Construction of an alkaline phosphatase-liposome system: a tool for biomineralization study

Alkaline phosphatase is required for the mineralization of bone and cartilage. This enzyme is localized in the matrix vesicle, which plays a role key in calcifying cartilage. In this paper. we standardize a method for construction an alkaline phosphatase liposome system to mimic matrix vesicles and examine a some kinetic behavior of the incorporated enzyme. Polidocanol-solubilized alkaline phosphatase, free of detergent, was incorporated into liposomes constituted from dimyristoylphosphatidylcholine (DMPC), dilaurilphosphatidylcholine (DLPC) or dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC). This process was time-dependent and >95% of the enzyme was incorporated into the liposome after 4 h of incubation at 25 degreesC. Although, incorporation was more rapid when vesicles constituted from DPPC were used, the incorporation was more efficient using vesicles constituted from DMPC. The 395 nm diameter of the alkaline phosphatase-liposome system was relatively homogeneous and more stable when stored at 4 degreesC.Alkaline phosphatase was completely released from liposome system only using purified phosphatidylinositol-specific phospholipase C (PIPLC). These experiments confirm that the interaction between alkaline phosphatase and lipid bilayer of liposome is via GPI anchor of the enzyme, alone. An important point shown is that an enzyme bound to liposome does not lose the ability to hydrolyze ATP, pyrophosphate and p-nitrophenyl phosphate (PNPP), but a liposome environment affects its kinetic properties, specifically for pyrophosphate.The standardization of such system allows the study of the effect of phospholipids and the enzyme in in vitro and in vivo mineralization, since it reproduces many essential features of the matrix vesicle. (C) 2002 Elsevier B.V. Ltd. All rights reserved.

Erythrocyte ghost cell-alkaline phosphatase: construction and characterization of a vesicular system for use in biomineralization studies

Alkaline phosphatase is required for the mineralization of bone and cartilage. This enzyme is localized in the matrix vesicle, which plays a role key in calcifying cartilage. In this paper we standardize a method to construction a resealed ghost cell-alkaline phosphatase system to mimic matrix vesicles and examine the kinetic behavior of the incorporated enzyme. Polidocanol-solubilized alkaline phosphatase, free of detergent, was incorporated into resealed ghost cells. This process was time-dependent and practically 50% of the enzyme was incorporated into the vesicles in 40 h of incubation, at 25 degreesC. Alkaline phosphatase-ghost cell systems were relatively homogeneous with diameters of about 300 nm and were more stable when stored at -20 degreesC.Alkaline phosphatase was completely released from the resealed ghost cell-system using only phospholipase C. These experiments confirm that the interaction between alkaline phosphatase and the lipid bilayer of resealed ghost cell is exclusively via glycosylphosphatidylinositol (GPI) anchor of the enzyme.An important point shown is that an enzyme bound to resealed ghost cell does not lose the ability to hydrolyze ATP, pyrophosphate and p-nitrophenyl phosphate (PNPP), but the presence of a ghost membrane, as a support of the enzyme, affects its kinetic properties. Moreover, calcium ions stimulate and phosphate ions inhibit the PNPPase activity of alkaline phosphatase present in resealed ghost cells. (C) 2002 Elsevier B.V. B.V. All rights reserved.

Ultrastructural analysis of spermiogenesis in the neotropical cichlid Cichla kelberi Kullander & Ferreira, 2006 (Perciformes: Cichlidae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Possible New Syndrome: Left Ventricular Noncompaction, Partial Agenesis of the Corpus Callosum, and Developmental Delay in a Brazilian Child

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Timoma em cão. Relato de caso

Uma cadela, Dachshund, quatro anos, foi encaminhada ao H.V. da FMVZ-UNESP-Botucatu-SP com histórico de prostração, emagrecimento progressivo, anorexia, cansaço e tosse seca. Ao exame clínico observou-se apatia, secreção nasal serosa bilateral e dispnéia intensa. Radiografia torácica demonstrou efusão pleural, edema pulmonar acentuado, desvio dorsal da traquéia e possível massa mediastinal. A ultra-sonografia, após drenagem torácica, confirmou a presença de massa mediastinal, sendo classificada como neoplasia maligna de origem epitelial pela citologia aspirativa por agulha fina. O animal veio a óbito logo após o diagnóstico de neoplasia. À necropsia constatou-se massa mediastinal encapsulada, consistência macia e superfície de corte com coloração branco-acinzentada e áreas necrótico-hemorrágicas, localizada na região ântero-ventral do tórax. O exame histopatológico demonstrou células epiteliais neoplásicas, células linfóides (timócitos) com morfologia normal, vasos sangüíneos de pequeno e médio calibre, formações císticas com conteúdo eosinofílico e corpúsculos de Hassall. A imunohistoquímica apresentou positividade para citoqueratina AE1/AE3 e UCHL, confirmando o diagnóstico de timoma.

Subcutaneous phaeohyphomycosis caused by Phaeoacremonium parasiticum in a renal transplant patient

A 49-year-old renally transplanted man, under a five-year course of immunosuppressive therapy with prednisone and cyclosporine A, experienced a subcutaneous phaeohyphomycosis caused by Phaeoacremonium parasiticum. The clinical presentation consisted of impressive, large, inflammatory and draining cystic tumors on the left foot that had been present for one year. A significant improvement was obtained with itraconazole plus intralesional injection with amphotericin B. Drug interaction was observed between itraconazole and cyclosporine A causing a severe hypertensive crisis and requiring a temporary sharp reduction in cyclosporine administration. Subcutaneous phaeohyphomycosis caused by P. parasiticum is uncommon among major organ transplant patients but several cases have previously been published and some patterns are emerging, e. g., limbs are generally involved but no known traumatic event has preceded lesion development. The identification of the case isolate was confirmed using a recently published online system based in part on beta-tubulin sequence comparison.

Paracoccidioidomicose: centenário do primeiro relato de caso

Há 100 anos Adolpho Lutz publicava relato pioneiro de enfermidade descrita como mycose pseudococcidica, hoje paracoccidioidomicose, em que discorria sobre suas manifestações clínico-histopatológicas e micológicas. Com precisão, em abril de 1908, descreveu que O agrupamento de corpúsculos kysticos é bastante característico. Geralmente há um maior no centro e outros pequenos em redor, o que sempre me produziu a impressão de resultar de um processo de gemmação. Inaugurava-se novo campo para investigações científicas.

Oligodendroglioma cístico e positividade das reações para cisticercose relato de caso

São poucos os estudos sobre gliomas «low-grade». Os oligodendrogliomas representam de 1,3 a 10% dos tumores intracerebrais. A neurocisticercose é uma das mais graves parasitoses do SNC, com evidente polimorfismo clínico e laboratorial. O objetivo deste estudo é relatar o caso de um doente com cefaléia, perda progressiva da visão, alteração do comportamento e, provas imunológicas positivas para cisticercose no líquido cístico e cefalorra-queano. Após tentativas para tratamento da neurocisticercose, sem muito sucesso, foi submetido a craniotomia frontal para exérese de tumor cístico, que revelou tratar-se de oligodendroglioma. Discutem-se aspectos relacionados aos possíveis mecanismos para associação de neurocisticercose e oligodendroglioma.

Aspectos clínicos e evolutivos da hidrocefalia na neurocisticercose

Com o propósito de analisar os aspectos clínicos da hidrocefalia (HDC) na neurocisticercose (NCC), realizou-se o estudo retrospectivo de 47 prontuários de pacientes com HDC e NCC. Verificou-se que 70,2% eram homens, entre 21 e 50 anos. A hipertensão intracraniana (HIC) ocorreu em todos os pacientes, cefaléia (CEF) em 89,4%, meningoencefalite (ME) em 80,8% e distúrbios psíquicos (PSI) em 74,5%. A síndrome liquórica da NCC foi detectada em 65,9% pacientes. Além da HDC, as tomografias computadorizadas de crânio (TC) mostraram lesões císticas e edema cerebral difuso em 59,6% cada, calcificações em 55,3%. Dos 41 pacientes (87,2%) com derivação ventriculoperitoneal (DVP), em 22 (53,7%) deles foram necessárias uma a sete revisões/paciente (média=3). A evolução foi satisfatória em 51,1% e fatal em 31,9%. Conclui-se que a hidrocefalia é mais comum no sexo masculino em idade produtiva, tendo a HIC, CEF, MN e PSI como manifestações freqüentes e que, a necessidade de revisões de DVP, piora o prognóstico.

Expressão antigênica em carcinomas do plexo coróide humano: relato de dois casos

Neoplasias provenientes do epitélio de revestimento do plexo coróide são inco-muns, tendo sido descritos 6 padrões morfológicos. O padrão anaplásico, também denominado carcinoma do plexo coróide, é o de menor freqüência e pode dar metastases fora do SNC. A distinção histológica desses tumores, particularmente da variedade anaplásica, com outras neoplasias primárias e metastáticas no SNC pode ser difícil. O uso de técnicas imunocitoquimicas em parafina tem-se mostrado útil no esclarecimento das linhagens tumorais. Os papilomas do plexo coróide têm, no entanto, sido objeto de controvérsia, por sua complexa expressão antigênica. Usando a técnica de imunoperoxidase (sistema avidina-biotina-peroxidase) pesquisaram-se, em dois casos da variedade anaplásica, os seguintes marcadores: proteína glial fibrilar ácida (GFAP) com anticorpo monoclonal e policlonal; ceratinas de 40-50kDa, ceratinas de 60-70kDa (callus ceratina), enolase neuronal específica (NSE) e proteína S-100, com anticorpos monoclonais. Os dois tumores mostraram positividade para NSE, proteína S-100 e ceratina de 40-50kDa; uma das duas neoplasias mostrou diferenciação glial, revelando positividade para GFAP tanto com anticorpo monoclonal quanto policlonal.

Cisto ovariano em vacas de leite: incidência, resposta à aplicação de GnRH e desempenho reprodutivo

A incidência de cistos ovarianos, a resposta ao tratamento com GnRH e os efeitos da ocorrência de cisto no desempenho reprodutivo e na taxa de descarte foram determinados em vacas lactantes da raça Holandesa. Vacas lactantes (n=333) foram avaliadas semanalmente por ultrassonografia a partir da quarta semana pós-parto, visando à detecção de corpos lúteos (CL) e de folículos ovarianos maiores que 10mm. Na sétima semana pós-parto, as vacas foram classificadas: em ciclando (n=248; presença de CL em um dos exames ultrassonográficos); em anestro (n=54; ausência de CL e de folículos >25mm) e com cisto (n=31; ausência de CL e presença de estruturas >25mm), quando foram distribuídas em: grupo-controle (n=16; sem tratamento) e grupo-tratamento (n=15; vacas que receberam uma aplicação de GnRH). A taxa de cura foi de 60,0% no grupo das vacas tratadas e de 87,5% no grupo-controle. As vacas com cistos apresentaram maior intervalo parto-primeira inseminação artificial (P<0,05; 91,4±8,3 vs. 77,8±2,5), maior número de serviços por concepção (P<0,05; 4,4±1,2 vs. 3,6±1,5), maior intervalo parto-concepção (P<0,05; 214,8±25,9 vs. 174,9±7,7) e maior taxa de descarte (P<0,05; 41,2 vs. 21,8%) do que as vacas ciclando. Vacas diagnosticadas com cisto na sétima semana pós-parto apresentaram recuperação espontânea, embora o intervalo parto-concepção e a taxa de descarte tenham sido maiores para essas vacas.

Ameloblastic carcinoma of the maxilla: A case report

This study aims to present the clinical features and treatment of a case of maxillary ameloblastic carcinoma. A meloblastic carcinoma is a rare malignant odontogenic carcinoma that has metastatic potential. Due to its rare incidence, there are few studies focusing on its radiological characteristics. When ameloblastic carcinoma demonstrates an aggressive appearance, it may be diagnosed as a malignant tumor; however, in cases showing a non-aggressive appearance, it is difficult to distinguish ameloblastic carcinoma from ameloblastoma. We report a case of ameloblastic carcinoma of the maxilla in a 59-year-old male patient, including the clinical signs, radiological images and pathological features. A partial area was surgically excised under local anesthesia and the material was sent to the Laboratory of Oral Pathology. The histological sections revealed a fragmented odontogenic tumor of epithelial origin, consisting of solid parenchyma and also revealed basal cells resembling ameloblasts, occasionally arranged in palisades. Certain parts of the architecture resembled that of an ameloblastoma; however, the cytology of other areas confirmed the diagnosis of ameloblastic carcinoma of the maxilla. The patient was scheduled for definitive surgery, including a right maxillectomy and radiotherapy. The patient was followed up every 3 months. After 2 years follow-up, there were no clinical or radiological signs of recurrence.

Area of Rests of Malassez in Young and Adult Rat Molars: Evidences in the Formation of Large Rests

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Spermiogenesis and spermatozoa ultrastructure in Salminus and Brycon, two primitive genera in Characidae (Teleostei : Ostariophysi : Characiformes)

In Salminus, spermiogenesis is cystic and gives origin to a type I aquasperm. Spermatid differentiation is characterized by chromatin condensed into thick fibres, nuclear rotation, nuclear fossa formation, cytoplasmic channel formation, mitochondrial fusion producing long and ramified mitochondria, and the presence of several membranous concentric rings around the plasma membrane that encircles the cytoplasmic channel. In Salminus and Brycon, spermatozoa are very similar. They exhibit a spherical nucleus and chromatin condensed into fibre clusters, and a deep nuclear fossa. They show a long midpiece with few elongate mitochondria at the initial region and a cytoplasmic channel completely encircled by one or two membranous concentric rings. The flagellar axis is perpendicular to the nucleus and exhibits the classic axoneme (9 + 2). The very strong similarity observed between Salminus and Brycon spermatozoa supports the hypothesis that these subfamilies are likely to have a monophyletic origin.

Unique Derived Features in Spermiogenesis and Sperm Morphology Supporting a Close Relationship between the Species of Hollandichthys and Rachoviscus (Characiformes: Characidae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)