Desenvolvimento e validação de método bioanalítico por difusão em ágar para determinação da potência do fenticonazol creme vaginal

O nitrato de fenticonazol é um derivado imidazólico de amplo espectro de ação contra patógenos dermatófitos, como Malassezia furfur e leveduras, a principal delas Candida albicans. É necessário que se possa garantir a qualidade dos medicamentos produzidos. O controle de qualidade é uma ferramenta que assegura a qualidade, eficácia e segurança desses produtos até o momento de sua utilização e faz-se necessário que métodos analíticos sejam desenvolvidos e validados para o doseamento desses fármacos. A grande importância dos métodos microbiológicos utilizados no controle de qualidade de fármacos com atividade antimicrobiana é demonstrar sua atividade biológica por meio de seu efeito inibitório no crescimento de micro-organismo. A diminuição da atividade antimicrobiana ou potência pode indicar alguma alteração sutil na molécula, que é pouco detectável em um método analítico físico-químico. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar o método microbiológico difusão em ágar para o produto nitrato de fenticonazol creme vaginal. O método de difusão em ágar foi desenvolvido utilizando meio de cultura ágar Sabouraud e cepa de Candida albicans ATCC 64548 como micro-organismo teste. Para o ensaio foi utilizado o delineamento 3 x 3, conforme preconiza a Farmacopeia Brasileira (2010). A validação do método proposto demonstrou linearidade entre os diâmetros dos halos de inibição e o logaritmo da concentração na faixa de 50,0 a 200,0 μg/mL. O método obteve resultados precisos e lineares com r2=1. A exatidão foi comprovada pelo intervalo de tolerância de 98,83%, dentro dos limites permitidos. O método foi validado de maneira satisfatória, podendo ser utilizado em análises do Controle de Qualidade deste fármaco.

Diagnóstico molecular da alteração mutagênica nt 230 (del4) no gene MDR1 em cães

P-glycoprotein is an adenosine triphosphate (ATP)-driven drug efflux carrier responsible for transport of xenobiotics and multiple classes of drugs, many usually use in veterinary medicine. Encoded by MDR1 gene, also referred to as ABCB1, located on chromosome 14, is expressed in many tissues with secretory or excretory functions, such as liver, kidney and intestine, where it limits drug absorption from the gut and promotes drug excretion into the bile and urine of their substrates. In 2001, a 4 base pair gene deletion mutation in the canine MDR1 gene was identified as MDR1-1▲, ABCB1-1▲, MDR1 MDR1 nt 230 (del4) and associated with an non-functional Pglycoprotein. The clinical correlation is the (hyper) sensitivity of certain dogs breeds, mostly collies, to a few classes of drugs such as anticancer drugs (doxorubicin, vincristine, vinblastine), immunosuppressants (cyclosporine), antiparasitic drugs (ivermectin, moxidectin), steroids hormones (aldosterone, cortisol, dexamethasone), antimicrobial agents (tetracycline, doxycycline, levofloxacin, ketoconazole, itraconazole), analgesics (morphine, methadone), antidiarrheals (loperamide), antiepileptic agents (phenothiazine), cardiac drugs (digoxin, diltiazem, verapamil, talinolol) and others. Dogs with homozygous MDR1 nt 230 (del4) MDR1 mutations (MDR1 - / -) have a higher predisposition to intoxication with substrates of P-gp than heterozygous (MDR1 + / -) and these are more likely than dogs homozygous nonmutant (MDR1 +/ +). After the identification of nt230 (del4) mutation, several molecular techniques have been developed for identification of mutant animals as a diagnostic method. The importance of molecular diagnosis is, after the identification of mutant animals, establish treatment protocols safe, exclude this animals from reproduction (genetic selection program) and investigating the history of adverse drugs reactions... (Complete abstract click electronic access below)

Redução bacteriana via terapia fotodinâmica

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Desenvolvimento e controle de qualidade físico e microbiológico de emulsão O/A contendo óleo essencial de Melaleuca alternifolia

Sabe-se que na atualidade, é grande a preocupação da comunidade científica mundial, em relação à resistência microbiana frente às substâncias convencionais, utilizadas indiscriminadamente, por isso, é crescente a motivação da pesquisa básica na bioprospecção de novas substâncias, que apresentem atividade antimicrobiana e antifúngica e que possam ser uma alternativa segura e eficaz contra esses microorganismos no tratamento das doenças causadas por eles. As dermatofitoses, por exemplo, são processos infecciosos de pele, pêlo e unhas que acometem muitas pessoas, de todas as faixas etárias, no mundo todo, provocando as chamadas tinhas ou tineas, denominadas corporis, pedis, cruris, capitis, unguium(onicomicose) e outras (dependendo o local do corpo onde estão), causadas pelo dermatófito filamentoso, Trichophyton rubrum. Estudos envolvendo este patógeno são cada vez mais importantes, devido ao aparecimento de linhagens resistentes aos medicamentos antifúngicos disponíveis no mercado, e ao comportamento invasivo deste agente em pacientes com o sistema imune comprometido. Porém, somente a descoberta de novas drogas não é suficiente, é preciso desenvolver produtos eficazes e seguros, que possam veicular essas substâncias sem causar prejuízo ao paciente. Sendo assim, a proposta desse trabalho é desenvolver uma emulsão A/O, contendo óleo essencial de Melaleuca alternifolia (TTO), verificar sua estabilidade preliminar e caracterizá-la realizando o estudo reológico da formulação, determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração fungicida mínima (CFM) do TTO e averiguar a atividade antifúngica in vitro da emulsão frente ao T. rubrum, agente patogênico ao qual se destina o uso do produto

Análise do tempo de ação de medicações intracanais sobre candida albicans, enterococcus faecalis, escherichia cole em canais radiculares

The purpose of this study was to evaluate in vitro the antimicrobial activity of intracanal medications against Candida albicans, Enterococcus faecalis, Escherichia coli present in root canals. It was used 24 single root human teeths, contaminated for 28 days and prepared with physiological saline solution as irrigation solution. The teeth were divided into 2 groups according to the intracanal medication used: 1) 2% gel chlorhexidine, 2) sterile and pyrogen free physiological saline solution. Samples were taken of the root canals immediately after instrumentation, 7 days after intracanal medication and 7 days after removal of intracanal medication. For all samples the antimicrobial activity was performed by plating method. All results were submitted to Mann-Whitney and Dunn's test with significance of 5%. There was significant reduction of microorganisms after instrumentation and the intracanal medication of 2% gel chlorhexidine completely eliminated C. albicans and E. coli, and significantly reduced E. faecalis. It was concluded that 2% gel chlorhexidine as intracanal medication for 7 days was effective on microorganisms

Avaliação in vitro da ação de substâncias químicas auxiliares, clorexidina e medicações intracanais sobre C. albicans, E. faecalis, E. coli e sua endotoxina em canais radiculares: [recurso eletrônico]

The purpose of this study was to evaluate the antimicrobial activity of chlorhexidine gel 2% as auxiliary chemical substance on the biomechanical preparation (BMP) and medication intracanal (ICM) on C. albicans, E. faecalis, E. coli and their endotoxin in root canals. We used 48 single-rooted human teeth divided into four groups according to dressing ICM: 1) Ca(OH)2 + pyrogen-free saline solution; 2) 2% chlorhexidine gel (CLX); 3) Ca(OH)2 + CLX, and; 4) pyrogen-free saline solution (control group). Were collected the contents of root canals to confirm the presence of microorganisms (confirmation), immediately after instrumentation (1st collection), after 7 days of the BMP (2nd collection), after 14 days of the action of ICM (3rd Collection) and 7 days after removal of the ICM (4 th collection). Were performed: the evaluation of antimicrobial activity and the content analysis of endotoxins for all sampling tests. The results were statistically analyzed using Kruskall-Wallis and Dunn tests with a significance of 5%. It was found that the CLX as auxiliary chemical substance has significantly reduced microorganisms confirmation collection when compared. In relation to the neutralization of endotoxin, it was found that the 1st and 2nd collections presented a decrease of 92.03% and 98.10% in mean percentage respectively, when compared to the confirmation collection. In the 3rd and 4th samplings, the Ca (OH)2 + CLX group showed the best results. It was concluded that the BMP and the ICM were able to eliminate the tested microrganisms, however, they were not able to completely eliminate endotoxins root canal

Caracterização fitoquímica e ensaios biológicos de Coleus blumei Benth

Coleus blumei Benth (Lamiaceae), popularly known in Brazil as heart-hurt or coleus-of-Java is an ornamental plant widely used due to the color of its leaves. Several species of the genus Coleus present compounds with antioxidant, antimicrobial and allopathic activities due to the presence of chemicals such coleonol, forskolin and rosmarinic acid. Therefore, this study aimed to carry out phytochemical study and biological tests to evaluate the antibacterial, antioxidant and allopathic activities of the 70% ethanol extract and its fractions ethyl acetate, dichloromethane and end aqueous fraction leaf of Coleus blumei Benth. The plant extract was prepared by turbolisis from the powder of dried leaves, as a solvent for extraction using 70% ethanol. The ethanol extract was fractionated with solvents dichloromethane and ethyl acetate. The phytochemical study identified the presence of saponins, free anthraquinones, flavonoids and anthocyanidins. In evaluating the antibacterial dichloromethane fraction showed activity against all microorganisms tested both in agar diffusion test and microdilution test. The 70% ethanol extract showed activity against the micro-organisms S. aureus and S. epidermidis in agar diffusion test and against all microorganisms tested in microdilution test. The ethyl acetate fraction showed activity against the micro-organism S. aureus in the agar diffusion test and against all microorganisms tested in microdilution test. The end aqueous fraction showed no activity against any micro-organism tested. In the test of evaluation activity allopathic dichloromethane fraction showed greater inhibition of seed germination and growth of tomato (Lycopersicon esculentum Mill), followed by 70% ethanolic extract, the ethyl acetate fraction and the end aqueous fraction. In testing the antioxidant activity with DPPH ethyl acetate fraction showed higher antioxidant activity followed... (Complete abstract click electronic access below)

Ensaios de mutação gênica reversa e teste do micronúcleo para avaliação da atividade mutagênica de Pouteria torta E Pouteria ramiflora

O Brasil é um país dotado de Biodiversidade incomparável da qual advém inúmeras plantas medicinais que são frequentemente utilizadas de acordo com conhecimento empírico da população em geral. Considerando a importância de investigar os efeitos farmacológicos e toxicológicos de espécies vegetais utilizadas com fins terapêuticos, foi objetivo do presente trabalho avaliar a atividade mutagênica dos extratos metanólicos e hexânicos de Pouteria ramiflora e Pouteria torta, pois seus dados farmacológicos descritos na literatura são bastante restritos, destacando-se as atividades antimicrobiana, citotóxica e imunomoduladora. Como ferramenta foram escolhidos os testes de Ames e do Micronúcleo, pois ambos são preconizados pela ANVISA em testes de toxicidade de fitoterápicos. No Teste de Ames foram utilizadas as linhagens TA100, TA98, TA97a e TA102 de Salmonella typhimurium em presença e ausência de metabolização e no ensaio do micronúcleo foi utilizado o sangue periférico de camundongos Swiss tratados in vivo. Os resultados constataram que os extratos de ambas as espécies provocaram desvios da normalidade, ou seja, o Teste de Ames detectou aumento no número de revertentes por placa e o Teste do micronúcleo mostrou aumento significativo no número de células micronucleadas. Esses resultados demonstraram claramente que as duas espécies de Pouteria estudadas apresentaram potencial mutagênico e, portanto, o uso popular dessas plantas deve ser feito com cautela

Diversidade genética em Staphylococcus aureus resistentes à oxacilina em isolados de pacientes pediátricos do Hospital das Clínicas de Botucatu

Staphylococcus aureus é um patógeno ubíquo capaz de causar uma variedade de infecções em humanos. A resistência desse microrganismo a antibióticos como oxacilina e meticilina é um problema sério, de crescimento significativo para a terapêutica antimicrobiana clínica em pacientes acometidos por infecções estafilocócicas. A resistência à meticilina em S. aureus é decorrente da alteração do sítio de ação dos antibióticos β-lactâmicos, os quais agem através da inibição de enzimas que catalisam a síntese da parede celular. Essas enzimas são o sítio de ação das penicilinas, e por isso, passaram a ser chamadas de proteínas ligadoras de penicilinas (PBPs). O gene mecA codifica a PBP2a, que substitui a função das outras PBPs neste patógeno e confere resistência a β-lactâmicos. A PBP2a exibe uma afinidade reduzida pelo anel β-lactâmico e permite que a bactéria continue a sintetizar a parede bacteriana. Este gene faz parte de um elemento genético móvel encontrado em isolados de MRSA, designado cassete cromossômico estafilocócico mec (SCCmec), integrado ao cromossomo de S. aureus. O objetivo do estudo foi a caracterização molecular de 139 isolados de S.aureus provenientes de pacientes pediátricos com bacteremia durante o período de 1991 a 2010. Métodos moleculares foram utilizados para a determinação do perfil genético das amostras, incluindo, identificação do tipo de SCCmec, detecção do gene codificador de leucocidina de panton valentine (PVL) e similaridade clonal em gel de eletroforese em campo pulsado (PFGE). O gene mecA foi detectado em 32 (23%) amostras e houve predomínio do SCCmec IV (68,8%) em relação ao SCCmec III (31,2%). A presença de PVL foi encontrada em 18 amostras (12,9%), todas sensíveis à oxacilina. O clone epidêmico brasileiro, relacionado ao SCCmec tipo III, esteve presente na unidade neonatal do hospital... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Schinus Terebinthifolius raddi: estudo farmacognóstico e investigação da atividade biológica de extratos e frações

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Condições higiênico-sanitárias e de manejo de rebanhos leiteiros correlacionados à qualidade do leite cru refrigerado

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Estudo das interações de peptídeos antimicrobianos e sistemas miméticos de membrana por dinâmica molecular

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Atividade antibacteriana in vitro de extratos e substâncias isoladas de espécies de Croton frente Staphylococcus aureus causador de mastite bovina

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Estudo fitoquímico e propriedades biológicas da Dipteryx alata Vogel (baru)

Pós-graduação em Ciência dos Materiais - FEIS

Efeito de diferentes antibióticos no processo de reparo em reimplante de dentes mantidos em leite: estudo em ratos

Pós-graduação em Odontologia - FOA