Cytochemical characterization of Triatoma infestans and Panstrongylus megistus salivary gland cells (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae)

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Efeito do teor de soro, açúcar e de frutooligossacarídeos sobre a população de bactérias lácticas probióticas em bebidas fermentadas

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Características físico-químicas de amidos modificados com permanganato de potássio/ácido lático e hipoclorito de sódio/ácido lático

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Perdas fermentativas e estabilidade aeróbia de silagens de milho inoculadas com bactérias ácido-láticas em diferentes estádios de maturidade

Objetivou-se, nesta pesquisa, avaliar o efeito de inoculantes bacterianos em silagens produzidas com plantas de milho em diferentes estádios de maturidade quanto às perdas fermentativas e estabilidade aeróbia. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3x5, e avaliaram-se dois inoculantes (Silobac® e Maize All®) e uma silagem controle em 5 estádios de maturação fisiológica do milho, com 4 repetições. Verificou-se efeito positivo dos inoculantes quanto às perdas fermentativas, e a adição de Silobac® e Maize All® promoveram perda de matéria seca (PMS) 1,78 e 1,75 pontos percentuais a menos que a silagem controle (7,95%). As silagens produzidas com 2/3 de linha de leite e camada negra (CN) apresentaram menor PMS, o que se deve principalmente a menor produção de efluente. A silagem que levou maior tempo para apresentar quebra da estabilidade aeróbia foi aquela produzida a partir de plantas de milho no estádio camada negra e inoculada com Maize All®, ao passo que se notou menor estabilidade para outras silagens inoculadas com esse mesmo produto em virtude do aumento no teor de umidade das silagens. Os inoculantes utilizados neste trabalho são eficientes em diminuir as perdas de MS durante o processo fermentativo, contudo, contribuem com maior aporte de nutrientes nas silagens, o que resulta em menor estabilidade após a abertura dos silos. Silagens produzidas com maior concentração de MS apresentam menores perdas de MS durante a fermentação, assim como são mais estáveis em contato com o oxigênio.

Prevalência e caracterização de espécies de lactobacilos vaginais em mulheres em idade reprodutiva sem vulvovaginites

OBJETIVO: identificar espécies de lactobacilos isolados do conteúdo vaginal de mulheres saudáveis e assintomáticas; determinar as espécies mais prevalentes e caracterizá-las fenotipicamente. MÉTODOS: lactobacilos foram isolados em meio seletivo a partir de amostras de conteúdo vaginal de 135 mulheres, sem queixa de corrimento e com diagnóstico laboratorial negativo para infecções vaginais, acompanhadas em um ambulatório de Planejamento Familiar. Os isolados foram identificados por PCR multiplex e, quando necessário, submetidos ao sequenciamento do gene RNAr 16S. Foram também avaliados quanto à acidificação do meio de cultura, à produção de ácido láctico, de H2O2, bacteriocinas e a capacidade de adesão às células epiteliais. RESULTADOS: oitenta e três cepas de lactobacilos foram isoladas e identificadas, sendo as espécies predominantes L. crispatus (30,1%), L. jensenii (26,5%), L. gasseri (22,9%) e L. vaginalis (8,4%). Apenas 20 destes isolados não produziram H2O2 em quantidades detectáveis. Das 37 linhagens selecionadas para teste de adesão a células epiteliais, 12 apresentaram adesão entre 50 a 69%, 10 apresentaram 70% ou mais, e as restantes pouca ou nenhuma adesão. Nenhum dos isolados produziu bacteriocinas. CONCLUSÕES: as espécies de lactobacilos mais prevalentes em mulheres sem vulvovaginites, isoladas em meio de cultura seletivo e identificadas por métodos moleculares, foram L. crispatus, L. jensenii e L. gasseri. Além de mais frequentes, tais linhagens também apresentaram melhor produção de H2O2 e atingiram menores valores de pH em meio de cultura.

Polímeros biorreabsorvíveis como substrato para cultura de células e engenharia tecidual

Biomateriais poliméricos são desenvolvidos para uso como substitutos de tecidos danificados e/ou estimular sua regeneração. Uma classe de biomateriais poliméricos são os biorreabsorvíveis, compostos que se decompõem tanto in vitro quanto in vivo. São empregados em tecidos que necessitam de um suporte temporário para sua recomposição tecidual. Dentre os vários polímeros biorreabsorvíveis, destacam-se os alfa-hidróxi ácidos, entre eles, diferentes composições do poli(ácido lático) (PLA), como o poli(L-ácido lático) (PLLA), poli(D-ácido lático) (PDLA), poli(DL-ácido lático) (PDLLA), além do poli(ácido glicólico) (PGA) e da policaprolactona (PCL). Estes polímeros são considerados biorreabsorvíveis por apresentarem boa biocompatibilidade e os produtos de sua decomposição serem eliminados do corpo por vias metabólicas. Diversas linhas de pesquisa mostram que os diferentes substratos à base de PLA estudados não apresentam toxicidade, uma vez que as células são capazes de crescer e proliferar sobre eles. Além disso, diversos tipos de células cultivadas sobre diferentes formas de PLA são capazes de se diferenciarem sobre os diferentes polímeros e passar a produzir componentes de matriz extracelular. Neste trabalho, é revisada a utilização de substratos à base de alfa-hidróxi ácidos, com destaque para diferentes formas de PLA, utilizados como substratos para cultura de células, bem como suas aplicações.

Avaliação do capim-elefante (Pennisetum purpureum Schum.) cultivar taiwan A-148, ensilado com diferentes técnicas de redução de umidade

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de diferentes técnicas de redução de umidade sobre a composição química, digestibilidade in vitro da matéria seca (DIVMS) e degradação ruminal da matéria seca da silagem de capim-elefante (Pennisetum purpureum Schum.) cv. Taiwan A-148. Os tratamentos (A, Controle; B, 20,0; C, 30,0; D, 40,0% de sabugo de milho; E, emurchecimento por 12 horas; F, emurchecimento por 24 horas; e G, esmagamento + emurchecimento por 24 horas) foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado com três repetições. Os tratamentos da silagem B e E não foram eficientes em reduzir a umidade excessiva da forragem. O emurchecimento por 24 horas aumentou o teor de MS, sem influir no teor de PB e na DIVMS. Os tratamentos C e D favoreceram o desenvolvimento da população de clostrídeos, aumentaram a concentração de N-NH3 e reduziram a concentração de ácido lático e a DIVMS das silagens. O tratamento G aumentou o teor de MS e reduziu a concentração de N-NH3 e DIVMS. A adiçao de sabugo de milho (tratamentos B, C e D) reduziu a degradação ruminal da MS das silagens. O sabugo de milho reduziu a umidade, mas apresentou efeitos negativos na qualidade da silagem, enquanto o esmagamento e/ou emurchecimento foram procedimentos que mostraram bons resultados em relação à conservação do material ensilado.

Inoculante enzimático-bacteriano, composição química e parâmetros fermentativos das silagens dos capins Tanzânia e Mombaça

Objetivou-se, com o presente trabalho, avaliar os efeitos de idades de colheita e do uso de inoculante enzimático-bacteriano sobre os parâmetros de fermentação, de composição química e digestibilidade in vitro da matéria seca (DIVMS) das silagens dos cultivares Tanzânia e Mombaça (Panicum maximum Jacq.). As forragens foram colhidas aos 45 e 60 dias após o corte de uniformização, submetidas a dois tratamentos (A - Ensilagem sem aditivo [Controle]; B - Ensilagem com adição de inoculante enzimático-bacteriano) e distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial (dois capins x duas inoculações x duas idades de corte), com três repetições. O conteúdo de MS das silagens confeccionadas com as plantas colhidas aos 60 dias de rebrota foi superior àquele das silagens colhidas com 45 dias. As silagens confeccionadas com as plantas colhidas aos 45 dias de rebrota apresentaram os maiores teores de PB (11,9%). Não se observaram efeitos das silagens, dos tratamentos e das idades de corte sobre os teores de hemicelulose, celulose e DIVMS e valores de pH e N-NH3. As silagens do capim-tanzânia apresentaram os maiores teores de MS, FDN, FDA, ácido lático e ácido butírico, enquanto as de capim-mombaça, os de PB e de ácido acético. A adição de inoculante enzimático-bateriano promoveu silagens com menores teores de MS, PB e lignina que as não-tratadas. Os capins tanzânia e mombaça não apresentaram limitações ao processo de ensilagem. O inoculante enzimático-bacteriano não melhorou as características qualitativas, fermentativas e nutricionais das silagens avaliadas.

Influência da utilização de aditivos químicos no perfil da fermentação, no valor nutritivo e nas perdas de silagens de cana-de-açúcar

Avaliou-se o efeito do uso de aditivos químicos nas perdas de matéria seca, no perfil fermentativo e no valor nutritivo de silagens de cana-de-açúcar. O experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado com quatro repetições por tratamento (sete tratamentos). Os seguintes aditivos foram utilizados na confecção das silagens: controle (sem aditivo), L. buchneri, óxido e carbonato de cálcio em doses de 1,0 e 1,5% da massa verde e sulfato de cálcio a 1,0% da massa verde, diluídos em 40 litros de água por tonelada de forragem. As variáveis analisadas foram: perdas totais e gasosas, produção de efluente, recuperação de matéria seca, composição química e valor nutritivo. As menores perdas fermentativas e gasosas foram observadas nas silagens com óxido ou carbonato de cálcio, que resultaram em maior taxa de recuperação de matéria seca. da mesma forma, as silagens tratadas com estes aditivos apresentaram maior teor de carboidratos solúveis residuais e de ácido lático e reduzida fermentação alcoólica. As silagens tratadas com óxido e carbonato apresentaram, no momento da abertura, maior teor de cinzas, menor concentração de componentes fibrosos e maiores coeficientes digestibilidade da matéria seca e da matéria orgânica. O teor de proteína encontrado nessas silagens foi semelhante ao observado na forragem fresca. A ensilagem de cana-de-açúcar com L. buchneri e sulfato de cálcio possibilitou a obtenção de desempenho similar ao determinado com a silagem sem aditivos. Silagens tratadas com carbonato e óxido de cálcio apresentam maior desempenho durante o processo fermentativo.

Antibiosis associated to Lactobacillus acidophilus growth .1. Strain selection and study of an alternative medium using whey

The production of antimicrobial compounds of some strains of Lactobacillus acidophilus has been studied. They have been grown in whey supplemented with soy milk. It has been found that the production of compounds is able to inhibit the growing of both target bacteria analysed: Staphylococcus aureus and Escherichia coli. The results showed a significant variation (p>0.05) depending on the strain of L. acidophilus and on the level of supplementation utilized. Most of the inhibition observed resulted from the presence of the lactic acid produced. It has also been found the production of other antimicrobial compounds showing inhibitory capacity. The action of these compounds was influenced by the substract pH.

Relationships and significance of lactate minimum, critical velocity, heart rate deflection and 3 000 m track-tests for running

The running velocities associated to lactate minimum (V-lm), heart rate deflection (V-HRd), critical velocity (CV), 3000 M (V-3000) and 10000 m performance (V-10km) were compared. Additionally the ability of V-lm and VHRd on identifying sustainable velocities was investigated.Methods. Twenty runners (28.5 +/- 5.9 y) performed 1) 3000 m running test for V3000; 2) an all-out 500 in sprint followed by 6x800 m incremental bouts with blood lactate ([lac]) measurements for V-lm; 3) a continuous velocity-incremented test with heart rate measurements at each 200 m for V-HRd; 4) participants attempted to 30 min of endurance test both at V-lm(ETVlm) and V-HRd(ETVHRd). Additionally, the distance-time and velocity-1/time relationships produced CV by 2 (500 m and 3000 m) or 3 predictive trials (500 m, 3000 m and distance reached before exhaustion during ETVHRd), and a 10 km race was recorded for V-10km.Results. The CV identified by different methods did not differ to each other. The results (m(.)min(-1)) revealed that V-.(lm) (281 +/- 14.8)< CV (292.1 +/- 17.5)=V-10km (291.7 +/- 19.3)< V-HRd (300.8 +/- 18.7)=V-3000 (304 +/- 17.5) with high correlation among parameters (P < 0.001). During ETVlm participants completed 30 min of running while on the ETVHRd they lasted only 12.5 +/- 8.2 min with increasing [lac].Conclusion. We evidenced that CV and Vim track-protocols are valid for running evaluation and performance prediction and the parameters studied have different significance. The V-lm reflects the moderate-high intensity domain (below CV), can be sustained without [lac] accumulation and may be used for long-term exercise while the V-HRd overestimates a running intensity that can be sustained for long-time. Additionally, V-3000 and V-HRd reflect the severe intensity domain (above CV).

Evaluation in vitro of the antagonistic substances produced by Lactobacillus spp. isolated from chickens

To determine the inhibitory capacity of lactic acid bacteria due to the action of antagonistic substances, we tested 474 isolates of Lactobacillus from the crop and cecum of chickens against gram-positive and gram-negative indicator microorganisms by the spot-on-the-lawn and well-diffusion antagonism methods. of the 474 isolates, 265 demonstrated antimicrobial activity against the indicator microorganisms. Isolates identified as L. reuteri, L. salivarius, or Lactobacillus spp. inhibited Enterococcus faecalis, E. faecium, Listeria monocytogenes, and Salmonella spp. but not L. casei, L. delbrueckii, L. fermentum, or L. helveticus by the well-diffusion simultaneous antagonism method under anaerobic incubation conditions. The antagonistic substances produced by some of the Lactobacillus isolates were inactivated after treatment by proteolytic enzymes, which suggested that the substances could be antimicrobial peptides or bacteriocins.

Atividade antimicrobiana de Lactobacillus acidophilus, contra microrganismos patogênicos veiculados por alimentos

The antimicrobial activity of a commercial probiotic culture, Lactobacillus acidophilus (La5), was tested against two foodborne pathogens, Escherichia coli and Staphylococcus aureus. The antagonistic effect of the probiotic culture in vitro was performed by applying both Multilayer Agar Plate and Agar Well Diffusion methods. The results indicated that the inhibitory substance present on 72 hours culture broth supernatant was extracellular and diffusible. The incubation period of the lactic acid bacteria on MRS Broth, at 3 7 degrees C in aerobic conditions, for the highest lactic acid production (1,08 g/%) was 72 hours, which gave a minimum pH value of the supernatant (3,90) and the best inhibition results by the Well Diffusion Agar Assay, showing inhibition zone diameters of 14,75mm and 15,0mm for E. coli and S. aureus, respectively. The inhibitor compound was not sensitive to proteolytic enzyme and freezing, but was totally inactivated when the supernatant was neutralized with NaOH 1 N solution. The results suggest that the inhibitory activity was due to the lactic acid concentration and the low pH of the probiotic culture broth.

Effects of recovery type after a judo combat on blood lactate removal and on performance in an intermittent anaerobic task

Aim. The objective of this study was to verify the effects of active (AR) and passive recovery (PR) after a judo match on blood lactate removal and on performance in an anaerobic intermittent task (4 bouts of upper body Wingate tests with 3-min interval between bouts; 4WT).Methods. The sample was constituted by 17 male judo players of different competitive levels: A) National (Brazil) and International medallists (n. 5). B) State (São Paulo) medallists (n. 7). Q City (São Paulo) medallists (n. 5). The subjects were submitted to: 1) a treadmill test for determination of VO2peak and velocity at anaerobic threshold (VAT); 2) body composition; 3) a 5-min judo combat, 15-min of AR or PR followed by 4WT.Results. The groups did not differ with respect to: body weight, VO2peak, VAT, body fat percentage, blood lactate after combats. No difference was observed in performance between AR and PR, despite a lower blood lactate after combat (10 and 15 min) during AR compared to PR. Groups A and B performed better in the high-intensity intermittent exercise compared to athletes with lower competitive level (C).Conclusion. The ability to maintain power output during intermittent anaerobic exercises can discriminate properly judo players of different levels. Lactate removal was improved with AR when compared to PR but AR did not improve performance in a subsequent intermittent anaerobic exercise.

Haemagglutination induced by Bordetella pertussis filamentous haemagglutinin adhesin (FHA) is inhibited by antibodies produced against FHA(430-873) fragment expressed in Lactobacillus casei

Filamentous haemagglutinin adhesin (FHA) is an important virulence factor from Bordetella pertussis related to the adhesion and spread of the bacteria through the respiratory tract. Three distinct domains have been characterized in mature FHA, and among them, the FHA(442-863) fragment was suggested to be responsible for the heparin-binding activity. In this study, we cloned the gene encoding the HEP fragment (FHA(430-873)) in a Lactobacillus casei-inducible expression vector based on the lactose operon. The recombinant bacteria, transformed with the resulting construct (L. casei-HEP), were able to express the heterologous protein depending on the sugar added to the culture. Subcutaneous inoculation of L. casei-HEP in Balb/C mice, using the cholera toxin B subunit as adjuvant, induced systemic anti-HEP antibodies that were able to inhibit in vitro erythrocyte haemagglutination induced by FHA. This is the first example of a B. pertussis antigen produced in lactic acid bacteria and opens new perspectives for alternative vaccine strategies against whooping cough.