Reversão sexual de rã-touro (Rana catesbeiana) com hormônio masculinizante misturado à ração de girinos

Este trabalho consistiu em testar a eficiência de um hormônio masculinizante (17beta-hidróxi-17-metil-andróxi-4-en-3-ona) na reversão sexual de girinos de rã-touro (Rana catesbeiana). Foram usados 352 girinos com dois a três meses de idade, nos estádios 30 a 36, para testar quatro níveis de hormônio na ração (0, 30, 60 e 90 mig/g) por 45 dias. Após a metamorfose, 167 imagos foram sacrificados e 185 imagos foram criados até a idade de quatro meses e, então, sacrificados. As análises macroscópicas das gônadas e das características sexuais secundárias confirmaram a masculinização nos tratamentos com hormônio. Muitos ovócitos foram observados nos testículos dos imagos revertidos (ovotestis); entretanto, quatro meses após a metamorfose, os ovotestis ocorreram esporadicamente. Concluiu-se que, após a metamorfose, iniciou-se um processo de reabsorção dos ovócitos nos imagos revertidos, culminando com a quase total reabsorção dos ovócitos no quarto mês de idade.

Indução à ovulação pelo uso de LHRH análogo e fertilização artificial em rã-touro (Rana catesbeiana)

Este trabalho teve por objetivo aperfeiçoar a técnica de reprodução induzida existente para rã-touro, com o intuito de aumentar a taxa de fecundidade e viabilizar seu uso pelo produtor. As doses hormonais para a indução da ovulação e espermiação seguiram as propostas de FALCON e CULLEY (1995) e ALONSO (1997); entretanto, a técnica de fertilização artificial foi adaptada da metodologia para reprodução artificial de peixes com ovos não-aderentes (WOYNAROVICH e HORVÁTH, 1983). A técnica proposta apresenta as seguintes etapas: I) sincronização da ovulação e da espermiação, por meio de hormônio liberador de gonadotropina ((Des-Gli10, D-His(Bzl)6, Pro-NHEt9)-LHRH)); II) extração dos óvulos de cada fêmea (1 a 2 minutos); III) fertilização dos óvulos (2 minutos) com líquido espermático diluído em 100 mL de água; IV) hidratação dos ovos em 10 a 20 litros de água; e V) incubação dos ovos em quadros de tela de 1x 0,70 m, com malha de 1 mm. As taxas de fertilização obtidas com as modificações propostas foram superiores a 60%. Ressalta-se ainda que a técnica propiciou a obtenção, a partir de um mesmo animal, de várias desovas, sendo que cada fêmea pode ovular em intervalos de, aproximadamente, 45 dias.

Efeito da temperatura sobre o desempenho da rã-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802)

Este estudo foi realizado para avaliar os efeitos do ambiente sobre a performance de rã-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802), criada em gaiolas de fibra de vidro instaladas no interior de estufas climatizadas. Após um período inicial de 15 dias de adaptação às instalações, à temperatura constante de 25,0ºC, os seguintes tratamentos foram aplicados: temperaturas de 23,0; 26,0; 29,0; 32,0; e 35,0ºC, por 30 dias, para rãs com 100 g PV inicial; 24,5; 26,0; 27,5; 29,0; 30,5; e 32,0ºC, também por 30 dias, para rãs com 20 g PV inicial; e a combinação das temperaturas de 26,0 e 29,0ºC com os fotoperíodos de 8, 12 e 16 h de luz a cada 24 horas, para rãs com 100 g PV inicial. Derivando-se as equações de regressão que explicam os efeitos de temperatura sobre o desempenho das rãs, estimaram-se melhores ganhos de peso à temperatura de 27,6e30,1ºC, para rãs com 100 e 20 g PV inicial, respectivamente, com melhor crescimento a 28,2ºC, para as rãs de 100 g PV inicial, e a 29,7ºC, para as rãs de 20 g PV inicial. A temperatura interagiu com fotoperíodo nos seus efeitos sobre ganho de peso e crescimento corporal, peso e rendimento de carcaça, consumo de alimentos e conversão alimentar.

Efeito da temperatura e do fotoperíodo sobre o desenvolvimento do aparelho reprodutor de rã-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802)

Foram avaliados os efeitos da temperatura e do fotoperíodo sobre a maturação sexual de rãs-touro pesando 94,22 g ± 12,03, mantidas durante trinta dias em temperaturas de 20, 23, 26, 29, 32 e 35°C, com fotoperíodo de 12/12 horas de luz/horas de escuridão (h L/E). A temperatura afetou os pesos do corpo gorduroso e do fígado, os quais variaram de acordo com modelos quadráticos, estimando-se maiores pesos de corpo gorduroso a 27,27°C e de fígado a 26,81°C. Estimaram-se ovários mais pesados a 28,36°C e ovidutos mais pesados a 28,77°C. Temperatura afetou a maturação sexual das rãs, avaliada por índices numéricos. Num experimento mais longo, rãs com peso médio inicial de 95,31 ± 8,46 g foram submetidas à combinação das temperaturas de 26 e 29°C com os fotoperíodos de 8/16, 12/12 e 16/8 h L/E, até atingirem a maturidade gonadal. Temperatura interagiu com fotoperíodo em seus efeitos sobre o desenvolvimento dos órgãos reprodutivos de rã-touro. Temperatura afetou a relação diâmetro do abdômen/distância entre os olhos, com maiores valores calculados para 26°C. Verificou-se que os maiores diâmetros dos ovócitos são obtidos a uma temperatura de 26°C, com fotoperíodo de 12,6/11,4 h L/E.

Estufas climatizadas para experimentos ambientais com rãs, em gaiolas

Foram construídas seis estufas climatizadas, instaladas inicialmente no Ranário Experimental da Universidade Federal de Viçosa (UFV) e, posteriormente, no Ranário Experimental da Fundação Universidade Federal do Rio Grande, com o objetivo de realizar experimentos para avaliar os efeitos do ambiente sobre o desempenho de rãs em gaiolas de fibra de vidro. Ambientes com temperaturas de 25ºC e fotoperíodo de 12/12 horas de luz/horas de escuridão (h L/E) serviram para adaptação das rãs por 15 dias antes de cada experimento. Os tratamentos consistiram em simular ambientes com temperaturas variando de 20 a 35ºC e fotoperíodos de 8/16, 12/12 e 16/8 h L/E. Foram realizados experimentos com rã-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802) e rã-manteiga (Leptodactylus ocellatus Linnaeus, 1758). Nessas estufas foi possível estimar que: a) os maiores ganhos de peso de rã-touro foram obtidos entre 27,6 e 29,7ºC, com melhor crescimento entre 28,2 e 30,1ºC; para rã-manteiga os melhores ganhos e conversão alimentar foram observados a 28,6 e 28ºC, respectivamente; b) a temperatura interage com fotoperíodo sobre o desempenho das rãs e seu desenvolvimento gonadal; c) a 27,7ºC (temperatura de conforto térmico) haverá menos rãs dentro d'água; d) a maior temperatura cloacal de rã-touro, 32,1ºC no seco e 33,8ºC dentro d'água, a 35ºC, evidenciou que as rãs se termorregulam; e) os níveis de tetraiodotironina (T4) no plasma decrescem na temperatura de conforto térmico; f) rã-manteiga condiciona-se ao manejo de rotina, reunindo-se ao redor do cocho na hora da alimentação.

Apoptosis during the seasonal spermatogenic cycle of Rana catesbeiana

In the bullfrog Rana catesbeiana, testicular weight is constant throughout the year, but the volume densities of germinative and interstitial compartments undergo inverse changes from winter (non-breeding) to summer (breeding). The occurrence of apoptosis in the seminiferous lobules of bullfrogs was investigated in these two periods using sections stained with haematoxylin and eosin (H&E), the TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labelling) method and transmission electron microscopy. TUNEL-positive cells were observed in the seminiferous lobules, and ultrastructural morphological details confirmed the occurrence of cell death by apoptosis. In summer, the occurrence of several spermatogenic processes (in addition to spermiogenesis and spermiation), and then the overconsumption of Sertoli cell-derived pro-survival factors, could be responsible for the increased density of apoptotic cells. Alternatively, the low apoptotic frequency in winter could be related to the constant homeostasis in the germinative compartment given that most lobules are filled with primary spermatocytes. As volume densities of interstitial and germinative compartments undergo inverse seasonal variations through the year, the incidence of apoptosis (in summer) could play a part in controlling the spermatogenic process, maintaining the lobular size when interstitial tissue is maximally developed. In winter, the low apoptotic cell density leads to spermatogenic recrudescence and, thereby, the production of an adequate quantity of spermatozoa for the next breeding period. Thus, apoptosis may participate not only in the maintenance of spermatogenic homeostasis, but also in the cyclical control of the different spermatogenic processes according to seasonal changes of the testicular compartments as a whole.

Unpalatability of Hyla semilineata tadpoles (Anura) to captive and free-ranging vertebrate predators

This study examines the unpalatability of Hyla semilineata tadpoles, relating this possible defence mechanism to their black, presumably aposematic, colouration. Bullfrog tadpoles (Rana catesbeiana), similar in size to the H. semilineata larvae, were used as controls in the experiments. The palatability of H. semilineata tadpoles was tested by offering the tadpoles to Fish (Hoplias malabaricus), free-ranging passerine birds (Pitangus sulphuratus) and hawks (Buteo magnirostris), and domestic chickens (Gallus domesticus). All predators showed a significant preference towards the control R. catesbeiana tadpoles. However, in experiments with fish, this preference was not significant for tadpole capture, only for their ingestion, suggesting that the fish could not distinguish between the two species before tasting them. Although great kiskadees (P. sulphuratus) preferred the control R. catesbeiana tadpoles, they promptly ingested more than half of the test H. semilineata tadpoles when these were offered alone. The chickens, used as naive predators, clearly learned to avoid the black H. semilineata tadpoles after a few trials. The conspicuous colouration and unpalatability of H. semilineata tadpoles may benefit the individual as well as the group, depending on the predator involved.

Schooling and swimming behaviors of Hyla semilineata tadpoles (Anura, Hylidae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Suplementação com vitamina C e E sobre o desenvolvimento e sobrevivência de girinos de rã-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802)

O presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da suplementação de vitamina C e E sobre o desenvolvimento e sobrevivência de girinos de rã-touro. Os animais receberam 50, 250 e 500mg de vitamina C ou E/kg de ração, distribuídos segundo delineamento inteiramente casualizado com 3 repetições cada. Na dieta controle, não foram adicionadas vitaminas. Os girinos suplementados com vitamina C ou E não apresentaram diferença significativa no crescimento, comparados ao controle. Não obstante, os suplementados com 500mg de vitamina C apresentaram melhor sobrevivência (62,83%) do que os animais controle (40,48%; p<0,05), nos demais níveis desta vitamina e a adição de vitamina E não alteraram a sobrevivência. O presente trabalho sugere que 500mg de vitamina C/kg de ração constitui uma opção para melhorar a sobrevivência de girinos de rã-touro.

Avaliação de métodos de coleta de fezes para determinação da digestibilidade protéica em rã-touro (Rana catesbeiana)

O presente trabalho teve como objetivo avaliar diferentes metodologias de coleta de fezes para determinação da digestibilidade protéica de alimentos para a rã-touro (Rana catesbeiana). As metodologias estudadas foram o método de coleta total das fezes; o método de coleta parcial das fezes usando indicador; o método de dissecação intestinal e o método por decantação de fezes com indicador, utilizando aquários para ensaios de nutrição com peixes. Os resultados dos CDA PB da ração obtidos para avaliação dos métodos de coleta foram: 62,1%, 65,0%, 61,3% e 70,3%, respectivamente. Todos os métodos de coleta de fezes são adequados para a realização de ensaios de digestibilidade com rãs.

Caracterização morfológica dos estádios de desenvolvimento do aparelho reprodutor masculino da rã-touro, Rana catesbeiana, no sistema anfigranja de criação intensiva

The objective of this work was to caracterize the morphological characterization of the development stages of male reproduction apparel of bullfrog Rana catesbeiana from intensive Anfigranja system. During the period of one year, 657 bullfrog males were removed from regrowing and reproduction sections in Anfigranja system to study basic aspects of the reproduction of this specie. The collections were realized monthly and, in that occasion, the body and testicles weights for each animal were recorded and their macroscopic gonadal characteristics, registred. Testicles from 274 males were removed and histologically analyzed. From the macro and microscopic gonadal characteristics, analysis set of the testicles, five stages of gonadal maturation for the male of Rana catesbeiana were determined: juvenile, beginning of maturation, intermediate maturation, advanced maturation and spent.

Estimativa do Tamanho da Primeira Maturação Sexual da Rã - Touro, Rana catesbeiana, no Sistema Anfigranja de Criação Intensiva

The objective of this research was to study the basic aspects of bullfrog reproduction in Anfigranja system from June 1989 to July 1990. For the 1493 animals involved in this experiment (657 males and 836 females) biometrical data were obtained (weight, length and tympanum diameter) and developmental stages of gonads were determined. Female sizes at first maturation were 10,33 cm and 109,78 g and for males it was around 8,09 cm; all males above 45 g were already in the maturation process. The relationship between tympanum diameter and body length (RTC) was considered a good index for male maturation.

Caracterização morfológica dos estádios de desenvolvimento do aparelho reprodutor feminino da rã-touro, Rana catesbeiana, no sistema anfigranja de criação intensiva

The objective of this work was to caracterize the morphological characterization of the development stages of female reproduction apparel of bullfrog Rana catesbeiana from intensive Anfigranja system. During the period of one year, 836 bullfrog females were removed from regrowing and reproduction sections of the Anfigranja system to study the basic aspects of the reproduction of this specie. The collections were realized monthly and, in that occasion, the body and ovary weights for each animal were recorded and their macroscopic gonadal characteristics, registred. The ovaries from 303 females were removed and histologically examined. From the macro and microscopic characteristics analysis set of the ovary, five stages of gonadal maturation for the female of Rana catesbeiana were determined: juvenile, beginning of maturation, intermediate maturation, advance maturation and spent.

Relationship of venom ontogeny and diet in Bothrops

We studied ontogenetic changes in venom toxicity of the pitvipers Bothrops jararaca and B. alternatus in order to evaluate the relationship between venom action and diet. Toxicity tests (LD50) were performed for the venoms of adult and juvenile snakes on mice and bullfrog froglets, which represented endothermic and ectothermic prey respectively. The venom of juveniles of B. jararaca, but not of B. alternatus, had a higher toxicity on anurans than that of adults. This finding is consistent with the feeding habits of these two species, because juveniles of B. jararaca feed mainly on small anurans and lizards, shifting to endothermic prey at maturity, whereas B. alternatus preys mainly on endotherms throughout its life. Venom toxicity in endotherms was higher for adults of B. jararaca compared to juveniles, a feature not observed for B. alternatus. It is proposed that prey death/immobilization is the main function of the venom of juvenile snakes. As the snake grows, the digestive role of venom may become increasingly important, because adults prey upon large and bulky prey. The importance of adult venoms in prey digestion is reflected in their higher proteolytic activity.

Histologia do rim, fígado e intestino de girinos de rã-touro (Rana catesbeiana) alimentados com dietas contendo própolis

This research was aimed at verifying the occurrence of possible alterations in liver, kidney and intestine of bullfrog tadpoles in stage 42 fed with diets containing different concentrations (0.0; 0.2; 0.5; 1.0 and 1.5%) of propolis hydroalcoholic extract. The experiment was carried out in laboratory of Aquatic Organisms Nutrition from Aquaculture Center of UNESP, where 1,400 tadpoles in stage 26 were used and distributed in twenty experimental aquariums. In the end of experiment (60 days) three tadpoles from each repetition were sacrificed and kidney, liver and intestine samples were collected to processing of histological slices in Histology's Laboratory pertaining to Department of Morphology and Physiology from FCAV - UNESP. Samples were fixed, dehydrated, stained in HE, analysed, photomicrographed and thickness of intestinal epithelium was measured. Histological disturbances in tadpoles's intestine, kidneys and liver were not observed. Thickness of intestinal epithelium from the same ones was not influenced (P>0.05) by propolis concentrations.