Indução de morte celular por apoptose decorrente da irradiação com Raios-X: um ensaio com células mamárias humanas tumorais

Apoptosis is a form of programmed cell death selectively removes abnormal cells, and thus contributes to maintaining the balance of the dynamics of cell reproduction. Therefore the verification of the occurrence of apoptotic cell death after a pathological stimulus is crucial for the analysis of the maintenance of normal cell cycle of a given tissue or organ. In this experiment were used cells lines human mammary tumor MDAMB231, T47, MCF7, which were irradiated with X-rays at a dose of 5 Gy in a time interval of 15 seconds, and filtration of 1mm aluminum. Samples containing the cells were grown in a specific culture medium, containing fetal bovine serum and growth factor, and two samples were prepared with each of the cell lines, one to be irradiated, and another that has not been irradiated, which denoted by negative control of the irradiation. The primary goal of the experiment was to verify and compare the rates of apoptosis in each cell lines, in which were irradiated and that were not irradiated, using flow cytometry as a method for detecting apoptotic cell death in together with specific markers annexin V and propidium iodide. Data from the readings made by flow cytometry were analyzed and interpreted using the software WinMDI statistical graph. By comparing the indices relating to the readings of positive and negative for specific markers of apoptosis, based on differences in the statistical data presented lectures regarding the cellular irradiated and not irradiated, collude cells in question once... (Complete abstract click electronic access below)

Ação da IL-18 sobre a expressão do receptor dectina-1 e produção de citocinas por monócitos humanos desafiados com diferentes cepas de Paracoccidioides brasiliensis

Estudos têm demonstrado que o reconhecimento inicial de microrganismos é mediado por receptores celulares expressos em células da imunidade inata denominados receptores de reconhecimento de padrões (PRRs). Assim, a interação entre moléculas de superfície dos patógenos e receptores homólogos presentes na membrana celular de monócitos, modula a fagocitose, a ativação da célula e conseqüentemente a produção de citocinas. Trabalhos têm demonstrado a importância da estimulação de receptores toll-like 2 e 4 (TLR2 e TLR4), receptores de manose (MR) e dectina-1 de monócitos, tanto em infecções bacterianas como fúngicas, culminando com indução de produção de várias citocinas. A IL-18 é uma citocina indutora de IFN-g e possui uma ação extremamente importante, por ser capaz de promover tanto uma resposta do tipo Th1 ou Th2, dependendo do contexto de estimulação e do microambiente de citocinas. Em trabalho recente demonstramos que a IL-18 possui uma ação importante sobre o aumento da expressão de MR em monócitos humanos, e o reconhecimento do Paracoccidioides brasiliensis via esse receptor causaria aumento do crescimento fúngico no interior da célula. Dessa forma, os objetivos do presente projeto foram: 1) Avaliar a ação da IL- 18 sobre a expressão do receptor dectina-1 por monócitos humanos desafiados in vitro com diferentes cepas do P. brasiliensis; b) Avaliar a participação da dectina-1 na indução da produção de IL-18, TNF-a e IL-10 por monócitos desafiados in vitro com diferentes cepas do P. brasiliensis. Assim, monócitos de indivíduos normais tratados in vitro com IL-18 foram desafiados com diferentes de cepas do P. brasiliensis, e a expressão do receptor dectina-1 foi avaliada pela técnica de citometria de fluxo. A dosagem de IL-18, TNF-a e IL-10 no sobrenadante de cultura de monócitos desafiados com P. brasiliensis foi realizada utilizando a técnica de ELISA . Os resultados mostraram que a ...

Análise etofarmacológica do teste de exposição ao rato (interação presa-predador) para o estudo da ansiedade em camundongos

Com o objetivo de propor mecanismos que auxiliem na compreensão da neurobiologia do medo e da ansiedade, diversos modelos animais vem sendo utilizados. Dentre eles destaca-se o Teste de Exposição ao Rato (RET), que é um modelo etológico de interação presa (camundongo) – predador (rato), conhecido por eliciar a expressão de diversos tipos de comportamentos defensivos no camundongo, tais como avaliação de risco, esquiva, congelamento, entre outros. Com o intuito de aumentar a aversividade do modelo proposto por Yang e colaboradores (2004), foi proposto um novo modelo de RET, semelhante ao modelo padrão, porém com alterações de algumas variáveis como aumento da luminosidade, ausência de maravalha, alteração do local de inserção do camundongo no aparato, substituição da tela de arame (usada na separação da superfície) por uma tela de acrílico e arame e uma divisão virtual da superfície em duas partes, uma distante da tela por 10 cm (superfície proximal) e outra com 13 cm até chegar ao túnel (superfície distal). Um estudo piloto realizado comparando o novo teste de exposição ao rato com o modelo padrão demonstrou que no novo modelo de exposição há uma maior preferência pela presa às áreas protegidas (toca e túnel) e uma maior expressão de avaliação de risco, indicando talvez uma maior sensibilidade à expressão de comportamentos defensivos de camundongos e possivelmente a fármacos que atuem no sistema de defesa. No presente estudo foram investigados os efeitos dos (i) benzodiazepínicos diazepam e alprazolam, (ii) dos fármacos ansiogênicos cafeína e pentilenotetrazol e (iii) do antidepressivo fluoxetina (aguda e cronicamente). O tratamento com alprazolam resultou num efeito antiaversivo mais evidente quando comparado ao diazepam. O tratamento agudo 10 com cafeína, por sua vez, apresentou um efeito ansiogênico bastante sutil, diferente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Avaliação comportamental da interação entre o estresse de privação social e cocaína em ratos

No mundo, é alto e crescente o número de pessoas que fazem uso de substâncias psicoativas de abuso. Estudos clínicos demonstram que a exposição ao estresse pode aumentar o risco ao abuso de drogas, a vulnerabilidade para o desenvolvimento de dependência e a probabilidade de recaídas. O uso repetido de substâncias de abuso pode promover sensibilização comportamental. A sensibilização comportamental reflete em neuroadaptações que estão envolvidas no desenvolvimento da farmacodependência. Logo, tanto a administração repetida da substância de abuso quanto a exposição repetida a situações de estresse podem promover sensibilização comportamental, culminando em administração subsequente de substâncias de abuso. Esse fenômeno é chamado de sensibilização cruzada entre estresse e drogas. Em modelos animais, a sensibilização comportamental pode ser demonstrada pelo aumento progressivo da resposta locomotora a uma dose fixa da substância psicoativa após a exposição repetida a drogas ou ao estresse. Altos índices de uso de substância psicoativa de abuso tem sido observados entre adolescentes, no Brasil e no mundo. Adultos e adolescentes apresentam diferenças em relação à resposta às drogas e ao estresse. Embora seja de grande relevância, poucos são os estudos realizados para avaliar o efeito do estresse em modelos animais de adolescência. Desta forma, o objetivo desse projeto foi estudar se a exposição ao estresse crônico de isolamento social durante a adolescência promove sensibilização comportamental cruzada com a cocaína em ratos adultos e adolescentes

Estudo fotodinâmico da clorofila a, azul de metileno e rosa bengala como agente inseticida contra Aedes aegypti

Photodynamic therapy, term introduced by von Tapeiner in 1900, can be defined as the administration of a non toxic drug, i.e., a dye, known as photosensitizer (FS), which subsequently will be illuminated with light of specific wavelength. PDT is based on the interaction among FS, oxygen and light, which through photochemical reactions cause cell death. The FS molecules must have a high probability to form the singlet state after the excitation, which can induce chemical changes in the neighborhood in two ways, called reactions type I and type II. The type II reaction is based on the exchange of energy to molecular oxygen, exciting it to its state of higher energy (singlet), which is highly reactive. The proposed mechanisms for cell death are linked to damage to the DNA, mitochondria and to the cytoplasmic membrane. Several pre‐clinical and clinical trials have been carried out and the PDT is already used in many countries for treatment mainly against certain types of cancer. The therapy also has been gaining strength in antimicrobial control, since the microorganisms have appeared increasingly resistant to current antibiotics. Another attempt to use the PDT is for the inactivation of macro‐organisms, such as micro‐crustaceans and mosquitoes. To this end I tested whether the photosensitizers methylene blue, rose Bengal and the chlorophyll a has insecticidal activity against the yellow fever and dengue vector mosquito, Aedes aegypti. Since these diseases have no effective treatments, its control is linked to the vector control, which has shown resistance to chemical pesticides used. Based on this, this work shows its importance, because it is a new type of mosquito control since all the photosensitizers used are low cost, do not generate toxic products at the concentrations used and showed good results in mortality. The best photosensitizer was rose Bengal... (Complete abstract click electronic access below)

Aplicabilidade das equações isotermas de Freundlich e Langmuir na interação biossortiva de corantes têxteis com Saccharomyces cerevisiae liofilizada

This paper presents a study of the applicability of adsorption isotherms, known as Langmuir and Freundlich isotherm, between the biosorptive interaction of yeast lyophilized Saccharomyces cerevisiae and textile dyes. To that end, we prepared stock solutions of the textile dyes Direct Red 23 and Direct Red 75 in the concentration of 1.000μg/mL and a yeast suspension at 2,5%. We did experiments for two cases, firstly for the case that we have a fix concentration of yeast at 0,500mg/mL and an variable concentration of dye range from40, 50, 60, 80 and 100μg/mL, then for the case that we fixed the concentration of dye at 100μg/mL and the yeast concentration was variable range from 0,250, 0,500, 0,750, 1,000, 1,250mg/mL. For the dye Direct Red 23 we did analysis in the pH 2,5, 4,5 and 6,5; for the Direct Red 75, we just did for the pH 2,5. We leave the dye solution in contact with the yeast for 2 hours at a constant temperature of 30°C and then centrifuged and analyzed the sample in a spectrophotometer and finally made and analysis of parameters for the removal and study of the isotherms. After the biosorption, was observed that for the Direct Red 23 in the pH 2,5 was needed 1,407mg/mL of yeast for total removal, while for the pH 4,5 was needed 8,806mg/mL and in pH 6,5 was 9,286mg/mL; for the Direct Red 75 in pH 2,5 was needed 1,337mg/mL. This difference can be explain by the adsorption isotherms, was observed that in the case when the yeast was fix when we had in a acid pH the behavior of the system was compatible with the Langmuir isotherm, and thus, an monolayer pattern. And that when we decrease the acidity of the medium the system became more compatible with a Freundlich isotherm, and thus, a multilayer pattern; for the case that the yeast was variable this is not much evident, however for the pH 2,5 she became compatible with a Langmuir isotherm... (Complete abstract click electronic access below)

Análise da expressão protéica de moléculas de adesão celular em melanomas cutâneos

Cutaneous melanoma is a malignancy caused by the uncontrolled proliferation of melanocytes. Has been increasing in incidence and mortality over the years. This type of tumor may arise in the skin or any other place where there was migration of neural crest cells. Melanocytes are located in the basal layer of the epidermis forming the epidermal melanin unit, involving a melanocyte to 36 keratinocytes. The proliferation of melanocytes depends on this relationship with the keratinocytes, gap junctions, E-cadherin and desmoglein. The basal membrane is responsible for promoting the integrity of the skin, their adhesion structures shown to be altered in several skin diseases. Some molecules that play the role of adherence in this membrane are the laminins, type IV collagen and type XVII and perlecan. Analysis of protein expression of cell adhesion molecules in melanoma by immunohistochemistry on tissue microarray (TMA). We selected paraffin blocks of patients who were diagnosed with cutaneous melanoma in the period 1995 to 2010, reaching a sample of 124 cases. All these have gone through review of preparation for subsequent histological analysis of tissue microarray (TMA). The protein expression will be analyzed by immunohistochemistry, using markers anti-laminin, anti-collagen type IV and type XVII and anti-perlecan. There was a predominance of female patients, Caucasians and southeastern Brazil. There were frequent in type of extensive superficial ulcers with Breslow depth greater than 4 mm, Clark level IV and mitotic index greater than 6 mitoses per cga. The patients, most of them were female with mean age of 57.13 years and Caucasian. The most frequent histological type was extensive superficial followed by acral lentiginous. Predominated cases very deep, with Breslow thickness greater than 4 mm, Clark IV, ulcerated and on average by 9 cga mitosis, leading to worse prognosis in this sample. It...(Complete abstract click electronic access below)

Análise da expressão do gene CaPox que codifica uma peroxidase de classe III envolvida na interação do cafeeiro com nematóides

A caracterização e isolamento do gene com expressão específica em raiz de café (Coffea arabica) que codifica uma peroxidase (CaPOX) e suas respectivas regiões promotoras, permitiu realizar a caracterização da expressão desse gene em reposta a estresse biótico (infecção por nematóides) assim como a análise funcional do seu promotor. Promotores tecido-específicos responsáveis pela regulação de genes responsivos a estresses bióticos tornam-se fundamentais em programas biotecnológicos que visam o aumento da resistência e tolerância vegetal. Partindo desse princípio, realizou-se a quantificação da expressão relativa do gene CaPOX em raízes de café utilizando plantas de Coffea arabica de um cultivar susceptível (Mundo Novo) e de outro cultivar resistente (IAC 388-17-1) a nematóides, respectivamente. Em paralelo utilizou- se plantas transgênicas de tabaco (Nicotiana tabacum SR1) contendo a versão completa do promotor do gene CaPOX em fusão transcricional ao gene repórter uidA (que codifica a β-glucuronidase; GUS) . A partir disso, pode-se observar que o gene CaPOX tem sua expressão aumentada em resposta a infecção por nematóides, sendo que a indução observada ocorre nos tempos iniciais pós-inoculação. Da mesma maneira, o promotor do gene CaPOX é responsivo a infecção por nematóides, sendo ativado nos tempos iniciais pós-inoculação

Expressão de genes relacionados a cálcio e glutamato no hipocampo de pacientes com epilepsia do lobo temporal

A epilepsia do lobo temporal (ELT) é a principal forma de epilepsia, e a principal lesão desenvolvida por pacientes com ELT é a esclerose mesial temporal (EMT) apresentando perda neuronal, gliose e atrofia da região do hipocampo. Os íons cálcio são fundamentais para o funcionamento de inúmeras vias metabólicas em todos os níveis fisiológicos e desempenham papel fundamental nas respostas de despolarização neuronal. Foi comprovado que a ativação tanto de receptores ionotrópicos quanto metabotrópicos de glutamato promove o influxo anormal de Ca2+ para o meio intracelular, potencializando o efeito de excitação associado à EMT. O cálcio atua tanto como mensageiro celular secundário, quanto primário através da interação com um receptor específico na superfície celular, o Receptor Sensor de Cálcio (CASR). O CASR é expresso em diversas regiões do cérebro, incluindo o hipocampo, no entanto são desconhecidas muitas das possíveis funções desempenhadas por este receptor no cérebro. Ele pertence à família de receptores acoplados a proteína-G, e exibe homologia significativa com os receptores metabotrópicos de glutamato (mGluRs). Ademais, os mGluRs regulam a expressão da família de proteínas ligantes de cálcio neuronal, da qual faz parte a proteína VILIP-1, associada especificamente com o fenômeno da plasticidade sináptica no cérebro. O objetivo deste projeto foi determinar a expressão das proteínas CASR, mGluR1 e VILIP-1 em tecidos de hipocampo de pacientes com epilepsia do lobo temporal comparando com a expressão de tecidos de indivíduos normais. Os três genes encontraram-se subexpressos nos tecidos de pacientes com ELT, sendo que os tecidos dos pacientes, em grau crônico da doença, justificam tais graus de expressão. Sugere-se uma possível interação entre CASR e mGluR1 e...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

A interação usuário-produtor na indústria petrolífera nacional: o caso da Petrobras e seus fornecedores

Este estudo analisa o desenvolvimento tecnológico da indústria petrolífera nacional através da interação usuário-produtor, com ênfase no segmento do upstream offshore, ao longo dos anos 2000, através dos estudos de caso entre a Petrobras (usuária) e seus fornecedores de árvore de natal molhada (ANMs), a Aker Solutions do Brasil e a FMC Technologies, interpretados a partir da literatura schumpetriana e neoschumpeteriana

Expressão do gene Glipican 3 (Gpc3) no urotélio da bexiga de ratos expostos ao diuron (3-(3,4-dichlorophenyl)-1,1-dimethylurea) por 7 dias e 20 semanas

Diuron (3-(3,4-dichlorophenyl)-1,1-dimethylurea) is a substituted urea herbicide widely used in crops of sugar cane, cotton and soybeans. In 1997, this agent has been classified by the United States Environmental Protection Agency as known/likely human carcinogen because it induced tumors in the urinary bladder and renal pelvis of rats, and breast and skin of mice exposed to 2500 ppm for feed for two years. A previous study from our group demonstrated dose-response relationship in the gene expression profile associated with severe necrosis on bladder urothelium and increased incidence of simple hyperplasia in male Wistar rats treated with different concentrations of diuron for 20 weeks. To check how early the molecular changes occurs, rats were fed for 7 days with diets containing diuron at 0, 125, 500 or 2500 ppm. The main observations recorded were urothelium ultrastructural alterations and disruptions of molecular pathways associated with cell-cell interaction and the tissue organization maintenance. Particularly, the gene Glypican 3 (Gpc3), a surface proteoglycan related to cellular adhesion and apoptosis induction, was down regulated on urothelium exposed to 2500ppm diuron for 7 days and 20 weeks. The aim of this study was validate by quantitative RT-PCR real time, the reduced Gpc3 gene expression in epithelial cells of the urinary bladder of male Wistar rats treated with different concentrations of diuron for 7 days and 20 weeks. The endogenous control of the quantitative PCR real time technique was the β-actin gene and the target was the gene Gpc3. The relative quantification (RQ) was obtained by the method of relative quantification 2-ΔΔCt . Animals exposed to diuron for 7 days or for 20 weeks presented reduction of Gpc3 gene expression compared to the control group. This reduction was statistically significant only for the 7 days study. Moreover, by comparing animals exposed for 7 days with the exposed for 20 weeks, it was ...

Desenvolvimento de equipamento LED para aplicação em cultura celular

O estágio realizado em parceria entre o Departamento de Física e Biofísica do IBB-UNESP e o Hemocentro de Botucatu da FMB-UNESP teve como objetivo desenvolver um novo equipamento de luz LED capaz de interagir com culturas celulares. Desta forma foi desenvolvido um equipamento com luz azul e luz vermelha. A luz azul é responsável por inibir o crescimento celular, a luz vermelha é responsável por aumentar o crescimento celular. O equipamento consiste de uma fonte, e dois conjuntos com três LEDs cada. A cultura celular escolhida foi a de Miemola Murino (NS1), uma linhagem que possui alta taxa de crescimento e que foi mantida em estufa e meio de cultura, (simulando condições normais de sobrevivência), sendo irradiada três vezes ao dia. As amostras foram coletadas e contadas em câmara de Neubauer. Os resultados obtidos, quando comparados com o controle, não apresentaram significativa diferença de crescimento quando irradiados com luz LED vermelho. Porém quando comparados o grupo controle com o grupo irradiado com LED azul, notou-se uma significativa redução da quantidade de células a partir do sétimo dia de irradiação. Acredita-se que a ineficácia dos LEDs vermelhos ocorreram pois utilizamos células com metabolismo bastante elevado, dificultando um aumento ainda maior da taxa de crescimento. A redução da população de células azuis ocorre pois a radiação interage com a membrana celular, causando a quebra dessa membrana e conseqüente morte da célula. Outra via para a morte é a lesão causada no DNA das células, que ocorre quando a luz azul é absorvida pela molécula

Redes de interação entre dispersores de sementes e Euterpe edulis (Arecaceae) em um grandiente de defaunação

As alterações antropogênicas ao ambiente vêm afetando muitos componentes dos ecossistemas naturais, produzindo frequentemente um padrão não aleatório de extinções, associado a características espécie-específicas. Por sua vez, a extinção local de espécies muitas vezes se traduz na perda de interações. Dessa forma, a perda de frugívoros, pode acarretar mudanças na estrutura das interações mutualísticas, com consequências futuras para espécies de plantas que dependem destes para a dispersão de suas sementes. Uma das espécies potencialmente afetada pela perda de frugívoros, principalmente os de grande porte, é o palmito juçara (Euterpe edulis). Exploramos aqui então se a extinção local de aves frugívoras se dá de uma maneira não aleatória e investigamos as consequências dessas extinções para o processo de remoção e dispersão de sementes de E. edulis. Observamos um padrão aninhado e modular na comunidade de dispersores de sementes de palmito juçara, indicando que as extinções ocorrem de forma não aleatória. Utilizando um índice de diversidade taxonômica observamos também que certos clados taxonômicos são mais propensos à extinção local, assim como previmos no início. Assim, fica então evidente que a extinção local dos frugívoros de E. edulis ocorre de maneira não aleatória, havendo estreita relação taxonômica entre estas espécies primariamente extintas, sendo os grande dispersores os mais afetados. Em áreas não defaunadas, apesar de observarmos uma baixa taxa de visitação, há uma alta taxa de consumo, sendo os grandes e médios dispersores importantes responsáveis pela remoção de sementes nestes locais. Em contrapartida, consequência da própria perda dos grandes frugívoros, áreas defaunadas demostraram baixa visitação de frugívoros aos frutos de E. edulis e baixa taxa de consumo destes, sendo os principais dispersores... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Estudo da dispersão pós-alimentar em larvas de moscas-varejeiras via autômatos celulares

In this paper, a computational analysis, using a cellular automata model, has been developed to analyze post-feeding dispersal behavior of blow y larvae. This model aimed to: simulate the exponential decline of pupal number in relation to the feed source and spatial oscillation due to larval interaction during dispersal; study whether the prior pupal presence in uences distribution patterns of larval frequency; and compare obtained unidirectional dispersal patterns to the cross-dimensional ones. The cellular automata (CA) model was able to successfully reproduce the essential features of the larval dispersal process and, thus, show the importance of local interaction in the studied dispersal process dynamics. Oscillations could be explained by the interaction among dispersing larvae and intrinsic pupation time. The box size and the initial larval density were important factors for the experiment because they in uenced the results. Results showed that the unidirectional dispersal could be used to simulate the larval dispersion that occurs in the natural environment, because both models had a similar result. These results are important to understand how di erent factors can in uence the dynamics of blow y larval dispersal, bringing important results for behavioral ecology and forensic entomology

iMusic Education: um estudo bibliográfico sobre a interação entre jovens, novas tecnologias e educação musical

Este trabalho é de natureza qualitativa e consiste em um estudo bibliográfico referente à interação entre jovens, educação musical e novas tecnologias. A partir da análise dos textos levantados, procura-se compreender como educadores musicais posicionam-se frente às tecnologias em suas aulas; e o quão significativas elas podem ser quando utilizadas. Inicialmente, o procedimento metodológico se deu através da definição de TICs e de uma contextualização sobre a presença das tecnologias na escuta, na educação e nas práticas musicais. Em seguida, utilizou-se quatro artigos publicados na Associação Brasileira de Educação Musical (ABEM), os quais foram analisados e discutidos de acordo com o pensamento vigente na bibliografia estudada, procurando verificar o estado da produção e aplicação de conhecimentos sobre o tema nesta área. Por fim, constata-se que a presença das tecnologias no ensino musical implica em mudanças no papel do professor e na matriz curricular dos cursos de Licenciatura em Música.