Improvement of the alcohol dehydrogenase from baker's yeast using polymers and salts for alcohol determinations in beverages

An alcohol dehydrogenase (ADH) was purified from dry baker’s yeast. This is a key enzyme of the primary short-chain alcohol metabolism in many organisms. In the present study, the obtained enzymatic preparation of baker’s yeast, containing 2.7 U/mg of ADH, was used in the reactions. The purified extract of the ADH obtained from Fermix commercial dry yeast, presented the highest activity and purification factor when ammonium sulfate was added in the precipitation of protein, in the range 35-60% (w/v). The enzymatic preparation was maintained for 2 months in the lyophilized form at 4ºC (retention of 96.2% of activity) in the presence of 1 mmol/L of sodium azide, and it maintained 47% of activity for 30 days at 30°C in the presence of 15% PEG. The assays of ethanol (detection range 5 mM -150 mM or 2.3 x 10-4 – 6.91 x 10-3g/L) in different samples in alcoholic beverages, presented a maximum deviation of only 2.1%. Assays of recovery of the substrate (99.25%) added in the wine showed that the methodology is viable for this sample type. The standard curve and the analytic curve of this method meet the conditions of precision, sensitivity, simplicity, and low cost, required for a useable analytical method.

Efeitos de absorventes de umidade e de aditivos químicos e microbianos sobre o valor nutritivo, o perfil fermentativo e as perdas em silagens de capim-marandu

The objective of this trial was to evaluate the nutritional value, fermentation profile and dry matter losses of Palisadegrass silages ensiled with either dried citrus pulp, soybean hulls, chemical or microbial additives. The trial was carried out in a completely randomized experimental design and in a factorial arrangement (3 x 5), with three dry matter levels (wet forage or forage ensiled with pelleted citrus pulp or pelleted soybean hulls) and five additives (without or with the presence of bacterial inoculants or the addition of: sodium benzoate, formic acid in the concentration of 62% or 44%), totalizing 15 treatments and 60 experimental silos. The variables analyzed were: nutritional value, losses due to gases and effluents, and dry matter recovery. The use of dried citrus pulp or soybean hulls at the ensiling time increased the dry matter content (29.4 and 28,9%) and decreased the effluent production (4.1 and 3.8 kg/t of fresh matter), also providing fermentable substrate to microorganisms, resulting in increased fermentation coefficient and digestibility of silages. The use of formic acid resulted in silages with higher digestibility and increased water-soluble carbohydrates and crude protein content. This additive was also effective in reducing the losses due to gases and, as a result, increased the total dry matter recovery. The treatment containing homolactic bacteria showed similar trend of increasing the digestibility and reducing the losses due to gases. The use of sodium benzoate was less effective in altering the fermentation pattern of tropical silages. The nutritional value and total dry matter losses of silages ensiled without additives can be considered satisfactory. However, wet forage ensiled with dried citrus pulp and, mainly, with soybeans hulls showed the best results. Treatments containing formic acid had a beneficial effect on the fermentation profile of tropical grass silages.

Renal- and calcium-dependent vascular effects of Polybia paulista wasp venom

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Growth, lipogenesis and body composition of piracanjuba (Brycon orbignyanus) fingerlings fed different dietary protein and lipid concentrations

Piracanjuba (Brycon orbignyanus) is a Brazilian migratory fast-growing omnivore, very appreciated as a sport fish, which is threatened to extinction in Southern Brazil due to stock over exploitation and dam building. Therefore, efforts have been made to raise this fish in captivity for reintroduction and aquaculture purposes. In the present study, the effects of different dietary protein and lipid concentrations on piracanjuba fingerlings growth performance, feed utilization, body composition, hepatosomatic index (HSI) and activity of the lipogenic enzymes fatty acid synthetase (FAS), glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) and malic enzyme (ME) were investigated using a 2 x 3 factorial experiment. Six casein-gelatin based diets were prepared combining two protein (30% and 32%) and three lipid concentrations (5.5%, 8.8% and 12.1%). Eleven fish, average weight 11.30 +/- 0.1 g, were held in each of 18 100-1 aquaria, supplied with recirculating freshwater. Each diet was randomly assigned to triplicate groups of fish and fed to apparent satiation, twice a day for 100 d. Piracanjuba fingerlings' daily weight gain (0.36-0.40 g), specific growth rate (1.43-1.51%), feed utilization and HSI were not influenced by dietary protein or lipid concentration. However, body composition was directly affected by dietary treatment. An increase in body fat and dry matter was observed as dietary lipid increased, for both dietary protein concentrations tested. The activity of FAS was depressed by increasing dietary fat levels but the G6PD activity did not differ among dietary treatments, although ME activity showed some regulation by dietary protein. These results indicate that an increase from 5.5% to 12.1% in the dietary lipid, at a dietary protein concentration of 30% or 32%, promotes body fat accumulation in piracanjuba fingerlings with no improvement in growth, suggesting that the lipid requirement for this species should be 5% or less, when raised for commercial purposes. However, the additional energy reserve from body fat accumulation could be desirable for piracanjuba fingerlings produced for stock enhancement. (C) 2003 Editions scientifiques et medicales Elsevier SAS and Ifremer/IRD/Inra/Cemagref. All rights reserved.

Atividade microbiana do solo em pomar de laranja em resposta ao cultivo de adubos verdes

Adubos verdes (AVs) são condicionadores do solo utilizados para a melhoria da estrutura e fertilidade do solo. Este estudo avaliou o efeito de Crotalaria spectabilis Roth (crotalária), Cajanus cajan (L) Millsp (guandu) e Brachiaria decumbens Stapf (braquiária) nas propriedades microbiológicas e bioquímicas do solo sob laranjal. As leguminosas foram plantadas nas entrelinhas do laranjal e, após 3 meses, cortadas e lançadas nas entrelinhas. A braquiária, já estabelecida, foi roçada e lançada nas entrelinhas. Após 5 meses, as amostras de solo foram coletadas na entrelinha e na linha, na profundidade de 0-20 cm. O delineamento experimental foi em parcela subdividida. Efeito significativo (p< 0,05%) da aplicação dos AV sobre as contagens de bactérias, as atividades da desidrogenase e nitrificante foram obtidas e aumentaram, em média, de 20, 39 e 190%, respectivamente. O número de fungos diminuiu de 57%. A atividade da urease e a solubilizadora, e os conteúdos de matéria orgânica e umidade não foram influenciados pela aplicação dos AVs. Dentre as plantas, respostas significativas foram obtidas decorrentes do estímulo da atividade da desidrogenase em 57% pelo guandu, da urease em 58% pela braquiária, solubilizadora em 346% pela crotalária e nitrificante em 236% pelo guandu ou braquiária em relação aos demais AVs. Estes resultados sugerem que a aplicação de AVs durante anos consecutivos pode estimular a ação dos microrganismos e melhorar a qualidade do solo.

Correlação da atividade de lactato desidrogenase e concentração de lactato com a classificação de efusões em cães

As efusões são problemas clínicos frequentes e que ocorrem em consequência de uma enfermidade que culmine com diminuição da pressão coloidosmótica intravascular, elevação da pressão hidrostática local, aumento da permeabilidade vascular e/ou comprometimento da drenagem realizada pelos vasos linfáticos. Dessa maneira, a avaliação laboratorial desse fluido torna-se relevante para que, em conjunto com os sinais clínicos apresentados pelo paciente, possa ser firmado um possível diagnóstico e instituída ação terapêutica adequada. Assim sendo, a classificação de uma efusão em transudato ou exsudato torna-se um dos pontos críticos para a elucidação do diagnóstico e condução do caso clínico. em Medicina Veterinária, o método tradicional de classificação de uma efusão é baseado na contagem celular e na concentração de proteínas do fluido. Contudo, diversos estudos evidenciam que tais parâmetros não são suficientes para a correta classificação de todas as efusões. Assim, o presente estudo foi conduzido com o objetivo de verificar a correlação de outros parâmetros bioquímicos com a diferenciação das efusões transudativas e exsudativas e, para tal, foram avaliadas as atividades de lacatato desidrogenase (LDH) das efusões, a relação de sua atividade fluido/soro, concentração de lactato das efusões, o gradiente de concentração de lactato do soro para o fluido e a concentração de proteínas das efusões. Os resultados obtidos permitiram observar que a atividade de LDH, a relação LDH efusão/soro, a concentração de lactato e o gradiente de concentração de lactato soro/efusão apresentam diferença estatisticamente significativa (P<0,05), bem como alta correlação com a classificação de uma efusão exsudativa.

Aspectos clínicos e concentração sérica da creatina-quinase e lactato-desidrogenase em cães submetidos à fisioterapia após atrofia muscular induzida

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Peritoneal fluid changes in horses subjected to small colon distension

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Acceleration of the decomposition of Sicilian lemon leaves as an auxiliary measure in the control of citrus black spot

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Alterations in muscular enzymes of horses competing long-distance endurance rides under tropical climate

Estudaram-se as alterações de atividade das enzimas musculares creatino quinase (CK), lactato desidrogenase (LDH) e aspartato aminotransferase (AST) em um grupo de cavalos que utilizados em provas de enduro de 70 e 100km de distância, em cinco competições. Os valores (U/l) basais (antes da largada) foram 245,13±9,84 para CK, 496,61±14,76 para LDH e 328,95±8,65 para AST. Todas as atividades das enzimas decresceram no primeiro momento das provas (~30km). Valores de pico, significativamente diferentes, foram alcançados para CK (413,59±50,75) imediatamente após 70km de distância; 24 horas após para LDH (628,61±33,30); e 48 horas após as provas para AST (389,89±16,96). A monitoração do período de recuperação revelou diferente comportamento entre as concentrações enzimáticas com CK retornando aos valores basais 24 horas pós-provas (279,61 ± 23,05). LDH e AST retornaram aos valores basais, 72 horas pós-provas (505,25±33,78 e 359,35±24,90, respectivamente). Os dados obtidos revelaram diferentes alterações na concentração de enzimas musculares de cavalos de enduro, diretamente relacionadas com a duração do esforço.

Chemically Assisted Enucleation Results in Higher G6PD Expression in Early Bovine Female Embryos Obtained by Somatic Cell Nuclear Transfer

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Growth and enzymatic responses of phytopathogenic fungi to glucose in culture media and soil

The effect of inoculation of Aspergillus flavus, Fusarium verticillioides, and Penicillium sp. in Dystrophic Red Latosol (DRL) and Eutroferric Red Latosol (ERL) soils with or without glucose on the total carbohydrate content and the dehydrogenase and amylase activities was studied. The fungal growth and spore production in culture medium with and without glucose were also evaluated. A completely randomized design with factorial arrangement was used. The addition of glucose in the culture medium increased the growth rate of A. flavus and Penicillium sp. but not of F. verticillioides. The number of spores increased 1.2 for F. verticillioides and 8.2 times for A. flavus in the medium with glucose, but was reduced 3.5 times for Penicillium sp. The total carbohydrates contents reduced significantly according to first and second degree equations. The consumption of total carbohydrates by A. flavus and Penicillium sp. was higher than the control or soil inoculated with F. verticillioides. The addition of glucose to soils benefited the use of carbohydrates, probably due to the stimulation of fungal growth. Dehydrogenase activity increased between 1.5 to 1.8 times (p <0.05) in soils with glucose and inoculated with the fungi (except F. verticillioides), in relation to soil without glucose. Amylase activity increased 1.3 to 1.5 times due to the addition of glucose in the soil. Increased amylase activity was observed in the DRL soil with glucose and inoculated with A. flavus and Penicillium sp. when compared to control.

ATIVIDADE MICROBIANA E PROPRIEDADES BIOQUÍMICAS do SOLO RESULTANTES da APLICAÇÃO DE GESSO AGRÍCOLA NA CULTURA do REPOLHO

Conselho Nacional do Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Microbial alterations of the soil influenced by induced compaction

A compactação é um dos fatores mais agravantes para a qualidade do solo, porém o seu efeito na comunidade e atividade enzimática microbiana não tem sido suficientemente estudado. Seis níveis de compactação foram obtidos pela passagem de tratores com diferentes pesos em um Latossolo Vermelho, e a densidade final foi medida. Amostras de solo foram coletadas nas profundidades de 0-10 e 10-20 cm, após a colheita do milho. O efeito da compactação foi evidente em todos os parâmetros estudados, mas nem sempre foi significativo. A contagem das bactérias totais reduziu significativamente em 22-30 %, e a das nitrificantes, em 38-41 %, no solo com maior densidade em relação ao controle. Contudo, a população de fungos aumentou de 55 a 86 %, e a das bactérias desnitrificantes, de 49 a 53 %. A atividade da desidrogenase diminuiu de 20 a 34 %; a da urease, de 44 a 46 %; e a da fosfatase, de 26 a 28 %. O conteúdo de matéria orgânica e o pH do solo diminuíram na camada 0-0,10 em relação à de 0,10-0,20 m e influíram possivelmente na redução das contagens microbianas exceto das bactérias desnitrificantes, e na atividade das enzimas, menos a da urease. Esses resultados indicam que a compactação do solo teve influência na comunidade de microrganismos aeróbios e na sua atividade. Esse efeito pode alterar a ciclagem de nutrientes e diminuir a produção da planta.

Impact of successive sugarcane harvests and trash management practices on soil microbiological properties

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)