Detecção de Cryptosporidium serpentis em amostras fecais de serpentes utilizando PCR em tempo real

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

The detection of Cryptosporidium serpentis in snake fecal samples by real-time PCR

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Diagnosis of gastric cryptosporidiosis in birds using a duplex real-time PCR assay

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Detection of Ehrlichia chaffeensis in Brazilian marsh deer (Blastocerus dichotomus)

Ehrlichia chaffeensis was detected for the first time in blood samples from Brazilian marsh deers (Blastocerus dichotomus) captured in the marshes of Parana River in Southeast Brazil in 1998. Seven EDTA-blood samples from deers were analyzed by PCR and nested PCR for presence of Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia ewingii, Ehrlichia canis, Neoriickettsia risticii, Anaplasma phagocytophilum and Anaplasma marginale. Three samples showed positive reactions for E. chaffeensis and Anaplasma marginale. None contained detectable A. phagocytophilum, E. ewingii, E. canis or Neorickettsia risticii DNA. In Brazil, the wild marsh deer may be a natural reservoir of the agents that cause human monocytotropic ehrlichiosis and ruminant erythrocytic anaplasmosis. (c) 2006 Elsevier B.V. All rights reserved.

Chlamydophila psittaci in free-living Blue-fronted Amazon parrots (Amazona aestiva) and Hyacinth macaws (Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul, Brazil

Chlamydophila psittaci (C. psittaci) infection was evaluated in 77 free-living nestlings of Blue-fronted Amazon parrots (Amazona aestiva) and Hyacinth macaws (Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul, Brazil. Tracheal and cloacal swab samples from 32 wild parrot and 45 macaw nestlings were submitted to semi-nested PCR, while serum samples were submitted to complement fixation test (CFT). Although all 32 Amazon parrot serum samples were negative by CFT, cloacal swabs from two birds were positive for Chlamydophila DNA by semi-nested PCR (6.3%); these positive birds were 32 and 45 days old. In macaws, tracheal and cloacal swabs were positive in 8.9% and 26.7% of the samples, respectively. Complement-fixing antibodies were detected in 4.8% of the macaw nestlings; macaw nestlings with positive findings were between 33 and 88 days old. These results indicate widespread dissemination of this pathogen in the two evaluated psittacine populations. No birds had clinical signs suggestive of chlamydiosis. To the best of our knowledge, this is the first report on C. psittaci in free-living Blue-fronted Amazon parrots and Hyacinth macaws in Brazil. (c) 2006 Elsevier B.V. All rights reserved.

Molecular diagnosis of Anaplasmataceae organisms in dogs with clinical and microscopical signs of ehrlichiosis

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Canine ehrlichiosis: clinical, hematological, serological and molecular aspects

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Serologic evidence of equine granulocytic anaplasmosis in horses from central West Brazil

A Erliquiose é uma doença zoonótica causada por bactérias gram-negativas e intracelulares obrigatórias. A Anaplasmose Granulocítica Equina - AGE (anteriormente denominada Erliquiose Granulocítica Equina, EGE) é uma enfermidade sazonal, normalmente auto-limitante em equinos. No Brasil, existem poucos relatos deste agente erliquial, bem como de seus vetores naturais. Atualmente, veterinários têm levantado a suspeita de casos de AGE em equinos com sinais clínicos sugestivos de erliquiose e não responsivos ao tratamento para a piroplasmose equina. O objetivo do presente estudo foi identificar equinos expostos a A. phagocytophilum por meio de técnicas sorológicas e moleculares. Vinte amostras de sangue e soro de equinos da região Centro-oeste do Brasil foram avaliados por meio do exame microscópico de capa leucocitária, ensaio imunoenzimático indireto (ELISA), reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e reação em cadeia da polimerase (nested PCR). Adicionalmente, o diagnóstico sorológico de Theileria equi pela RIFI e ELISA foram realizados, assim como o diagnóstico molecular pelo nPCR. Treze (65%) amostras de soro foram positivas para A. phagocytophilum pelo teste de ELISA, entretanto nenhum equino foi positivo pelo exame microscópico da capa leucocitária ou nPCR. Anticorpos IgG anti-T. equi foram detectados em 18 (90%) e 17 (85%) equinos pela RIFI e ELISA, respectivamente e o agente foi detectado em 9 (45%) animais pelo nPCR. Estes dados sugerem importante informação para o entendimento da ocorrência da AGE e piroplasmose equina no Centro-oeste do Brasil.

Molecular and serological detection of Theileria equi and Babesia caballi in donkeys (Equus asinus) in Brazil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Survey on Chlamydophila psittaci in captive ramphastids in São Paulo State, Brazil

Chlamydophila psittaci (C. psittaci) has been detected in 460 avian species, among them the most frequent are the Psittaciformes, Columbiformes, Anseriformes and raptors. In Brazil, the main avian species recognized as healthy carriers belong to the order Psittaciformes and Columbiformes, but very few studies have been done in other bird families. Reports of the occurrence of this disease in the clinical form are rare in the Ramphastids; consequently, they are not commonly evaluated for this agent. The present study reports the investigation of C. psittaci in 25 captive ramphastids from a zoological park in São Paulo State, Brazil. Swabs samples from the cloaca were submitted to semi-nested polymerase chain reaction (semi-nested PCR) for direct detection of the microorganism. Additionally, blood samples obtained from these birds were submitted to the Complement Fixation Test (CFT) for detection of antibodies anti-C. psittaci. The presence of C. psittaci was not detected in the cloacal swab samples tested by the PCR. Nevertheless, 16% (4/25) of the bird's sera were positive by the CFT. Among the species with positive results, there are the saffron toucanet (Pteroglossus bailloni) and black-necked-aracari (Pteroglossus aracari), two species with no descriptions of the survey of C. psittaci published in the literature. Intermittent elimination of C. psittaci is a feature of chronically infected birds; however the absence of a positive-antigen sample did not guarantee that the bird is Chlamydophila-free. The serological results obtained show that the ramphastids tested were previously exposed to the pathogen and developed immune response, but showed no clinical signs of the disease and didn't eliminate regularly the organism in their feces in the moment of the sample collection.

Occurrence of Theileria equi in horses raised in the Jaboticabal microregion, São Paulo State, Brazil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

First Identification of Culex flavivirus (Flaviviridae) in Brazil

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Cutaneous pythiosis in a dog from Brazil

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Microdissecção e captura a laser na investigação do gene TP53 em tecidos incluídos em parafina

INTRODUÇÃO: Microdissecção e captura a laser (MCL) é uma técnica de desenvolvimento recente que permite a coleta de células individuais ou pequeno conjunto de células para análise molecular. Atualmente, no Brasil, há raros microscópios para MCL, de modo que a divulgação dos procedimentos inerentes a essa técnica é oportuna para destacar seu amplo potencial para diagnóstico e investigação. OBJETIVO: Este trabalho descreve a padronização dos procedimentos de MCL e de extração de DNA de material fixado em formalina e incluído em parafina. MATERIAL E MÉTODOS: Foram estudados o éxon 8 do gene TP53 e o gene da ciclofilina em amostras de tecido normal e de neoplasias de fígado e rim provenientes de modelo de carcinogênese química induzida em rato. A extração do DNA foi comprovada por reação em cadeia da polimerase (nested-PCR). RESULTADOS: Foram padronizados os procedimentos de preparo dos cortes histológicos, de microdissecção e captura a laser e de obtenção de seqüências gênicas pela reação de nested-PCR para tecidos incluídos em parafina. Obtivemos amplificação de 48,3% das amostras para o éxon 8 do gene TP53 e 51,7% para o gene da ciclofilina. Considerando pelo menos um dos dois segmentos gênicos, foram amplificadas 79,3% das amostras. DISCUSSÃO E CONCLUSÃO: A extração de DNA de tecidos fixados em formalina e incluídos em parafina e a técnica de nested-PCR foram adequadamente padronizadas para produtos gênicos de interesse, obtidos de material coletado por MCL. Esses procedimentos podem ser úteis para a obtenção de seqüências de DNA de arquivos para análise molecular.

Incidence and transplacental transmission of Neospora caninum in primiparous females from Bos indicus slaughtered in Presidente Pradente, São Paulo, Brazil

To produce an epidemiological map of neosporosis in Brazil and identify the types of transmission of this disease, the present study evaluated the occurrence of Neospora caninum in Nelore cattle (Bos indicus) in Presidente Prudent, west region of São Paulo state; its vertical transmission; and the early stage in which fetuses are infected. To achieve this, serum samples from 518 slaughtered pregnant heifers and their fetuses were tested by ELISA technique and fetal brain tissues subjected to PCR. One hundred and three heifers (19.88%) had antibodies to N. caninum, as well as 38 (36.8%) of fetuses from 4 months of gestation. The conventional PCR failed to detect N. caninum DNA. These findings show that neosporosis occurs in the area studied and that it may be transmitted the transplacental route, althought N. caninum had not detected in brain tissue from non-aborted fetuses. The use of nested PCR it would be applied to increase the sensitivy of test.