieta alimentar é celulósica e bastante variada, sendo que estes insetos podem se alimentar de madeira (em vários estágios de decomposição), gramíneas, plantas herbáceas, serapilheira, fungos, líquens, partes de artrópodes e húmus. O estudo desse tipo de dieta é muito difícil, uma vez que o material já se encontra bastante decomposto antes de ser ingerido pelo animal. Cornitermes cumulans é uma espécie de cupim nativa do Cerrado brasileiro, pertencente à família Termitidae, subfamília Syntermitinae, que constrói ninhos em montículos, ricos em argila, que podem atingir até 4 metros de altura. Na parte interna dos ninhos, pode-se observar galerias grandes e de aspecto arredondado e um centro celulósico de coloração escura, de textura lisa e pouco resistente, onde os cupins armazenam um alimento, que parece ser previamente mastigado e depois regurgitado. Mesmo com a grande ocorrência desta espécie de cupim nas áreas de pastagens, seus verdadeiros hábitos alimentares são ainda pouco conhecidos. As informações disponíveis são contraditórias, uma vez que não está esclarecido a qual grupo funcional C. cumulans pertence e se existe realmente uma alimentação “in situ” desta espécie no campo. Em vista do exposto, este estudo teve como objetivo geral esclarecer o hábito alimentar de C. cumulans e a natureza química do alimento armazenado no ninho para compará-lo com o alimento coletado pelos... (resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Produção e avaliação da estabilidade de enzimas fúngicas

As enzimas estão presentes em todas as células vivas, onde exercem a função de catalisadores das reações que compõem as vias catabólicas e anabólicas do metabolismo celular. Esses biocatalisadores são moléculas de proteínas e seu poder catalítico está associado à conformação nativa, que depende de condições específicas de pH, temperatura e força iônica do meio. Os micro-organismos são bastante atrativos para a indústria, pois possibilitam a produção de enzimas por processos fermentativos em larga escala com regularidade necessária e simplicidade na requisição nutricional. Assim, embora alguns biocatalisadores sejam extraídos de tecidos animais e vegetais, as enzimas industriais são, em sua maior parte, obtidas a partir de micro-organismos. Este trabalho teve como objetivo a produção das enzimas lipase e β-glucanase a partir dos fungos Aspergillus niger e Trichoderma reesei, respectivamente, em diferentes meios de cultura, para determinar as condições de maior produção da enzima em questão. As enzimas produzidas em agitador orbital foram obtidas a partir da filtração do produto da fermentação, precipitação com sulfato de amônio e liofilização. Após a produção e precipitação a atividade das enzimas e a concentração de proteínas foram quantificadas, os parâmetros cinéticos foram determinados frente a diferentes pHs, temperaturas e força iônica do meio. A lipase apresentou melhor atividade a 30°C e em pH 6,0. A presença dos íons Mg2+ e Zn2+ levaram a um aumento na atividade da enzima. A β-glucanase apresentou maiores atividades quando submetidas a 37°C e pH 5,0. Os íons Mg2+, Cu2+ e Ca2+ induziram melhor a atividade enzimática.

Introdução de Lentinulaedodes (Shiitake) e Pleurotusostreatus (Shimeji) em bagaço de cana termo explodido para diminuição da toxicidade

Ethanol production has gained great prominence in the investment new renewable energy sources and Brazil is among the leaders of production. However, this activity generates large amounts of waste being the largest volume of the sugar cane bagasse. For this reason looking up ways to use this material as burning for energy production and composition of forage in the diet of ruminants, however there are difficulties to use this production for this last one. This paper proposes a microbiological treatment with Lentinula edodes and Pleurotus ostreatus in order to enable the bagasse in ruminant feed composition in order to be used more noble than their burning. After treatment with the fungus, tests were performed for quantifying crude protein by the method of Kjeldhal. It was verified that the protein content in the pure bagasse was 1.0% after fermentation the protein content was 4.2% with L.edodes and 4.9% with P. ostreatus. To evaluate the protein quality of the product fermented by L. edodes and P. ostreatus was applied microbiological method for growth of Enterococcus zimogenes verifying that after fermentation the protein quality was 76 and 27.4% with L. edodes and P.ostreatus, respectively, compared with casein. The quantification of amino acids showed significant improvement of protein with altered amino acid profile with treatments of fungos. About of DQO and BOD were also found considerable improvement besides considerable drop in toxicity as measured by acute toxicity test with Daphinia similis

Influência do receptor TLR-2 no processo de fagocitose do fungo Sporothrix schenckii

A esporotricose é uma micose provocada pelo fungo Sporothrix schenckii, resultante da inoculação direta de conídios e hifas do fungo. A doença se desenvolve habitualmente na pele, no tecido subcutâneo, podendo através dos vasos linfáticos, comprometer órgãos internos. Nos últimos anos tem-se voltado à atenção à participação do receptor Toll Like-2 no reconhecimento e fagocitose de diversos antígenos fungicos. A partir disto, o objetivo deste estudo foi estudar a influência do receptor Toll Like-2 no processo de fagocitose do Sporothrix schenckii em camundongos C57BL/6. Este estudo avaliou o processo de internalização do Sporothrix schenckii por macrófagos murinos obtidos de camundongos C57BL/6 WT e C57BL/6 TLR-2 KO. Os experimentos foram realizados através da utilização de lâminas de cultura celular e microscopia ótica. Além de analisar a viabilidade de células fúngicas internalizadas através de ensaios de sobrevivência. Como resultados pudemos observar a significativa importância do TLR-2 no processo de internalização deste microrganismo, uma vez que o estudo evidenciou uma eficácia de internalização acima de 85% dos macrófagos obtidos de animas selvagens em relação aos obtidos de animais TLR-2 KO. Além disso, através de ensaios de sobrevivência foram obtidos resultados que sugerem a ausência de viabilidade das células fúngicas depois de fagocitadas

Avaliação toxicológica durante a biodegradação de óleos e biodiesel

Atividades relacionadas com a extração do petróleo, bem como as atividades derivadas envolvem grandes riscos, que podem ser ambientais ou à saúde humana. Podem ser de forma direta, como os derramamentos, ou indireta, como resíduos gerados pela sua utilização, poluindo ar, corpos d’água e solos. A biorremediação consiste na utilização de microrganismos tais como as bactérias, fungos filamentosos e leveduras para remediar um ambiente contaminado, transformando os compostos em algo pouco tóxico ou sem nenhuma toxicidade. A ciência que estuda os efeitos tóxicos nos organismos e no ambiente se chama toxicologia. Por isso existe uma íntima ligação entre essas duas ciências. O presente projeto tem como objetivo estudar a toxicidade de óleos lubrificantes automotivos (mineral novo, sintético novo e usado), óleos vegetais (novo e usado) e biodiesel durante sua biodegradação em ambiente terrestre. Análises descritivas e comparativas são as bases para o estudo e compreensão da biodegradação dos contaminantes aqui citados. Os testes toxicológicos darão uma idéia de biodegradação dos diferentes contaminantes no solo. Para os testes de toxicidade serão utilizadas sementes de Eruca sativa (rúcula), sementes de Lactuca sativa (alface) e Eisenia andrei (minhoca). Após 180 dias de biodegradação dos compostos pôde-se concluir que o óleo lubrificante sintético é o mais biodegradável e os demais contaminantes necessitam de tempo de biodegradação superior a 6 meses para que sua toxicidade fique baixa.

Produção e caracterização de a-L-arabinofuranosidase de Penicillium janczewskii

A xilana, o segundo principal componente da parede celular vegetal, pertence ao grupo das hemiceluloses, sendo composta por diferentes carboidratos, principalmente xilose e arabinose. Na natureza, devido a sua heterogeneidade estrutural, este complexo polissacarídeo é completamente hidrolisado pela ação sinergística de diferentes enzimas, incluindo xilanases e β-xilosidases, responsáveis pela degradação da sua cadeia principal e outras enzimas chamadas auxiliares ou desramificantes, importantes para remoção dos grupos laterais. Dentre estas últimas, destacam-se as α-L-arabinofuranosidases, enzimas responsáveis pela remoção de resíduos L-arabinofuranosil do polímero. As arabinofuranosidases podem ser produzidas por micro-organismos, como bactérias e fungos, sendo essencialmente enzimas extracelulares. Fungos, especialmente os de solo e madeira, têm sido utilizados para produção de enzimas xilanolíticas, sendo particularmente interessantes do ponto de vista industrial, pelo fato de secretarem suas enzimas diretamente no meio em que se encontram não necessitando de ruptura celular para a liberação das mesmas. Além disso, apresentam níveis de produção mais elevados que os obtidos em culturas bacterianas ou de leveduras. A crescente preocupação com a escassez dos recursos naturais e com a degradação ambiental tem levado à busca por tecnologias mais eficientes, mais competitivas e menos poluentes. Atualmente, muitos processos industriais empregam enzimas microbianas, apresentando inúmeras vantagens em relação às técnicas convencionais. As α-L-arabinofuranosidases podem ser utilizadas individualmente ou em combinação com outras enzimas, representando uma ferramenta promissora para aplicação em diversos processos biotecnológicos como no branqueamento da polpa celulósica, na síntese de oligossacarídeos, na produção de etanol de segunda geração, ou ainda...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Biologia e ecologia comportamental da vespa eussocial primitiva Mischocyttarus (Megacanthopus) parallelogrammus (Hymenoptera, Vespidae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Diversidade de populações de Phyllosticta spp. de goiabeiras e de mangueiras em diferentes ambientes

Pós-graduação em Agronomia (Produção Vegetal) - FCAV

Estudo das interações de peptídeos antimicrobianos e sistemas miméticos de membrana por dinâmica molecular

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Aplicações de coquetéis de celulases para a sacarificação enzimática do bagaço de cana-de-açúcar

Pós-graduação em Química - IBILCE

Microbiota contaminante em bebidas lácteas fermentadas comerciais

Lately, the acceptability of fermented dairy beverages has been increased, due to the nutritional benefits, the practical consumption and the low cost of product for the manufacturers, and consequently for final market price to the consumers. During the manufacturing process, these products can be susceptible to microbiological contamination. The present study investigated the contaminant microbiota in fermented dairy beverages produced by small- and medium-sized companies, by means of analyses on moulds and yeasts counting, determination of the Most Probable Number (MPN) of total and thermo tolerant coliforms, Escherichia coli and Salmonella spp. detection, and determination of pH value. In spite of the absence of Salmonella spp., a high counts of yeasts and moulds were found, and E. coli was detected in five samples (16.67 %); and the sample were classified as “products in poor sanitary conditions”, because they showed thermo-tolerant coliforms counting higher than the standard established by the legislation in force. Therefore, quality programs such as Good Manufacturing Practices (GMP) and Hazard Analysis and Critical Control Points (HACCP) should be employed to prevent any contamination risk, in order to provide safe products to consumers.