Mechanism of infection and colonization of Rhipicephalus sanguineus eggs by Mertarhizium anisopliae as revealed by scanning eletron microscopy and histopathology

O presente trabalho teve como objetivo verificar a forma de penetração do fungo Metarhizium anisopliae em ovos do carrapato Rhipicephalus sanguineus, assim como as lesões infringidas no interior do ovo. A aderência e penetração do fungo foram estudadas por meio da microscopia eletrônica de varredura e a ação do fungo nos tecidos internos avaliada em secções histológicas convencionais. Para observação destes eventos, realizaram-se infecções experimentais em 11 grupos de ovos do R. sanguineus contendo 25 mg cada. Os ovos foram banhados durante 3 minutos, sob agitação manual, em suspensão com concentração de 10(8) conídios/mL. Nos grupos controle o banho foi realizado apenas no veículo da suspensão. Os ovos foram processados para análise histopatológica e microscopia eletrônica de varredura nos seguintes tempos após a infecção: 1 e 18h, e um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete, nove e onze dias. Observou-se grande germinação de conídios em 67% dos ovos 18h após a inoculação e o fungo penetrou em 92,6% dos ovos 5 dias após a infecção. A extrusão do patógeno ocorreu em 87% dos ovos 7 dias após a infecção, chegando a 100% no 9º dia. Nas análises histopatológicas não foram observadas lesões dignas de nota, porem deve-se ressaltar que houve significativa redução (53,9%) na eclosão a partir dos ovos infectados.

Germination of Albizia hassleri seeds at different temperatures, under laboratory conditions

The objective of this study was to analyze the germination of seeds of Albizia hassleri under different temperatures. A completely random design arranged as a split plot for temperatures regimes, with 11 seed lots and four replications of 15 seeds was used. The plot was represented by the various lots and the sub plots for different temperatures. The means were compared by Scott-Knott test at 5% probability. The temperatures used were: a) constant: 20, 25 and 30 degrees C, and b) alternating: 20-30 and 25-35 degrees C. For all 11 seed lots the mean germination was 90%, speed germination index (IVG) was 5.059, fresh matter of seedlings (MMF) was 0.0628 g and dry matter (MMS) 0.0499 g. The variation coefficient (CV) between plots ranged from 8.48% for germination to 51.71% for dry matter of seedlings and sub plot of 6.77% to 60.45% for germination and MMS. These high values of CV, tested for MMS and MMF, indicate low repeatability of results within each treatment. In general, the IVG obtained at temperatures of 20 and 25 degrees C was lower than those in temperatures of 30, 20-30 and 25-35 degrees C. The best temperature for IVG was the alternating 25-35 degrees C and constant 30 degrees C. The germination test can be conducted at 30, 20-30 and 25-35 degrees C for 19 days.

Feeding substrates to black coconut bunch weevil, Homalinotus coriaceus (Gyllenhal) (Coleoptera: Curculionidae), rearing in laboratory

A broca do cacho do coqueiro, Homalinotus coriaceus (Gyllenhal), é uma praga limitante da produção de coco no Brasil, sendo que tanto as larvas como os adultos provocam a queda das flores femininas e dos frutos imaturos, pela interceptação do fluxo de seiva ou pela alimentação direta nas estruturas reprodutivas. em virtude da escassez de informações sobre sua biologia, realizou-se esse trabalho com o objetivo de desenvolver uma metodologia mais adequada para a criação da praga em laboratório. Foram utilizados os parâmetros biológicos para avaliação e comparação dos sistemas de criação estudados.Toletes de cana-de-açúcar foram utilizados como substrato para alimentação dos adultos coletados no campo e obtenção dos ovos. As larvas foram criadas em três substratos alimentares no Laboratório de Entomologia da Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA)-CPATC (Centro de Pesquisa Agropecuária dos Tabuleiros Costeiros), em Aracaju, SE. Os substratos alimentares estudados foram: o mesocarpo do coco, dieta para criação da broca dos citros e dieta para criação da broca do olho do coqueiro, sendo esta a que proporcionou o melhor desenvolvimento larval num menor tempo, com boa viabilidade, maior facilidade no preparo e manutenção.

New experimental tools for bioassays with whitefly in laboratory

O objetivo deste trabalho foi desenvolver um kit experimental para avaliações de repelência, deterrência à oviposição e atividade inseticida a adultos de mosca-branca, Bemisia tabaci biótipo B. O kit, constituído de arenas e nebulizador, foi eficaz para realização dos bioensaios, e a aplicação de extratos aquosos com o inalador foi adequada. As técnicas são simples, baratas e podem contribuir para as pesquisas com este inseto.

Contribution to the laboratory diagnosis of human cryptosporidiosis

A criptosporidiose humana é uma infecção causada pelo Cryptosporidium sp, um protozoário coccídio de patogenicidade emergente e responsável por severa e prostrante diarréia aquosa em humanos, principalmente em indivíduos imunodeprimidos. O diagnóstico, feito através da utilização de esfregaços de fezes submetidos a técnicas de concentração e coloração específica pela fucsina-carbólica tem oferecido bons resultados em nosso laboratório. Tendo em vista o longo tempo despendido para a observação dos esfregaços considerando-se a pequenez das formas e o contraste da coloração, realizamos modificações no procedimento técnico da coloração ácido-resistente que resultaram em sensível melhoria das preparações: a fucsina-carbólica passou a ser deixada sobre o esfregaço por período de 3 minutos (LENNETTE et al., 1985) e procedeu-se a substituição da solução de álcool-ácido sulfúrico a 5% (HENRIKSEN & POHLENZ, 1981) por solução de ácido clorídrico a 0,5% em álcool etílico 70%, por cerca de 2 minutos (contribuição original). Estas alterações promoveram melhor remoção do excesso de fucsina-carbólica, aumentando a eficiência da etapa de descoloração e consequentemente otimizando o contraste do processo de coloração. Nestas condições, as lâminas examinadas em microscópio óptico em aumentos de 250x e 1000x tiveram a visualização dos oocistos do protozoário facilitada, sendo os mesmos observados em contraste destacado com pigmentação intensa de cor rosa-avermelhada contra coloração de fundo azulada. Vale destacar que estas modificações oferecem vantagens de rápido processamento do material e facilidade de visualização do protozoário, diminuindo o tempo de microscopia, tornando a análise das lâminas mais rápida e menos cansativa, agilizando o diagnóstico.

Dispersion capacity of Triatoma sherlocki, Triatoma juazeirensis and laboratory-bred hybrids

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Urinary Mutagenicity in Chemical Laboratory Workers Exposed to Solvents

Solvents represent an important group of environmental pollutants to which people are exposed daily in the workplace. The physico chemical properties of solvents may result in disturbances to cellular structures, including damage to DNA. However, the effects of mixtures of solvents are not well known. Mutations caused by environmental agents are related to cancer development and other degenerative diseases. The work in a research laboratory that uses several types of solvents is equally predisposed to these hazards. In this study, we evaluated the mutagenicity of urine from 29 subjects exposed occupationally to solvents in a chemistry research laboratory and 29 subjects without occupational exposure (controls). Urine samples were collected in polyethylene containers at the end of the work shift. For the concentration and extraction of urine samples the XAD-2 resin was used with acetone as an eluting agent. Several strains of Salmonella typhimurium (TA100, TA98, TA97a, TA1535, YG1024) should be used to assess mutagenic susceptibilities among workers exposed to organic solvents. Different doses of extract (1.5; 3.0; 6.0 and 12.0 m/ equivalents of urine per plate) were tested on S. typhimurium strains TA100 and YG 1024, with and without metabolic activation. The mutagenic activity, measured in Salmonella typhimurium YGI1024 with S9 mix, was significantly greater in urine from workers than from controls (p <= 0.05). These results indicate the relevance of using biomarkers to assess the risk of occupational exposure to organic solvents.

Improved laboratory safety by decontamination of unstained sputum smears for acid-fast microscopy

Tubercle bacilli may survive in unstained heat-fixed sputum smears and may be an infection risk to laboratory staff. We compared the effectiveness of 1% and 5% sodium hypochlorite, 5% phenol, 2% glutaraldehyde, and 3.7% formalin in killing Mycobacterium tuberculosis present in smears prepared from 51 sputum samples. The smears were decontaminated by the tube and slide techniques. Phenol at 5%, glutaraldehyde at 2%, and buffered formalin at 3.7% for 1 min (tube technique) or for 10 min (slide technique) were effective in decontaminating sputum smears and preserved cell morphology and quantitative acid-fast microscopy results.

Frequency of Blastocystis hominis and other intestinal parasites in stool samples examined at the Parasitology Laboratory of the School of Pharmaceutical Sciences at the São Paulo State University, Araraquara

Blastocystis hominis é um protozoário, causador de infecção intestinal denominada blastocistose humana, cujo diagnóstico é realizado pelo exame coproparasitológico e por meio de técnicas de coloração permanente. Este estudo foi desenvolvido para avaliar a freqüência da infecção por Blastocystis hominis em habitantes da região de Araraquara/SP, bem como comparar diferentes métodos para a pesquisa desse protozoário em amostras de fezes. Foram estudadas 503 amostras de fezes submetidas ao exame direto a fresco, às técnicas de Faust e cols, Lutz e de Rugai e cols, além das colorações pela hematoxilina férrica, tricrômio e de Kinyoun modificada. Entre as 503 amostras examinadas, 174 (34,6%) apresentaram-se positivas para a presença de parasitas intestinais. O protozoário e o helminto mais freqüentes foram Entamoeba coli (14,6%) e Strongyloides stercoralis (6,7%), respectivamente. Blastocystis hominis foi observado em 23 (4,6%) amostras fecais com consistência predominantemente pastosa, não caracterizando quadro diarréico. Apesar da baixa freqüência de Blastocystis hominis encontrada na região de Araraquara, comparativamente a outras regiões brasileiras, é importante a realização do diagnóstico laboratorial desse protozoário. O encontro de Blastocystis hominis em material fecal é indicativo de contaminação de alimentos e água de consumo, desde que se admita a rota de transmissão oral-fecal desse parasita, o que implica na orientação da população sobre as medidas de saneamento básico e higiene como meio para se controlar problemas de saúde ocasionados pelos enteroparasitas.

Laboratory evaluation of Amazon forest biomass burning emissions

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Standardization of an experimental model of parabiotic isolated heart in rabbits

O objetivo foi a padronização de modelo experimental de coração isolado parabiótico em coelhos, testando sua estabilidade e durabilidade, para fins de pesquisa cardiovascular. Foram utilizados 66 coelhos raça Norfolk-2000 divididos em grupo doador do coração isolado e animais suporte, totalizando 33 preparações. Mediante auxilio de bombas peristálticas estabeleceu-se suporte circulatório para o coração isolado mantendo-se fluxo constante(16ml/min.). Um balão intraventricular foi inserido no ventrículo esquerdo, sendo ajustado para gerar pressão diastólica de ± 10mmHg. A freqüência foi fixada em 120 batimentos por minuto mediante o uso de marcapasso. Foram avaliadas variáveis hemodinâmicas, laboratoriais e anatomopatológicas. Das 33 preparações, 13 foram excluídas mediante critérios pré-estabelecidos. Das 20 restantes, 10 cumpriram o tempo máximo do protocolo(180 minutos). Com relação ao animal suporte houve deterioração hemodinâmica progressiva c/ queda da pressão arterial média(89,30±6,09mmHg->47,50±6,35mmHg). Com relação ao corações isolado, das 10 preparações que cumpriram os 180 minutos de protocolo, houve estabilidade hemodinâmica. As variáveis laboratoriais mostraram queda progressiva do sódio, potássio e hemoglobina, sendo compatível com hemodiluição. O exame anatomopatológico mostrou espaçamento maior entre fibras, compatível com edema. O presente modelo mostrou estabilidade e atividade de 100% das preparações em 60 minutos, havendo perdas progressivas chegando a 50% das preparações em atividade em 180 minutos. O presente modelo, dentro das limitações estabelecidas é viável para pesquisas cardiovasculares.

Clinical and laboratory evaluation of hyperlipemic and hypothyroid patients

OBJECTIVE: To determine the frequency of hypothyroidism in a sample of hyperlipemic patients and evaluate clinical and laboratory factors indicative of thyropathy among them. METHODS: Fifty-one hyperlipemic patients, grouped according to an earlier or recent diagnosis of their thyroid function into euthyroid and hypothyroid, were evaluated with clinical and laboratory examinations of blood levels of free T4 and TSH (by radioimmunoassay). Patients were on average 46.8±11.7 years old, predominantly of the female sex (62.5%); 31% had a previous diagnosis of hypothyroidism and were under treatment with thyroxin. RESULTS: Fourteen three percent of patients analyzed had hypothyroidism, which had not been detected before. Differentiating attributes of the groups analyzed were: a predominance of females among the hypothyroid patients and a higher HDL serum concentration among those recently diagnosed. CONCLUSION: In the present study, new cases of hypothyroidism in hyperlipemic patients were a frequent occurrence, yet few clinical and laboratory data except tests evaluating free T4 and TSH in the blood indicated which patients had thyroid dysfunction.

Genotoxicity Evaluation in Severe or Mild Diabetic Pregnancy in Laboratory Animals

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Comparison between qualitative and semiquantitative catheter-tip cultures: laboratory diagnosis of catheter-related infection in newborns

Este estudo prospectivo avaliou os métodos semiquantitativo e qualitativo de cultura de cateter para o diagnóstico de infecção relacionada a cateter (IRC) em recém-nascidos (RN). Foram incluídas pontas de cateteres provenientes de recém-nascidos internados na Unidade Neonatal do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP. Foram utilizadas as técnicas semiquantitativa e qualitativa de cultura de cateter. Para o diagnóstico de IRC, os microrganismos isolados das culturas de cateteres e de hemoculturas periféricas foram identificados e submetidos ao teste de sensibilidade a antimicrobianos. O padrão ouro correspondeu ao diagnóstico de certeza de IRC, com o isolamento do mesmo microrganismo (espécie e perfil de sensibilidade a antimicrobianos) isolado em hemocultura periférica. Foram estudados 85 cateteres provenientes de 63 RN. A cultura semiquantitativa, embora tenha apresentado menor sensibilidade (90%), apresentou uma maior especificidade (71%) em comparação à sensibilidade de 100% e especificidade de 60% encontradas na cultura qualitativa. Através da identificação dos microrganismos obtidos nas culturas de cateteres, observou-se uma predominância de espécies de Estafilococos coagulase-negativa (ECN). A espécie Staphylococcus epidermidis foi a prevalente (77,5%) nos cateteres com culturas semiquantitativas positivas. Dos 11 episódios de IRC diagnosticados, 8 (72,7%) foram associados a espécies de ECN, dos quais 6 eram da espécie S. epidermidis. Também foram detectados dois casos de IRC por S. aureus e um caso por Candida parapsilosis. O método de cultura semiquantitativo cateter apresentou vantagens para o diagnóstico de IRC em RN quando comparado com o método qualitativo tradicional.