Perfil em SDS-PAGE das proteínas do plasma seminal e sua relação com a congelabilidade do sêmen de touros doadores da raça gir

Foram utilizados dez animais doadores de sêmen em nível de Central de Inseminação Artificial, da raça Gir, divididos em dois grupos, de acordo com o grau de congelabilidade do sêmen de cada animal. Os animais com sêmen de alta congelabilidade foram aqueles cuja porcentagem de ejaculados viáveis pós-descongelação foi superior a 80%. O grupo de baixa congelabilidade tinha animais com porcentagem menor que 50% de ejaculados viáveis pós-descongelação. Os critérios de avaliação da viabilidade do sêmen e seleção dos animais foram definidos pelo controle de qualidade do Departamento de Produção da Central de Inseminação Artificial. Foram feitas quatro coletas semanais consecutivas, sendo que obtiveram-se as amostras de plasma seminal por centrifugação a 1.500 g por 15 a 20 minutos a 4°C, momentos após a coleta do sêmen em vagina artificial. O plasma seminal foi dialisado em membrana de celulose, em tampão Tris-Glicina pH-7,4 por 24 horas a 4°C, em agitação lenta e constante. As amostras foram padronizadas em 1,0 mg/ml de proteína total, por diluição em tampão Tris-HCl 62mM pH-6,2 mais 20% de glicerol e 4% de SDS. Através de eletroforese do tipo SDS-PAGE, foram feitas as corridas em gel a 13%. A corrida foi feita com a constante de 25 mA, por um período de 5 horas. A coloração do gel foi feita por Coomassie Brilliant Blue. Pelos resultados obtidos, verificou-se que existe uma banda no grupo de alta congelabilidade, cujo fragmento polipeptídico desta proteína tem Mr (mobilidade relativa) 20,3 e PM (peso molecular) aproximado de 61.800 Da. Esta banda não foi detectada nas amostras do grupo de baixa congelabilidade, o que sugere ser um possível marcador bioquímico quanto ao potencial de criopreservação do sêmen de bovinos.

Proteômica para investigar a congelabilidade do semen bovino

The present study was undertaken the protein composition in 2D-electrophoretic pattern (2DE) of the seminal plasma (SP) can interfere in the semen bull freezability, and if we can use that for predicting semen bull freezability. Samples were obtained of 20 bulls (different breeds) with a minimum of 3 years history semen production in commercial semen collection Center. All animals ranged between 2 - 7 years of age. The semen freezability was calculated by # of thawed and approved ejaculates / # of ejaculates submitted to cryopreservation (after semen evaluation and approved to submitted to freeze). The bulls were divided in 3 groups: HIGH (=>80% ejaculates approved); MEDIUM (>60% and <79% ejaculates approved); LOW (=<59% ejaculates approved); the pattern and criteria were the same used in the routine of the commercial semen Center. 68 gels were carried through by 2DE of SP samples indicated 225 detected spots with protein different amount (VION) comparing. Comparing bull ́s semen freezability and VION of each spot found difference among 2 spots from High and Low, even considering just spots with % of detection frequency bigger than 75%. The taurine bulls demonstrated more homogeneous profile when comparing with zebu bulls, considering number and frequency of appearance of spots. The results showed that proteomics can be a useful tool to predict the semen freezability, but we ́ll need to study better the interactions between sperm membrane, seminal plasma and extender to comprehend better which proteome phenotype interfere positive or negatively in the semen freezability.

Effects of Pentoxifylline on Equine Epididymal Sperm

This study evaluated whether pentoxifylline (PTX) present in the flushing extender influenced the function of equine epididymal spermatozoa after recovery and after thawing. For this experiment, 58 testicles from 29 Brazilian Jumping Horses were used. Cauda epididymides of each stallion were separated and flushed with a skim milk extender, with or without 7.18 mM PTX and then subjected to the freezing process. Samples flushed with the extender containing PTX showed a significant increase in total motility, progressive motility, straight line velocity, curvilinear velocity, and percentage of rapid sperm immediately after the recovery of epididymal sperm and after 15 minutes of incubation at 37°C (P < .05). However, the presence of PTX in the flushing extender did not affect the post-thaw motility parameters or plasma membrane integrity (P > .05). The results of this study showed that the PTX present in the flushing extender improved motility parameters of recently recovered epididymal sperm and had no deleterious effects on plasma membrane integrity and freezability of equine epididymal sperm. © 2013 Elsevier Inc. All rights reserved.

Efeito do meio e da dose inseminação sobre a congelabilidade e fertilidade de espermatozóides recuperados da cauda do epidídimo de garanhões

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Estudo de diferentes sistemas e curvas de congelação na eficiência da congelabilidade e fertilidade de sêmen equino

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Efeito do meio diluidor e da dose inseminante sobre a congebilidade e fertilidade do sêmen bovino utilizado em programas de inseminação artificial em tempo-fixo(LATF)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Inovações metodológicas na congelação de sêmen bovino

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeito da substituição da gema de ovo pela lecitina de soja na criopreservação de sêmen equino

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FMVZ

Influência do sêmen homospérmico, heterospérmico e do plasma seminal heterólogo sobre os parâmetros espermáticos e produção de embriões bovinos in vitro

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FMVZ

Resistência omótica, congelabilidade e fertilidade do sêmen de garanhões frente a diferentes crioprotetores

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Criopreservação e fertilidade de espermatozoides do ejaculado e recuperados da cauda do epidídimo de garanhões subférteis

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FMVZ

Características físicas e morfológicas do sêmen de Bos taurus e Bos indicus antes e após a criopreservação

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV