Avaliação da migração das células progenitoras após terapia da tendinite equina

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Análise do potencial osteogênico de células estromais derivadas da medula óssea de ratas adultas e senis submetidas ou não ao treinamento de força

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Estudo dos mecanismos envolvidos no processo de diferenciação em linhagem osteogênica de células-tronco mesenquimais da medula óssea de ratos Wistar e ratos espontaneamente hipertensos (SHR)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Análise comparativa de diferentes metodologias para cultivo de células-tronco mesenquimais derivadas de tecido muscular

Pós-graduação em Biociências - FCLAS

Fabricação de filmes ultrafinos automontados para aplicações em células a combustível

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Estudo das células primárias dentais, viabilidade celular e bioatividade de materiais á base de silicato de cálcio

Pós-graduação em Odontologia - FOAR

Produção de anticorpos monoclonais murinos dirigidos contra células-tronco mesenquimais de coelho

Mesenchymal stem cells (MSCs) are a heterogeneous population of cells that proliferate in vitro as plastic-adherent cells, have fibroblast-like morphology and can differentiate into bone, cartilage and fat cells. Therapeutic potential of MSCs have been studied in experimental models, such as rabbit, in Laboratory of Cell Engineering of Botucatu. However, no specific markers have been reported for expanded rabbit MSCs, which hampers the isolation of pure MSC populations by immunophenotypic characterization. Thus, the objective of this study was to produce monoclonal antibodies (mAbs) to rabbit MSCs. MSCs derived from rabbit bone marrow (BM) were isolated, cultured, expanded ex vivo, and immunized into three BALB/c mices, and spleen cells subsequently harvested were used to generate hibridoma cell lines secreting antibodies against MSCs. Hybridoma cells were screened by flow cytometry and antibody-producing cells were subjected to subsequent rounds of retests. MSC1-160 obtained the best positivity for IgG expression and was cloned by limiting dilutions and micromanipulation. Ascitic fluid from ten best clones was purified by affinity chromatography in Protein A-sepharose CL-4B column and purification control was performed by electrophoresis in agarose gels. The purified IgG were tested against rabbit MSCs, obtaining high positivity by flow Cytometry. In conclusion, we developed 10 mAbs, MSC1-160 A20, A30, A41, A47, A55, A60, A63, A69, A81, and A82, that recognize rabbit MSC cell surface antigens showing potential for immunophenotypic characterization of rabbit MSC cell lines

Uso de células-tronco para o tratamento de tendinite em eqüinos

Brazil has the fourth largest horse herd in the world, this is due the recognition and appreciation that the different equestrian games are having within the country. Injuries of the tendon, especially in the digital flexor tendon, are the main cause of athletic life reduction among horses. The treatment of tendinitis in horses seeks full recovery of the damage tissue reestablishing the function previously lost, however conventional treatments have proven to be ineffective when considered the quality of the scar tissue and the rate of recurrence. Due to this, the use of adult stem cells to the treatment of musculoskeletal injuries of horses has been studied for some time. This method of treatment consists of aspiration of bone marrow or removal of subcutaneous fat tissue and implantation of these cells in the injured tissue. After obtaining the bone marrow the implantation can be performed with total bone marrow, with the mononuclear fraction of MSC or with cells cultured in vitro. From the fat tissue is used the stromal vascular fraction obtained by collagenase digestion, followed or not by cell culture. According to some studies, cell therapy with material obtained from bone marrow or adipose tissue has shown to be viable, given that these materials are abundant in repair components such as mesenchymal stem cells (MSC), growth factors and other components of the collagen matrix. Several studies using both types of cells have shown great potential and promising clinical results. However, knowledge of the biology and characterization of these cells remain largely unknown, and therefore is needed great care and caution when using stem cells for the treatment of musculoskeletal disorders in horses

Carcinoma de células de Merckel humano e sua potencial associação com o recémdescrito poliomavírus MCPyV: avaliação preliminar de biopsias e análise de casualidade

Neoplasias malignas da pele são os cênceres mais comuns da espécie humana. No entanto há tipos raros como o Carcinoma de células de Merkel (CCM), cuja incidência tem aumentado em todo mundo. O CCM possui curso agressivo, com freqüente envolvimento de nódulos linfáticos regionais e metástases à distância. Adicionalmente, afeta predominantemente idosos e imunocomprometidos, fato que levou-se a suspeita de uma possível etiologia infecciosa para essa neoplasia. Nesse foi-se isolado e descrito o MCPyV, um novo poliomavirus humano, diretamente de células tumorais do CCM. O objetivo do presente trabalho é dar continuidade à pesquisa desse novo vírus apresentando dados iniciais da pesquisa do MCPyV em número significativo de casos de CCM de pacientes brasileiros. Para tanto, foram analisadas 24 biópsias de CCM fixadas e incluídas em parafina, das quais foram extraído o material genômico e o produto submetido à PCR convencional com três pares de iniciadores descritos pela literatura (LT1, LT3 e VP1), com a finalidade de se detectar segmentos do vírus. No presente estudo o genoma viral foi detectado em 11/24 (45,8%) das amostras avaliadas, sendo que a positividade para cada par de iniciadores foi de 4/24 (16,7%) para LT1, 11/24 (45,8%) para LT3 e 4/24 (16.7%) para VP1. Essas freqüências são menores do que a relatada pela literatura e essa diferença pode ser devida a diferença nas amostras analisadas e nas técnicas empregadas. Outros estudos são necessários para comprovar a relação de causalidade, assim como desvendar o ciclo do MCPyV

Células granulares do giro denteado recém-geradas em ratos epilépticos jovens e idosos apresentam dendritos basais

As células granulares do giro denteado do hipocampo são continuamente geradas na zona subgranular em mamíferos. Condições como epilepsia e envelhecimento podem alterar a proliferação celular e também certas características morfológicas das células granulares, como a formação de dendritos basais. Através da imunohistoquímica para doublecortin, marcador neuronal de células granulares imaturas, o estudo visa avaliar a proliferação destas células e quantificar o número de dendritos basais em animais epilépticos crônicos usando o modelo de Epilepsia de Lobo Temporal induzido por pilocarpina. Contatamos que a relação de células granulares com dendritos basais permanece constante no decorrer da vida do animal epiléptico de forma que esta alteração plástica das células granulares não seja fator determinante na patologia

Avaliação da atividade citotóxica e genotóxica de extratos brutos de metabólitos secundários de fungos endofíticos isolados da Eugenia jambolana em células de hepatocarcinoma murino (Hepa-1c1c7)

O Brasil apresenta regiões com grande diversidade geográfica proporcionando o desenvolvimento de diferentes espécies vegetais, favorecendo a busca por bioativos com fins terapêuticos. Nos últimos anos, fungos endofíticos vêm sendo considerados fontes importantes de produtos naturais, demonstrando atividades biológicas de interesses terapêuticos. Pesquisas apontam que extratos brutos oriundos de fungos endofíticos da Eugenia jambolana demonstram atividades antineoplásicas e antimicrobianas. No presente estudo verificou-se a atividade citotóxica e genotóxica de extratos brutos provenientes do metabolismo secundários dos fungos endofíticos isolados de partes da planta da Eugenia jambolana, como caule (Ej- c), folhas (Ej-f), fruto verde (Ej-fv) e fruto maduro (Ej-fm) por meio de experimentos in vitro, utilizando células de hepatocarcinoma murino selvagem (Hepa-1c1c7). Para avaliar a citotoxicidade dos extratos brutos foi realizado o teste do MTT, podendo ser observados diferentes perfis citotóxicos de acordo com a parte da planta e o tempo de exposição de 24 e 48 horas. No tempo de exposição de 24 horas as amostras de Ej-fv(1) e Ej-fv(3) apresentaram CI50 de 65,57 μg/ml e 85,75 μg/ml, respectivamente. Já para amostra Ej-fm(1) houve CI50= 46,53 μg/ml . Nas análises que correspondem o tempo de exposição de 48 horas os extratos brutos do caule Ej-c ( Ej-c(3) e Ej-c(5)) apresentaram CI50 nas concentrações de 84,65 μg/ml e 95,35 μg/ml, respectivamente. O composto Ej-c(1) também foi observado uma menor citotoxicidade na concentração de 100,0 μg/ml. A atividade citotóxica também foi observada nas amostras da folha Ej-f (Ej-f(1), Ej-f(2), Ej-f(3)) atingindo o CI50 nas concentrações de 95,54 μg/ml, 90,8, μg/ml e 26,91 μg/ml, respectivamente. O composto Ej-f(3) também apresentou atividade citotóxica de menor na concentração de 33,3 μg/ml. As amostras do fruto verde Ej-fv(1), Ej-fv(2), Ej-fv(3), Ej-fv(4) e ...

Transplante de medula óssea para suporte de células tronco hematopoiéticas em cães acometidos por linfoma

Lymphoma represents the most prevalent hematopoietic malignancy in small animal medicine. It is highly responsible to chemotherapy and therefore several protocols are used as therapeutic tools. For that reason, the bone marrow transplantation, enshrined in human medicine through initial trial in canine patients, has increasingly become the focus of studies in order to make it a reality also in veterinary medicine. First, the treatment with the chosen chemotherapy protocol is made. As complete remission of lymphoma is observed, it must be initiated the bone marrow harvesting. The obtained material is subjected to the processes of erythrocyte depletion, plasma depletion, cryoprotectants addition, total nuclear cells counting, hematopoietic progenitor quantification, analysis of cell viability and freezing. Following that, with radiotherapy or application of cyclophosphamide, the conditioning phase of the patient who is receiving the transplantation is carried out. The bags containing hematopoietic stem cells are then thawed and transplanted into the receptor organism. Support with hematopoietic stem cells allows the use of lethal doses of chemotherapy or radiotherapy and has been shown to considerably raise the disease remission time and survival rate of the canine patients

Ação de nanopartículas estruturadas de manganês sobre viabilidade de células prostáticas humanas tumorais

O estágio supervisionado no Laboratório de Engenharia Celular/Divisão Hemocentro - FMB teve por objetivo oportunizar ao aluno o exercício dos conhecimentos adquiridos em cultura de células, por meio de atuação prática em laboratório, bem como proporcionar o desenvolvimento de habilidades e competências pessoais e profissionais. A presente monografia descreve o tratamento de nanopartículas estruturadas de manganês em culturas de células humanas tumorais prostáticas após 24 e 48 horas, buscando identificar, de uma forma bem simples, possíveis propriedades antitumorais destas nanopartículas, através de análises de viabilidade celular por coloração de Azul de Tripan

Indução de morte celular por apoptose decorrente da irradiação com Raios-X: um ensaio com células mamárias humanas tumorais

Apoptosis is a form of programmed cell death selectively removes abnormal cells, and thus contributes to maintaining the balance of the dynamics of cell reproduction. Therefore the verification of the occurrence of apoptotic cell death after a pathological stimulus is crucial for the analysis of the maintenance of normal cell cycle of a given tissue or organ. In this experiment were used cells lines human mammary tumor MDAMB231, T47, MCF7, which were irradiated with X-rays at a dose of 5 Gy in a time interval of 15 seconds, and filtration of 1mm aluminum. Samples containing the cells were grown in a specific culture medium, containing fetal bovine serum and growth factor, and two samples were prepared with each of the cell lines, one to be irradiated, and another that has not been irradiated, which denoted by negative control of the irradiation. The primary goal of the experiment was to verify and compare the rates of apoptosis in each cell lines, in which were irradiated and that were not irradiated, using flow cytometry as a method for detecting apoptotic cell death in together with specific markers annexin V and propidium iodide. Data from the readings made by flow cytometry were analyzed and interpreted using the software WinMDI statistical graph. By comparing the indices relating to the readings of positive and negative for specific markers of apoptosis, based on differences in the statistical data presented lectures regarding the cellular irradiated and not irradiated, collude cells in question once... (Complete abstract click electronic access below)

Avaliação do efeito citotóxico da nitensidina A em células de glioblastoma multiforme e células não tumorais

Astrocitomas difusos são o tipo de tumor cerebral primario mais comum em adultos. O glioblastoma multiforme (GBM) é o astrocitoma mais frequente e letal. Pacientes diagnosticados com GBM geralmente morrem em aproximadamente 14 meses apesar do tratamento normalmente adotado. O tratamento consiste em remoção cirúrgica do tumor, radioterapia e quimioterapia com o agente alquilante temozolomida (TMZ). Entretanto, devido a elevada resistência desse tumor à radioterapia e quimioterapia, na maioria dos casos ocorre recidiva do tumor algumas semanas após a cirurgia. Baseado nesse prognóstico pobre e na elevada resistência das células de GBM à quimioterapia, a busca por novos fármacos a fim de aumentar as chances de sobrevivência e a qualidade de vida dos pacientes, é de extrema importância. Nitensidina A é um alcaloide guanidínico isolado da planta típica do cerrado brasileiro Pterogyne nitens, que demonstrou notável efeito citotóxico em células de câncer cervical. A fim de analisar o potencial da nitensidina A como antineoplásico foram realizados ensaios de citotoxicidade desta substância e da TMZ. Os resultados mostraram que a nitensidina A apresenta efeito citotóxico em concentração muito inferior à TMZ. Os resultados também demonstram que dentre as células analisadas, a RO é a célula não tumoral mais resistente a ambas as substâncias e, dentre as células tumorais, a célula mais sensível e a mais resistente são, respectivamente, U87MG e U343MG. Estes resultados indicam que a nitensidina A tem um potencial terapêutico promissor para este tipo tumoral. Experimentos adicionais estão em andamento para investigar esta hipótese