Análise comparativa do perfil lipídico do plasma seminal associado ao estresse oxidativo

O estresse oxidativo é um dos fatores mais importantes na diminuição da qualidade do sêmen, pois leva a perda da integridade da membrana dos espermatozóides e de danos estruturais ao DNA através da cascata de lipoperoxidação. Os danos funcionais relacionados ao estresse oxidativo como a diminuição da motilidade e da viabilidade do espermatozóide são algumas das principais causas de infertilidade masculina. Ainda, os lipídios que compõe a membrana plasmática são macromoléculas que, além de estarem envolvidas em complexos sistemas biológicos e processos metabólicos da célula, são altamente susceptíveis ao processo de lipoperoxidação desencadeado pelo estresse oxidativo. Neste contexto, este projeto propôs o estudo das alterações no perfil lipídico do plasma seminal que pudessem estar relacionadas ao estresse oxidativo e posterior comparação destes perfis em busca de biomarcadores de infertilidade. Para isso, foram coletadas amostras de sêmen de 116 pacientes que procuraram o setor de Reprodução Humana da Universidade Federal de São Paulo. Estas amostras foram submetidas a técnica de TBARS para quantificação dos produtos finais do estresse oxidativo e separação dos grupos, e em seguida, ao protocolo de extração de lipídios para obtenção dos espectros de massa através da técnica de MALDI (Matrix Assisted Laser Disorption Ionization). Com esta análise foi possível a identificação de 31 lipídeos super representados nos diferentes grupos e que, futuramente, poderão vir a ser utilizados na avaliação da qualidade seminal

Fatores que interferem nas taxas de recuperação embrionária em éguas

The success in implementing an embryo transfer program derives from many factors. The embryo recovery rate is one of the most important factors, and allows the transfer to the recipient mare. This rate comes from a group of elements such as donor´s characteristics, collection date, reproductive management, semen quality, technician skill. Mainly because of the great importance of this direct interference on the results of an embryo recovery program, this study aimed to review the factors involved in embryo recovery rates in donor mares during an embryo transfer, suggesting some ways of improving these results

Morfometria e compactação da cromatina espermática de touros Nelore de acordo com a idade e sua influência na produção de embriões in vitro

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Congelação de células espermáticas provenientes de epidídimo de gatos domésticos contendo antioxidante no meio diluidor

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

O DNA, seus incríveis números e seus segredos

O DNA existe por um único motivo – criar mais DNA. Em cada célula do nosso organismo, o filamento estendido de DNA chega a ter cerca de 2 metros. Se você imaginar que em nosso corpo há perto de 10 trilhões de células, você terá uma ideia da enormidade de DNA que nós possuímos. Assim, se todo o seu DNA fosse emendado em um único filamento, seria tão comprido que se estenderia da Terra à Lua, ida e volta, várias vezes. Pudera, você é proprietário de 20 milhões de quilômetros de DNA. Seu corpo, em suma, é uma máquina de produzir DNA e sem ele você não conseguiria viver. Mas o próprio DNA, apesar de ser considerado “a base da vida”, não está vivo. Ao contrário de qualquer outra molécula, ele é, por assim dizer, “inanimado”. Não é reativo e quimicamente inerte. Por essas razões, pode ser recuperado de restos de sangue, de sêmen, ou de pele secos há muito tempo – milhares de anos, até.

Reprodução induzida e desenvolvimento inicial do Jundiá Leiarius marmoratus (PISCES: SILURIDAE)

Pós-graduação em Ciências Biológicas (Zoologia) - IBB

Diagnóstico genético pré-implantacional de embriões equinos

O diagnóstico genético pré-implantacional de embriões equinos já é uma realidade nos Estados Unidos e Argentina. Embora o Brasil seja líder mundial de transferência de embriões equinos, essa tecnlogia ainda está em fase de desenvolvimento, com poucos grupos atuando nessa área no país. O objetivo do presente projeto foi desenvolver a metodologia de micromanipulação e identificação do sexo de embriões equinos a campo. Dessa forma, selecionamos sequências específicas para padronização laboratorial dos ensaios de PCR com amostras de DNA da espécie equina. Os primers que apresentaram maior sensibilidade foram selecionados para a realização da PCR em biópsias embrionárias. Além das análises de biologia molecular, foi desenvolvida a técnica de micromanipulação de embriões equinos. Foram realizadas 105 biópsias de embriões pela técnica de microaspiração, permitindo a identificação do sexo pela técnica de WGA (Whole Genome Amplification) e posteriormente PCR seguido de eletroforese. Os embriões sexados foram transferidos para receptoras sincronizadas, permitindo a avaliação da taxa de concepção dos embriões submetidos à biópsia. Além disso, um embrião foi biopsiado, vitrificado e sexado. Após a identificação do sexo (fêmea) o embrião foi desvitrificado e transferido em receptora criteriosamente selecionada, resultando em prenhez

Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoide em Equinos

As técnicas de reprodução assistida utilizadas para os equinos estão em grande desenvolvimento, mesmo com a escassa disponibilidade de ovários de abatedouro para serem feitos estudos e a relação animal/indivíduo entrando, neste caso, a política do bem estar animal e outros fatores que serão discutidos ao longo desta revisão. Podemos afirmar que a técnica de ICSI promove resultados favoráveis à evolução da reprodução assistida, juntamente com outras técnicas, as quais muitas vezes são utilizadas para aprimorar o desenvolvimento e a produção de embriões, não mais necessitando do animal em si e sim de novas técnicas em produção in vitro. Oócito equino tolera o estresse de injeção mecânica de espermatozoides no ooplasma, ou seja, há grande viabilidade da técnica em discussão. O sêmen de baixa qualidade ou com baixo número de espermatozóides pode ser utilizado, seguramente na ICSI, o método pode ser uma ferramenta para avaliar a maturação citoplasmática ou mesmo para substituir outras técnicas já descritas em literatura, mas que não alcançaram a eficiência esperada

Ultrassonografia de glândulas genitais acessórias em carneiros da raça Dorper: caracterização e correlações reprodutivas

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Centrifugação de espermatozóides ovinos em gradiente de densidade contínuo: efeito sobre a taxa de prenhez e proporção do sexo

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Impaired protamination and sperm DNA damage in a Nellore bull with high percentages of morphological sperm defects in comparison to normospermic bulls

The routine semen evaluation assessing sperm concentration, motility and morphology, does not identify subtle defects in sperm chromatin architecture. Bulls appear to have stable chromatin, with low levels of DNA fragmentation. However, the nature of fragmentation and its impact on fertility remain unclear and there are no detailed reports characterizing the DNA organization and damage in this species. The intensive genetic selection, the use of artificial insemination and in vitro embryo production associated to the cryopreservation process can contribute to the chromatin damage and highlights the importance of sperm DNA integrity for the success of these technologies. Frozen-thawed semen samples from three ejaculates from a Nellore bull showed high levels of morphological sperm abnormalities (55.8±5.1%), and were selected for complementary tests. Damage of acrosomal (76.9±8.9%) and plasma membranes (75.7±9.3%) as well as sperm DNA strand breaks (13.8±9.5%) and protamination deficiency (3.7±0.6%) were significantly higher compared to the values measured in the semen of five Nellore bulls with normospermia (24.3±3.3%; 24.5±6.1%; 0.6±0.5%; 0.4±0.6% for acrosome, plasma membrane, DNA breaks and protamine deficiency, respectively) (P<0.05). Motility and percentage of spermatozoa with low mitochondrial potential showed no differences between groups. This study shows how routine semen analyses (in this case morphology) may point to the length and complexity of sperm cell damage emphasizing the importance of sperm function testing.

Perfil lipídico da membrana plasmática e alterações morfofuncionais de esperamatozóides de garanhões resistentes e sensíveis à criopreservação

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação dos constituintes proteicos do plasma seminal e da membrana plasmática se espermatozóides e sua correlação com a fertilidade de garanhões

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Níveis de lisina em dietas para reprodutores de Rhamdia voulezi em tanques-rede

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

N-acetilcisteína e trolox na conservação de células espermáticas epididimárias de cães

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV