Análise proteômica do veneno da vespa social Polistes lanio lanio (Hymenoptera; vespidae)

Os venenos dos insetos da ordem Hymenoptera (abelhas, vespas e formigas) são responsáveis por um grande número de acidentes causados por ferroadas. Estes acidentes podem produzir uma série de reações, variando desde uma reação local, até uma reação sistêmica e anafilaxia. Estudos mostraram que 0,8% a 5% da população mundial sofrem de reações sistêmicas generalizadas após ferroadas de insetos pertencentes à ordem Hymenoptera. As espécies pertencentes ao gênero Polistes são tipicamente encontradas no sudeste do Brasil, causando muitos acidentes por ferroadas devido principalmente à proximidade dos ninhos destes insetos das habitações humanas. P.lanio lanio é uma das vespas sociais que mais causam acidentes no Estado de São Paulo e pouco se sabe sobre a composição de seu veneno. As vespas do gênero Polistes são capazes de ferroar múltiplas vezes e causar reações alérgicas severas. Dessa forma, a identificação das proteínas mais abundantes do veneno da vespa social Polistes lanio lanio por uma abordagem proteômica, se faz necessária para uma melhor compreensão dos mecanismos de ação desse veneno. A identificação de várias proteínas do veneno de P. l. lanio, revelou importantes aspectos sobre o processo de envenenamento por vespas do gênero Polistes, os quais podem ajudar no melhor entendimento dos mecanismos de ação destes venenos. A compreensão dos principais alérgenos é uma etapa importante para o desenvolvimento de novos extratos específicos para diagnósticos de alergia e imunoterapia de pacientes sensíveis ao veneno de vespas.

Fungos fitopatógenos associados às formigas cortadeiras (Formicidae: Tribo Attini)

The ants of genus Atta belong to the Attine tribe (order Hymenoptera, family Formicidae, subfamily Myrmicinae) and are commonly known as leaf-cutting ants for having the habit of cutting several vegetable species used as substrate for growing mutualistic fungus (Agaricales: Lepiotaceae). Recent studies showed that, in addition to that, other fungi may occur in the nests in a dorment state or participate in the functioning dynamic of this symbiosis. Researches related to surveys of fungus biodiversity in nests of different Atta species have found important phytopathogenic representatives. In Brazil, studies about integrated management of plagues, developed by Embrapa Meio Ambiente (Embrapa Environment), point out the need of higher investments in projects that involve the phytopathogenic transmission by insects in order to reduce costs to control them or minimize environmental impact. The purpose of this study was to broaden the knowledge about the ecology of these fungi, isolating and identifying species associated with Attine tribe ants, thus understanding the scope of pathogenic and phytopathogenic species spread by these ants. For that reason, gynes were collected from Atta laevigata and Atta capiguara anthills located at Unesp Botucatu (São Paulo, Brazil) campus. In order to isolate the fungus, the mineral oil floating technique was used. The identification of the isolated fungi was done based on microscopic and molecular characteristics using DNA ribosomal sequencing. The most highly abundant genera found so far were: Cladosporium, Exophiala, Penicillium, Acremonium, Phialophora and Teratosphaeria. Representatives of the genera Exophiala, Phialophora and Cladosporium may be human pathogens, whereas Teratosphaeria and Penicillium are related to diseases in Eucalyptus and citric fruits, respectively. The results show that these ants may host important fungal species besides the ones already... (Complete abstract click electronic access below)

Estudo de repelência com diversos produtos de origem natural em operárias de Apis mellifera em semi-campo

Accidents involving insects of the Hymenoptera order occur very often with both human beings and domestic pets and, in Brazil, they include aggravated cases with Africanized bees (Apis mellifera). The aggravation of deforestation and the lack of awareness regarding the subject are factors that contribute to the rise of the number of bees in the urban environment. This fact has been causing several derangements among the population because, once these insects are bothered, they become very aggressive. Considering the risks to population and the great amount of accidents that could be avoided, the development of researches with the goal of determining repelling substances is rather important. Therefore, this research evaluated the repelling action of essential natural oils obtained from rosemary (Rosmarinus oficinalis), lemongrass (Cymbopogon citratus), thyme (Thymus vulgaris), cedar (Juniperus virginiana), clove (Syzygium aromaticum) and mint (Mentha piperita) on A. mellifera Africanized worker bees in both semi-field and aggressiveness tests. Among the evaluated composites, the lemongrass, mint and clove essential natural oils presented a grater repelling effect, inhibiting the bees’ visitation to the managed feeders almost completely. The cedar essential natural oil was the least effective composite, and the rest of the tested oils presented satisfactory repellency, which became less effective over time, according to non-parametric Mann-Whitney test. However, further tests showed that only the lemongrass essential natural oil caused a less aggressive response from the bees, which can confirm the repelling power of this composite. This way, according to the results obtained through this research, lemongrass presents a greater potential to the development of effective repelling formulas against Africanized bees (Apis mellifera)

Identificação dos Arthropoda: subsídios para o ensino de Ciências e Biologia

As características dos artrópodes (insetos, crustáceos, aracnídeos, miriápodes) e conceitos a eles relacionados são conteúdos abordados pelas disciplinas de Ciências e Biologia, no ensino fundamental e médio. Neste contexto, considera-se relevante a elaboração de materiais que contribuam para os processos de ensino e aprendizagem desta temática e que incorporem a dimensão lúdica. Assim, a proposta desenvolvida teve como objetivos principais a elaboração e confecção de uma caixa contendo espécimes de artrópodes incrustados em resina, de modo a permitir o contato e a manipulação desses espécimes pelos alunos. Além disso, elaboramos um jogo didático, abordando as estruturas morfológicas dos artrópodes e suas funções, com o intuito de fixar o conhecimento adquirido em sala pelos alunos. Como complementação, desenvolvemos uma guia de orientação para o professor e um manual direcionado aos alunos, para os auxiliarem durante o desenvolvimento da aula. A elaboração deste trabalho foi uma maneira de tentar transmitir o tema proposto de forma dinâmica e agradável, tanto para o professor quanto para os alunos. O conteúdo fornecido neste trabalho foi baseado em livros didáticos específicos em zoologia de invertebrados, para possibilitar aulas com conteúdo adequado e para prevenir erros conceituais

Atividade imunomoduladora de parasporina de Bacillus thuringiensis sobre linfócitos e monócitos humanos

Bacillus thuringiensis is an environmental bacteria that produces a group of crystallizable proteins (Cry) that are toxic for several insects and worms species. Recently, it was described a novel class of Cry proteins called parasporins (PS) that showed cytotoxic effects on animal and human tumor cells. Six types of PS have been described so far, PS1 to PS6, and their cytotoxic activity has been studied. However, the direct effect on tumor cells has been the current research focus, while the immunomodulatory role of the PS has not been studied yet. Therefore, this study aimed to verify whether PS of TC 2.3.1R6 B. thuringiensis strain has immunostimulatory activity on human lymphocytes and monocytes. We have evaluated the protein toxicity against human cells, the lymphoproliferative activity and the effects on peripheral blood monocytes. The PS-PK showed no toxic or stimulating activity on lymphocyte proliferation. However, it inhibited the spontaneous production of IL-10 as well as ConA-induced and the production of IFN-γ. PS-PK decreased the release of hydrogen peroxide and increased the production of TNF- α by monocytes. PS-PK performed inhibitory production of hydrogen peroxide and TNF-α by monocytes, whereas PS-Tp showed stimulation of the production of hydrogen and TNF-α

Comportamento forrageiro de abelhas visitantes de Solanun lycocarpum (Solanaceae) St. Hill e aspectos da biologia floral

A polinização é um serviço indireto prestado pelos ecossistemas, de valor ambiental e econômico para a sociedade humana. Em função dessa importância, a conservação de espécies de abelhas nativas é fundamental e o conhecimento de aspectos da biologia e ecologia dessas espécies é a base para a proposição de planos de manejo e conservação. Neste trabalho, foram feitas observações focais, avaliando os padrões de atividades diárias e sazonais, com ênfase no comportamento de coletas de recursos de abelhas nativas em flores de Solanum lycocarpum, uma espécie em que é característica a síndrome de polinização vibrátil. Os visitantes observados foram dez espécies de abelhas: Apis mellifera L., Oxaea flavescens K.; Centris sp1, Centris sp2, Exomalopsis sp.., Xylocopa suspecta M., Xylocopa frontalis K., Bombus morio S., Bombus atratus F., Trigona sp., além de espécies de abelhas da família Halictidae. As abelhas maiores, como Xylocopa, Oxaea, Centris e Bombus são certamente os polinizadores mais eficientes de Solanum lycocarpum. Isso se deve ao comportamento dessas abelhas nas flores, particularmente em relação à posição da abelha em relação ao cone de anteras quando forrageia e à seqüência de movimentos que cada uma desenvolve nas flores.

Fungos melanizados associados a formigas cortadeiras (Formicidae: Tribo Attini)

Leafcutter ants are considered pests in agriculture for their impact in human crops, as they behave utilizing foliar fragments to raise their simbiont fungi (Agaricales: Lepiotaceae) inside their nest. Recent studies have noticed that other fungi may be associated to ants inside their nests, for instance, fungi with melanized wall, known by “dematiaceous”. Historically, many black fungi have been noticed as fitopathogens of many plant cultures with economic importance, highlighting dematiaceous ecological behavior importance in this study. This investigation had the purpose of amplifying ecological knowledge of this fungi, isolating and identificating dematiaceous fungi found in Attini nests, having the intention of understanding plant pathogens dispersion by ants. In this work, 66 isolates were characterized in the following genus: Aspergillus, Penicillium, Paecilomyces, Oxyporus, Rhodotorula, Bipolaris, Curvularia, Fusarium, Giberella, Paraphaeosphaeria, and Cladosporium. The genus Bipolaris, Curvularia, Fusarium and Giberella are known for their opportunistic behaviour, with some published human infections in literature. Fusarium is a notorious fitopathogen, with wide number of descriptions and studies involving pathogenicity development, biochemistry and genetics. The isolates outline is of phyto – associated (phytopathogens, endophytic or epiphitic), fulfilling this work intention in alarming fungi capacity of dispersal by ants. The comprehension of phytopathogenical processes may be clarified based on the knowledge of oportunistics fungi that may utilize ants bodies for their own dispersal. The identification of isolates with capacity of infecting humans brings out public health issues.

O papel da serapilheira no desenvolvimento inicial de mudas de espécies florestais nativas

A serapilheira de matas e florestas é rica em matéria orgânica e responsável pela ciclagem de nutrientes que ocorre neste ecossistema. Além de atuar como protetora do solo e habitat para diversos microrganismos e insetos. O presente estudo buscou analisar o papel da serapilheira no desenvolvimento de mudas florestais nativas em viveiros. As espécies utilizadas no experimento foram Parapitadenia rigida (Benth) (angico-vermelho), Acacia polyphylla DC. (monjoleiro), Lonchocarpus muehlbergianus Hassl. (embira-de-sapo) e Schizolobium parahyba (Vell.)S.F.Blake (guapuruvu). O crescimento foi analisado em quatro substratos: mineral (S1), mineral com serapilheira na proporção de volume 1:1 (S2), orgânico usado em viveiros (S3) e orgânico usado em viveiros com serapilheira na proporção de volume 1:1 (S4). O delineamento experimental consistiu em blocos ao acaso com 16 tratamentos e 5 repetições. Durante uma primeira fase foram feitas as medições de altura e diâmetro das mudas em fase de viveiro. A segunda fase foi a análise da biomassa seca e avaliação da sobrevivência inicial em campo. O resultado apresentou melhores desempenhos no crescimento e sobrevivência nos tratamentos com serapilheira em comparação aos sem serapilheira. Podemos concluir que a serapilheira apresenta potenciais benéficos relevantes para a produção de mudas florestais

Avaliação da toxicidade do dióxido de carbono no sistema nervoso de Apis mellifera (Hymenoptera, Apidae)

A concentração de dióxido de carbono (CO2) global eleva-se a cada ano, isso deve-se a um desequilíbrio entre as taxas de emissão deste gás por atividades antropogênicas e fontes naturais e a taxa que a biosfera e oceanos o removem da atmosfera. O CO2 é um importante constituinte químico do ambiente, pois este é um gás que aprisiona radiação infravermelha emitida pela superfície da Terra, contribuindo, assim, para a manutenção da temperatura global necessária a vida. As alterações na concentração de CO2 na atmosfera afetam inúmeros animais que dependem que estas estejam altamente controladas para poderem sobreviver. Em abelhas Apis mellifera valores elevados de temperatura ou níveis de CO2 dentro da colméia podem ter efeitos deletérios. Estes insetos são considerados bioindicadores naturais, pois apresentam diferenças fisiológicas conforme as condições do ambiente, sendo utilizadas na avaliação de efeitos a várias substâncias presentes no meio. Atualmente uma das técnicas utilizadas para a avaliação do efeito de estímulos externos é a utilização da marcação da proteína c-Fos através da expressão do gene c-fos, que indicam tanto a existência de atividade celular como também possibilita a identificação de áreas cerebrais determinadas. Esta proteína foi utilizada com o intuído de verificar se concentrações elevadas de gás carbônico são capazes de alterar as funções cerebrais da abelha Apis mellifera, comprometendo sua atividade de orientação e, conseqüentemente seu forrageamento. Marcações positivas à proteína Fos foram observadas nas regiões dos lobos ópticos e ocelos tanto do grupo controle quanto dos grupos Resumo Jacob, C. R. O. 9 expostos ao gás dióxido de carbono para todas as idades coletadas, estes resultados estão relacionados com a...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Comportamento de oviposição em Chrysomya megacephala (F.) (Diptera: Calliphoridae): distinção quantitativa frente a posturas prévias?

Chrysomya megacephala (Fabricius), has considerable medical, veterinary and forensic importance. In insects in general, the ability to track the food substrate is due to highly sensitive organs adapted for detecting odors, particularly in the case of blowflies, which is one of carcass main consumers. Eggs of blowflies are usually aggregated in function of the behavior of other pheromone mediated by females laying eggs in place on the same substrate. One of the main reasons for studying oviposition behavior is because it may indirectly affect individual qualification, population dynamics and community structure. It has been suggested that female blowflies can evaluate the number of eggs on a substrate, decreasing the size of oviposition in very saturated substrates with larvae or eggs leading to a lower intraspecific competition. The present study investigated the oviposition behavior of females of C. megacephala, and wished to consider whether they are able to distinguish quantitatively (size of the mass) eggs previously put into a place of posture and hence indicate whether there is a limit beneficial (to avoid competition among larvae) for its oviposition on the same substrate or if that place would already be saturated, requiring find another substrate without eggs or less for futures ovipositions. With 20 females and five males, five treatments were applied, repeated ten times and analyzed using the Mann-Whitney test. Each treatment consists in placing, inside the cage, a flask with 50g of ground beef and another one in the other side, with the same amount of substrate with a certain amount of prior oviposition for a period of 5 hours. The masses prior eggs were used 0.03 g, 0.05 g, 0.1 g, 0.2 g and 0.3 g (respectively, T1, T2, T3, T4 and T5). The other part of the work consisted in the use of a “Y” olfactometer, a device used to determine the choice of an invertebrate against... (Complete abstract click electronic access below)

Alterações na dinâmica de colônias de Atta sexdens rubropillosa Forel, 1906 (Hymenoptera: Formicidae) submetidas ao tratamento com iscas tóxicas

As formigas cortadeiras são consideradas pragas por causarem diversos prejuízos em áreas agrícolas e, por este motivo, há um crescente interesse em métodos variados de controle destes insetos. Atualmente, existem diversos métodos de controle conhecidos, mas o mais utilizado é o controle químico, que apresenta diferentes estratégias de formulação e modos de aplicação. O principal método químico utilizado são as iscas tóxicas, que tem a melhor eficiência e já são utilizadas em escala comercial. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as alterações que ocorrem na dinâmica de colônias de Atta sexdens rubropilosa Forel, 1906 (Hymenoptera: Formicidae) submetidas ao tratamento com iscas tóxicas contendo os ingredientes ativos sulfluramida e hidrametilnona, as quais serão comparadas com uma colônia controle, que receberá isca sem ingrediente ativo. Para isso, foram utilizadas três colônias de A. s. rubropilosa, mantidas em laboratório, com aproximadamente 1000 mL de jardim de fungo cada. Elas foram dispostas em vitrais, interligados a dois potes plásticos, um para a câmara de forrageamento e outro para o lixo. Um dia antes de iniciar o experimento, todo o lixo foi retirado e as colônias foram deixadas sem o fornecimento de alimento. Após 24 horas sem alimentação, as iscas foram oferecidas na câmara de forrageamento de cada colônia. A colônia 1 recebeu 3g de isca sem ingrediente ativo; a colônia 2 recebeu 3g de isca contendo sulfluramida; e a colônia 3 recebeu 3g de isca contendo hidrametilnona. Durante 10 dias, foram avaliados aspectos como carregamento, incorporação e devolução das iscas, alterações comportamentais das operárias classificadas como sintomas de intoxicação, mudanças no aspecto físico dos jardins de fungo, como umidade e aparecimento de fungos contaminantes, e a extinção da colônia. A partir dos dados obtidos, foram feitas análises comparativas das atividades comportamentais...

Plano educacional: uma estratégia para conservação de habitats de polinizadores

Tem havido uma preocupação global com o desaparecimento de polinizadores dos campos de cultivo, podendo causar uma queda na produção de alimentos, e consequentemente, afetar a segurança alimentar em decorrência de déficits de polinização. Dessa forma, ações visando à conservação de espécies polinizadoras e de seus habitats vem assumindo uma importância cada vez maior. A região do município de Guapiara destaca-se no Estado de São Paulo como a principal produtora de tomate. O tomateiro possui flores hermafroditas e autofecundadas, porém uma melhor produtividade pode ser alcançada com a polinização por abelhas. A região apresenta uma diversidade de habitats agrícolas próximos a ambientes naturais preservados (Parque Estadual Intervales e Parque Estadual Turístico do Alto Ribeira), o que favorece o estabelecimento de uma fauna de polinizadores diversificada, mas fortemente impactada pela aplicação intensiva de produtos químicos nos cultivos. A proposição de um plano de manejo objetivando a conservação de espécies de abelhas junto às áreas cultivadas se justifica plenamente para a região, considerando a fauna rica em espécies de abelhas com potencial de polinização para cultivos agrícolas. Planos de divulgação sobre a importância da conservação das espécies ou habitats alvo são parte integrante dos planos de manejo. Entre as ações de divulgação, a elaboração de material impresso é importante pela capacidade de alcance de diferentes setores envolvidos com as espécies e habitats a serem manejados e conservados. Este trabalho é parte integrante de um amplo estudo sobre a importância das abelhas em cultivos de tomate na região de Guapiara. Informações foram coletadas ao longo de dois anos, no qual foi elaborado um diagnóstico do estado de conservação da área, uma descrição da fauna de abelhas associada às flores de tomateiros e uma avaliação do potencial de manejo. O objetivo geral...

Antagonismo de actinobactérias isoladas de Trachymyrmex frente ao fungo parasita Escovopsis

As formigas da tribo Attini mantêm uma associação com actinobactérias encontradas nos biofilmes presentes no integumento desses insetos. Dentre as actinobactérias associadas às formigas Attini, os gêneros Pseudonocardia e Streptomyces são considerados prevalentes. Estudos indicam que essas bactérias auxiliam na defesa do jardim contra patógenos através da secreção de compostos antimicrobianos. Recentemente foi sugerido que tais bactérias podem ser importantes na defesa do próprio inseto, especialmente contra entomopatógenos. Duas teorias principais foram propostas para explicar as interações entre actinobactérias, formigas Attini e o microfungo parasita Escovopsis. Uma delas defende a coevolução entre esses organismos e a outra rejeita a existência da mesma, argumentando que a interação formiga-actinobactéria é uma simbiose aberta. Neste trabalho, avaliamos a interação entre actinobactérias e Escovopsis em experimentos in vitro. Um total de 14 linhagens de actinobactérias, compreendendo 12 de Pseudonocardia, uma de Streptomyces e uma de Actinoplanes, isoladas de Trachymyrmex (um gênero de formiga Attini não cortadeira) foram testadas frente a quatro linhagens de Escovopsis. Os Escovopsis foram isolados tanto de jardins de fungos de formigas Trachymyrmex quanto de cortadeiras de folhas (Acromyrmex e Atta). O crescimento micelial de Escovopsis (em cm²) foi medido na presença e na ausência (controle) das actinobactérias. Os resultados demonstraram que todas as actinobactérias testadas inibiram Escovopsis, mas as taxas de inibição foram variáveis dependendo da linhagem da actinobactéria (p < 0,05). A linhagem de Streptomyces foi a mais efetiva, corroborando dados da literatura que indicam que outros micro-organismos, além de Pseudonocardia, também apresentam ação inibitória frente à Escovopsis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Determinação dos tipos de resistência de genótipos de soja ao ataque de Spodoptera cosmioides (Walker, 1858) (Lepdoptera: Noctuidae)

The aim of this work was to evaluate the types of resistance of soybean genotypes to the attack of Spodoptera cosmioides (Walker, 1858), under laboratory conditions. Plants of the soybean genotypes, IAC 100, Dowling, PI 227687, PI 274454, BR 16, IGRA RA 626 RR, PI 227682, BRSGO 8360, IGRA RA 516 RR e P 98Y11 RR, were cultivated in vases and placed in a greenhouse in order to have their leaves used afterwards in free-choice and no-choice no-preference for feeding tests and evaluation of the biological parameters of S. cosmioides fed on the genotypes. For free-choice no preference for feeding test, 10 leaf discs were prepared and placed in Petri dishes equidistantly among themselves, and then two recently-hatched caterpillar per genotype were release in the center of the plate. The same test was performed for third instar larvae, so that one caterpillar per genotype was used. In non-choice test, only one genotype was used in each Petri dish, where two recently-hatched or one third instar caterpillars were released, respectively. For both tests, the attractiveness was assessed at 1, 3, 5, 10, 15, 30, 60, 120, 360, 720 and 1440 minutes after the release of the insects. In addition, the leaf area consumed was evaluated. Randomized blocks design and completely randomized design were used for free-choice and non-choice tests, respectively, with 10 replications. In biology test, recently-hatched larvae were transferred to Petri dishes with leaves of the genotypes, evaluating the period of larvae, pupae and overall (larvae + pupae), viability of larvae, pupae and overall, weight of 12 days-old larvae and 24 hours-old pupae and longevity of the adults. Completely randomized design was used for this test, with 30 replications. Genotypes IGRA RA 516 RR and IGRA RA 626 RR were the least and the most consumed by recently-hatched larvae of S. cosmioides, respectively, in non-choice non-preference for feeding test. Genotypes PI 274454 and PI 227687 were...

Efeito de citalopram no desenvolvimento larval de Chrysomya Megacephala (Fabricius, 1794) (Diptera: Calliphoridae) para uso forense

Chrysomya megacephala (Fabricius) é um díptero da família Calliphoridae, introduzido recentemente no Brasil, de forma acidental. Esta espécie possui grande importância médicosanitária por ser veiculadora de enteropatógenos como vírus, bactérias e helmintos; causar miíases facultativas; além de ser de fundamental importância na entomologia forense pelo fato de poder ser utilizada na estimativa do tempo de decomposição de cadáveres humanos, conhecido como intervalo pós-morte (IPM), ou na descoberta da causa da morte. Sabe-se que análises toxicológicas das larvas destes insetos podem detectar traços de substâncias lícitas ou não que se encontravam nos tecidos do cadáver, ingeridos antes da morte deste. Trabalhos recentes têm demonstrado que a presença de toxinas nos tecidos em decomposição pode alterar a taxa de desenvolvimento de insetos que utilizam-se destes como local de oviposição. Assim, testes preliminares utilizando dietas artificiais em laboratório são necessários para a criação de um banco de dados como padrão para investigar e quantificar as possíveis alterações no desenvolvimento de insetos coletados da cena criminal, para não gerar dados imprecisos sobre o IPM. No estágio larval, as moscas varejeiras competem ativamente por recursos alimentares. Nesse período, o substrato alimentar pode estar contaminado por substâncias químicas. O presente trabalho visa conhecer quais os possíveis efeitos da droga Citalopram, um antidepressivo que vem sendo utilizado em larga escala em casos de suicídio, sobre o tempo de desenvolvimento larval de C. megacephala até a pupação, frente a diferentes dosagens que serão utilizadas, além da obtenção de dados envolvendo porcentagem de emergência e razão social para os adultos emergidos, para cada um doss diferentes tratamentos