Treatment of experimental periodontal disease with antimicrobial photodynamic therapy in nicotine-modified rats

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Staining methods applied to glycol methacrylate embedded tissue sections

The use of glycol methacrylate (GMA) avoids some technical artifacts, which are usually observed in paraffin-embedded sections, providing good morphological resolution. on the other hand, weak staining have been mentioned during the use of different methods in plastic sections. In the present study, changes in the histological staining procedures have been assayed during the use of staining and histochemical methods in different GMA-embedded tissues.Samples of tongue, submandibular and sublingual glands, cartilage, portions of respiratory tract and nervous ganglion were fixed in 4% formaldehyde and embedded in glycol methacrylate. The sections of tongue and nervous ganglion were stained by H&E. Picrosirius, Toluidine Blue and Sudan Black B methods were applied, respectively, for identification of collagen fibers in submandibular gland, sulfated glycosaminoglycans in cartilage (metachromasia) and myelin lipids in nervous ganglion. Periodic Acid-Schiff (PAS) method was used for detection of glycoconjugates in submandibular gland and cartilage while AB/PAS combined methods were applied for detection of mucins in the respiratory tract. In addition, a combination of Alcian Blue (AB) and Picrosirius methods was also assayed in the sublingual gland sections.The GMA-embedded tissue sections showed an optimal morphological integrity and were favorable to the staining methods employed in the present study. In the sections of tongue and nervous ganglion, a good contrast of basophilic and acidophilic structures was obtained by H&E. An intense eosinophilia was observed either in the striated muscle fibers or in the myelin sheaths in which the lipids were preserved and revealed by Sudan Black B. In the cartilage matrix, a strong metachromasia was revealed by Toluidine Blue in the negatively-charged glycosaminoglycans. In the chondrocytes, glycogen granules were intensely positive to PAS method. Extracellular glycoproteins were also PAS positive in the basal membrane and in the region occupied by the lamina externa and reticular fibers surrounding each smooth muscle cells of the blood vessels. In the epithelial cells of the respiratory tract, acid and neutral mucins were histochemically detected by AB and PAS methods, respectively. Moreover, granules containing acid and neutral mucins were revealed in purple by AB and PAS concomitantly. In the sublingual gland sections, a distinct affinity of acid mucins by AB (in turquoise-blue) and collagen fibers by Picrosirius (in red) was obtained when these methods were combined. Although some routine dyes used in paraffin sections have showed a weak stain in historesin sections, our results showed that different dyes could be applied in GMA sections if modified staining procedures were assayed. Therefore, appropriate staining contrast and, thus, detection of one or different substances in a same section can be acquired in association to the good morphological resolution provided by GMA. (C) 2003 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Quantification of fibrosis and mast cells in the tissue response of endodontic sealer irradiated by low-level laser therapy

Low-level laser therapy (LLLT) accelerates tissue repair. Mast cells induce the proliferation of fibroblasts and the development of local fibrosis. The objective of this study was to quantify fibrosis rate and mast cells in connective tissue after endodontic sealer zinc oxide and eugenol (ZOE) was implanted and submitted to LLLT, immediately after implant and again 24 h later. Sixty mice were distributed into three groups: GI, GII, and GIII (n = 20). In GI, the tubes filled with Endofill were implanted in the animals and were not irradiated with LLLT. In GII, the tubes containing Endofill were implanted in the animals and then irradiated with red LLLT (InGaAIP) 685-nm wavelength, D=72 J/Cm(2), E = 2 J, T=58 s, P=35 mW, and in GIII, the tubes with Endofill were implanted and irradiated with infrared LLLT (AsGaAl) 830-nm wavelength, D=70 J/Cm(2), E = 2 J, T=40 s, P=50 mW. After 7 days and 30 days, the animals were killed. A series of 6-mu m-thick sections were obtained and stained with Toluidine Blue and Picrosirius and analyzed under a standard light microscope using a polarized light filter for the quantification of fibrosis. The statistics were qualitative and quantitative with a significance of 5%. The irradiation with LLLT did not offer improvement in the fibrosis rate, however, it provided a significant decrease in the concentration of independent mast cells for the period studied.

Mast cells and MMP-9 in the lamina propria during eruption of rat molars: quantitative and immunohistochemical evaluation

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Mast Cells and Ethanol Consumption: Interactions in the Prostate, Epididymis and Testis of UChB Rats

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Ovarian structure and hormonal status of the UChA and UChB adult rats in response to ethanol

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Cortical diversity in three species groups of Parmotrema sensu lato (Parmeliaceae, lichenized Ascomycota)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Evaluation of different protocols for anatomical studies in Parmeliaceae (lichenized Ascomycota)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Diferenciação entre Egeria densa e Egeria najas pelos caracteres anatômicos foliares

Dentre as plantas daninhas aquáticas imersas de maior importância nos reservatórios de usinas hidrelétricas e em represas de pequeno porte no Brasil, destacam-se as espécies Egeria densa e Egeria najas, cuja identificação pode ser difícil na fase vegetativa. O objetivo deste trabalho foi diferenciar cinco acessos de E. densa e três de E. najas, coletados nos reservatórios de Jupiá, Salto Grande, Três Irmãos, Promissão, Nova Avanhandava e Ibitinga, do complexo da Companhia Energética de São Paulo (CESP) do Estado de São Paulo, quanto às características anatômicas descritivas e quantitativas do limbo foliar, procurando-se obter melhor entendimento sobre as relações dessas estruturas anatômicas com a penetração e translocação de herbicidas, além de auxiliar na identificação de acessos suscetíveis e resistentes a determinado produto químico. Amostras do terço médio do limbo foram fixadas em FAA 50, cortadas transversalmente em micrótomo rotatório com 8 mm de espessura e coradas com azul-de-toluidina. Foi analisada a estrutura foliar e foram quantificados os caracteres anatômicos da nervura central (% epiderme das faces adaxial e abaxial, % feixe vascular e % parênquima) e da região situada entre a nervura e o bordo do limbo (% epiderme das faces adaxial e abaxial e espessura da folha). Os dados das variáveis quantitativas foram submetidos aos testes estatísticos multivariados de Análise de Agrupamento e Análise de Componentes Principais. Houve formação de três grupos principais: o primeiro foi constituído pelos três acessos de E. najas; o segundo, por quatro acessos de E. densa; e o terceiro, por apenas um acesso de E. densa. O caráter que mais contribuiu para a diferenciação entre os acessos foi a % feixe vascular da nervura central, seguido da % epiderme da face abaxial da nervura central e % epiderme das faces adaxial e abaxial da região entre a nervura e o bordo foliar. Concluiu-se que a utilização de caracteres anatômicos quantitativos permitiu auxiliar na diferenciação dos acessos e das espécies estudadas; entretanto, devem ser incrementados os estudos relacionando a estrutura anatômica com a resistência e suscetibilidade aos herbicidas.

Relação entre a estrutura foliar de feijoeiro e a pré-infecção por Glomerella cingulata f.sp. phaseoli

Os objetivos deste trabalho foram mensurar a área da nervura secundária e quantificar o número de tricomas da superfície foliar de cultivares de feijoeiro suscetível (Carioca), moderadamente resistente (Pérola) e resistente (IAPAR-81) à antracnose, e observar as relações entre tais características com o estágio pré-infeccional. Para mensurar a área da nervura secundária, fragmentos foliares foram amostrados, fixados em FAA 50, conservados em álcool 70%, infiltrados em resina glicol-metacrilato, cortados transversalmente e corados com azul de toluidina. Os tricomas foram quantificados em impressões epidérmicas em microscópio de projeção. Na análise pré-infeccional, o material foi fixado em glutaraldeído 2,5% e processado para o estudo ao microscópio eletrônico de varredura. A cultivar resistente apresentou menor área de nervura secundária e maior pilosidade que a cultivar moderadamente resistente e a suscetível. Na cultivar resistente, por causa da menor área de nervura e maior pilosidade, o patógeno permaneceu sobre a nervura e envolvido com o tricoma. Na cultivar suscetível, com maior área de nervura e menor pilosidade, foram observadas necrose e estruturas fúngicas na superfície foliar. Há relação entre estas características foliares e a resistência à antracnose durante o estágio pré-infeccional do patógeno.

Diferenciação de espécies daninhas aquáticas pela análise multivariada de caracteres estruturais foliares

Algumas espécies de plantas aquáticas têm-se tornado problemáticas em reservatórios hidrelétricos no Brasil, devido a sua grande capacidade de reprodução. O objetivo destes trabalho foi diferenciar Brachiaria mutica, Brachiaria subquadripara, Panicum repens, Eichhornia crassipes, Heteranthera reniformis, Typha ubulata e Enhydra anagallis, utilizando-se 19 caracteres estruturais quantitativos do limbo foliar, que se relacionassem com a penetração e translocação de herbicidas. Amostras do terço médio do limbo foram fixadas em FAA 50, cortadas transversalmente em micrótomo com 8 mm de espessura e coradas com azul-de-toluidina. Foram quantificados (%) os seguintes caracteres estruturais da nervura central (NC) e da região internervural (IN): epidermes adaxial e abaxial, feixe vascular, bainha do feixe vascular, esclerênquima, parênquima e lacunas do aerênquima, além da espessura da folha, do número de estômatos e do número de tricomas nas faces adaxial e abaxial. Os 19 caracteres estruturais foram submetidos à Análise de Agrupamento e Análise de Componentes Principais. Houve a formação de três grupos principais: grupo 1 B. mutica, B. subquadripara e P. repens (Poaceae); grupo 2 E. crassipes e H. reniformis (Pontederiaceae) e E. anagallis (Asteraceae); e grupo 3 apenas T. subulata (Typhaceae). Os caracteres com maior poder discriminatório foram: porcentagem de epiderme adaxial (IN); porcentagem de epiderme abaxial; feixe vascular; bainha do feixe vascular; esclerênquima e lacunas do aerênquima (NC e IN); espessura da folha e número de estômatos das faces adaxial e abaxial. Concluiu-se que os caracteres estruturais quantitativos permitiram diferenciar essas espécies daninhas aquáticas em fase vegetativa.

Histochemical technique for the detection of chloride cells in fish

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Morphological alteration of peritoneal mast cells and macrophages in the mouse peritoneal cavity during the early phases of an allergic inflammatory reaction

We investigated the presence of mast cell granules in macrophages following an in vivo model of an allergic reaction. Injection of ovalbumin (100 mug) into the peritoneal cavity of sensitised mice produced a rapid (within 2 h) influx of neutrophils followed by a slower (after >4 h) eosinophil migration. Ovalbumin treatment induced a high incidence (similar to 50%) of mast cell degranulation compared to control phosphated-buffered saline-treated mice. The majority (similar to 90%) of peritoneal macrophages contained mast cell granules as early as 2 It post-ovalbumin, with lower values at later time-points, as determined by staining with Toluidine blue and Berberine sulphate. This was confirmed by electron microscopy which enabled us to identify the complex mast cell granule sub-structural components in macrophage phagosomes. In conclusion, we used histochemical and ultrastructural analyses to show that mast cell granules become internalised with macrophages during the early stages of an experimental allergic reaction. (C) 2001 Academic Press.

Cytochemical characterization of Triatoma infestans and Panstrongylus megistus salivary gland cells (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae)

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Study of the nucleolar cycle and ribosomal RNA distribution during meiosis in triatomines (Triatominae, Heteroptera)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)