Helibacter pylori: preaparação de Lapdesf-IUNI e ensaio de inibição de urease (IC50) de derivados de tiouréia e guanidínicos

O presente trabalho de conclusão de curso visou à otimização e preparação da síntese de Lapdesf-IUNI e avaliação do potencial de inibição de urease de três compostos previamente sintetizados, direcionados especificamente para o tratamento de infecções por Helicobacter pylori, bactéria mundialmente reconhecida como uma das principais causadoras de infecções no mundo, responsável pelos casos de infecções gástricas, como gastrites crônicas, úlceras (gástricas e duodenais) e carcinomas. Lapdesf-IUNI é um composto derivado de metronidazol, com atividade potencialmente inibidora de urease, enzima presente neste microrganismo e essencial a sua sobrevivência no ambiente gástrico. O produto foi obtido, porém com baixo rendimento, por isso sua metodologia ainda necessita ser aperfeiçoada, para que, em seguida este composto possa ser testado. Outros três compostos, um derivado de tiouréia e dois derivados guanidínicos, com potencial atividade inibidora de urease, T-6, R-17 e R-21, sintetizados pela equipe do Prof. Eduardo Perez, foram avaliados com relação a sua atividade inibidora frente à enzima urease e IC50, apresentando bons resultados, que permitem a continuidade dos estudos, comparando inclusive com fármacos utilizados nos protocolos de tratamento padrões para o tratamento das infecções causadas por H. pylori

Desenvolvimento e validação de método analítico para a quantificação de teicoplanina injetável por turbidimetria

A teicoplanina é um complexo antibiótico glicopeptídico derivado do Actinoplanes teichomyceticus, ativo contra bactérias Gram-positivas resistentes a outros antibióticos. Seu espectro de ação é similar ao da vancomicina, sendo, porém mais ativo para Streptococcus faecalis e Clostridium difficile. Seu uso é indicado para profilaxia de endocardite, peritonite, osteomielite e para septicemia estafilocócica. No Brasil, a teicoplanina é comercializada sob a forma farmacêutica de pó liofilizado, que deve ser reconstituído antes da administração. O medicamento de referência é o Targocid®, produzido pelo laboratório Sanofi-Aventis, em duas apresentações, 66 mg/mL e 133 mg/mL. A teicoplanina, bem como a vancomicina, inibe a síntese da parede celular bacteriana, pois a molécula se liga ao precursor da parede D-alanil-D-alanina, formando um complexo, impedindo a ligação à porção terminal do peptidoglicano, que é o alvo das enzimas transglicolase e transpeptidase. Desse modo, não há incorporação de aminoácidos aos glicopeptídeos integrantes da parede celular das bactérias Gram-positivas. No estudo de validação, foram aplicados os parâmetros de linearidade, intervalo, precisão, sensibilidade, especificidade, exatidão e robustez. O método desenvolvido e validado para a quantificação de teicoplanina pó liofilizado foi: Ensaio microbiológico por turbidimetria na faixa de concentração de 20,0 a 80,0 μg/mL, utilizando o micro-organismo Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 IAL 2150. Os parâmetros estudados para a validação do método turbidimétrico atenderam a todas as especificações para a adequada quantificação de teicoplanina na forma farmacêutica pó liofilizado

Estudo da oxidação da melatonina e de seus produtos por radicais peroxila

Melatonin is an endoleamine that has anti-inflammatory, immunomodulating and antioxidants properties. But there is a contradiction between the antioxidant effects of melatonin and glutathione (GSH). Therefore, the main objective of this work was to study the effect of melatonin on the oxidation of GSH and the effect of GSH on the oxidation of melatonin by peroxyl radicals generated by thermolysis of 2,2 -Azobis(2- amino-propane)-dihydrochloride (AAPH). The influence of the reaction conditions and the identity of the products of oxidation were also studied. The main products obtained during the oxidation of melatonin were its monohydroxylated derivative and N1-acetyl- N2-formyl-5-methoxykynuramine (AFMK), which is the product obtained by oxidative cleavage of the melatonin indole ring. By studying the buffer type, pH and the presence or absence of dissolved oxygen in the reaction system, it was observed that, the yield of AFMK was higher when the pH or the concentration of oxygen was increased. Comparing the reactivity of both molecules GSH and melatonin, it can be seen that intermediates radicals generated during the oxidation of melatonin are able to oxidize GSH itself. We propose that this chemical property could justify the recent reports that demonstrated the inability of melatonin to inhibit the oxidation of GSH in cells

Cinética de lactato sanguíneo durante exercício de natação em ratos desnutridos recém-desmamados

Sabe-se que a desnutrição protéica fetal/neonatal pode predispor à resistência à insulina e à síndrome metabólica após recuperação nutricional. O treinamento físico, por sua vez, melhora a tolerância à glicose e a sensibilidade à insulina, além de exercer efeitos benéficos ao crescimento somático. Por outro lado, faltam informações quanto à habilidade de organismos desnutridos muito jovens para a realização do exercício. Modelos animais podem auxiliar a investigação desta questão, uma vez que o estudo em humanos apresenta limitações. Alimentação de ratos com dietas isocalóricas com baixo teor protéico é um modelo de desnutrição bastante utilizado para simular a desnutrição humana. Assim sendo, o presente estudo foi delineado para avaliar a cinética de lactato sanguíneo durante uma sessão de natação de ratos recém desmamados submetidos à restrição protéica fetal/neonatal. Foram avaliados dois grupos de animais recém-desmamados (21 dias, machos), contendo 8 animais em cada um: Normoprotéico (NP), crias de ratas alimentados com dieta normoprotéica (AIN 93G, 17% caseína) durante a gestação e a lactação e Hipoprotéico (HP):crias de ratas alimentados com dieta normoprotéica (6% caseína) durante a gestação e a lactação. Foram analisados peso ao nascer, concentrações séricas de proteínas totais e albumina dos recém-nascidos assim como ao desmame. Os dados foram analisados pelo teste t de student não pareado, sendo o nível de significância pré-estabelecido em 5%. Quando se avaliou os animais recémnascidos observou-se que a restrição protéica neonatal foi eficaz na instalação do quadro de desnutrição visto menores valores referente ao peso corporal, proteínas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Nephila clavipes e Nephila sexpunctata (Araneae, Araneomorphae, Nephilidae): cariótipo, heterocromatina constitutiva e região organizadora de nucléolo

As espécies de Nephila estão incluídas na família Nephilidae que pertence ao grupo das aranhas Entelegynae, o qual é considerado filogeneticamente derivado em relação aos outros grupos da ordem Araneae. Análises citogenéticas realizadas nas aranhas Entelegynae com técnicas de coloração convencional, têm mostrado que a maioria das espécies possui uniformidade cariotípica principalmente em relação a morfologia telo-acrocêntrica dos cromossomos e sistema cromossômico sexual (SCS) do tipo X1X20/X1X1X2X2. Além disso, estas análises têm demonstrado que algumas famílias de Entelegynae também possuem uniformidade cariotípica concernente ao número diplóide de cromossomos na maioria das suas espécies. Por outro lado, o emprego adicional de técnicas de coloração diferencial de regiões cromossômicas específicas em alguns representantes de Entelegynae têm revelado características que podem ser usadas para determinar os mecanismos envolvidos na evolução cromossômica e na diferenciação cariotípica de espécies relacionadas. Contudo, poucas espécies de Entelegynae tiveram seus cariótipos analisados com técnicas de coloração diferencial. O Brasil possui aproximadamente 4.000 espécies de Araneae descritas taxonomicamente; entretanto apenas cerca de 20 destas foram analisadas do ponto de vista citogenético. Considerando estas informações, o objetivo deste trabalho foi investigar o cariótipo de duas espécies de Nephila, Nephila clavipes e Nephila sexpunctata, com técnicas de coloração convencional e diferencial para determinar o número diplóide, a morfologia cromossômica, o tipo de SCS, e o padrão de distribuição da heterocromatina constitutiva (bandas C) e das regiões organizadoras de nucléolo (RONs) ativas, e comparar os dados obtidos com aqueles de espécies relacionadas, para estabelecer os mecanismos de evolução cromossômica...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Estudo da produção e caracterização de queratinase produzida por Bacillus sp. LM-21 isolado de águas residuárias de abatedouro de frangos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Síntese e avaliação da capacidade de doação de óxido nítrico de novos compostos com atividade anti-agregante plaquetária úteis no tratamento de anemia falciforme

A anemia falciforme é uma doença genética caracterizada por uma anemia hemolítica crônica e fenômenos vaso-oclusivos, que levam a crises dolorosas e à lesão tecidual crônica e progressiva. Tem sido relatado que pacientes com anemia falciforme apresentam aumento dos níveis circulantes de citocinas, incluindo fator de necrose tumoral-α (TNF-α). O principal fármaco utilizado no tratamento dessa anemia é a hidroxiuréia (HU), fonte exógena de óxido nítrico (NO) e responsável pela inibição da agregação de plaquetas e aumento dos níveis de hemoglobina fetal (HbF). Trabalhos prévios têm demonstrado a importância da subunidade 1,2,5-oxadiazol-N-óxido como doadora de óxido nítrico. Nesse contexto, o presente trabalho tem como objetivo sintetizar um novo derivado híbrido do 1,2,5-oxadiol-N-óxido para a formação de um composto útil para o tratamento dos processos preventivos contra agregação plaquetária exacerbado em pacientes falciformes

Produção de vetores recombinantes para expressão de diferentes formas da proteína K1 do herpesvírus associado ao Sarcoma de Kaposi (KSHV)

Kaposi´s sarcoma associated herpesvirus (KSHV) or human herpesvirus 8 (HHV-8) is a gammaherpesvirus essential for the development of all forms of Kaposi´s sarcoma (KS). The KSHV’s life cycle is basically divided into latent and lytic phases, which have distinct viral gene expression profiles. Some important oncogenic products of KSHV are expressed during the lytic phase, including the viral K1 protein. As an effect of interfer-ence with intracellular signaling, K1 expression increases proliferation and survival of KSHV-infected cells. Due to its high level of genetic variability compared to other re-gions of the viral genome, the K1-encoding ORF (ORF-K1) is commonly evaluated for KSHV genotyping. It remains unclear whether different viral genotypes have particular biological effects that might modify the KSHV oncogenicity. The present study aimed to contribute to the establishment of an experimental in vitro model for evaluation of the K1 protein from common KSHV genotypes. Recombinant expression vectors with the ORF-K1 from KSHV genotypes A, B and C were prepared by genetic cloning. The recombi-nant vectors pKSHVOK1 obtained by cloning were sequenced for structural validation. After that, HEK293 cell line was transfected with the recombinant vectors, and proteins were extracted for expression analysis by Western blot technique, for K1 functional vali-dation. Results showed that ORF-K1 vectors containing KSHV ORF-K1 from the A, B and C genotypes were produced and structurally validated by DNA sequencing. The K1 expression at the protein level was also confirmed by immunoblots using an antibody for FLAG detection, an epitope from the vector that binds to K1. Based on presented re-sults, it´s possible to conclude that the recombinant vectors will be able to be used in future studies of K1 protein biological properties from distinct KSHV genotypes

Obtenção de uma nova proteína recombinante componente do complexo telemérico LAGT1 de Leishmania Amazonensis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

As possíveis relações entre desenvolvimento moral e uso de crack por adolescentes

The dependency of psychoactive substances whether licit or illicit, among adolescents is a topic that has aroused much discussion today. One of the psychoactive substance that has caught the attention of authorities and experts, its potential dependence, increasing the number of addicts and speed with which triggers the human degeneration is the crack (a derivative of cocaine - Erythroxylon coca), used via the smoked administration. Understanding the phenomenon of increasing their use requires an analysis of the concepts of addiction throughout history, current research encompassing scientific findings in epidemiology and statistics involving several types of pharmacological substances, and especially the analysis of data related specifically to crack the focus of our theme. In order to contribute to ongoing discussions and offer possible alternatives for effective intervention, especially in schools, we conducted a survey that sought to find evidence of a possible relationship between crack use and moral reasoning. Since our work specifically theoretical nature, we use to reach our goals, assumptions, two researchers in the concept of human morality: Jean Piaget (1994) and Lawrence Kohlberg (1992) both traveling within the proposed cognitive-evolutionary human development. For an understanding of the proposals of these two researchers, we use research to (Lepre, 2005), as guiding thesis of this work. The results presented indicate that adolescents who use crack are very close to a level of moral reasoning pre-conventional and conventional, although it is important to state that more accurate results require further research on the subject, including those involving field research. Yet we can conclude that prevention must go through a dialogue that privileges the moral education as possible means of effective intervention against the use of crack, allowing the construction of autonomy... (Complete abstract click electronic access below)

Avaliação dos efeitos citotóxicos, genotóxicos e mutagênicos do fipronil, após fotodegradação, utilizando Allium cepa como organismo teste

Compounds released into the environment can induce genetic alterations in living organisms. A group of chemicals that shows proven toxicity is the pesticides, and the insecticides are the most harmful. The insecticides of the family phenylpyrazole have wide application both in agriculture and in homes. Fipronil, an insecticide of this chemical group, is widely used in various cultures and in homes, mainly for fighting fleas and ticks on dogs and cats. The use of fipronil may represent a risk to man and the environmental health, since this pesticide can potentially induce cell death, regardless of cell type. Fipronil, when in contact with the environment, can undergo various degradation processes, including photodegradation. The toxic effect of one of its metabolites derived from photodegradation, sulfone-fipronil, is approximately 20 fold as great as fipronil itself. The A. cepa test system was used to evaluate cytotoxic, genotoxicity and mutagenic effects of fipronil before and after phptodegradation. Seeds of Allium cepa were subjected to solutions of fipronil, pre-exposed or not exposed to degradation by sunlight. The germination tests were conducted both under the effect of light and in the dark. We evaluated the cumulative potential of this insecticide using 48 and 72-hours recovery tests. The results showed that when fipronil was previously exposed to the sun, it presented a greater genotoxic and mutagenic potential, showing that the metabolites formed by photodegradation can show more harmfull effects

Preparação e caracterização da casca de banana prata particulada para aplicação com reforço em compósito de matriz de PEAD

The waste, exaggerated and incorrect disposal of biomass are common practices in modern times where everything is disposable. However the growing concern with the nature and the environment compel man to give nobler destinations for these products through sustainability and recycling of waste. Banana peel is a residual biomass, which is not consumed. It generates tons of waste per week in São Paulo city. This trash is disposed in dumps and landfills, which could be reduced by using it as reinforcement in natural composites. The high density polyethylene (HDPE) is a polymer derived from the ethylene polymerization and is easily recycled. Which makes it a sustainable material. In the present work characteristics of the natural composite composed with banana peel and high-density polyethylene were studied. It was noted that removing the lignin present in the banana peel, the fiber introduces a significant improvement in thermal resistance. The preparation of composite was made with a ratio of 5% and 10% of reinforcement in comparison with polymeric matrix mass. Composites were thermally, mechanically and microscopically characterized. The addition of fiber in the polymer increased the mechanical strength of the composite. The fiber surface treatment with distilled water removed the amorphous material present in the fibers, improving significantly thermal stability and increasing crystallinity of the celullose. The addition of 5% fiber in mass to the polymer increased significantly the tensile strength and elasticity modulus for the composite. With 10% of fiber addiction there were also an improvement when compared with pure HDPE, but when compared with 5% composite the mechanical properties are slightly lower. This may be due to the fiber particle size, which are small and eventually become a hub of tension ... (Complete abstract click electronic access below)

Exigência de proteína digestível em dietas para juvenis de tambaqui e a dinâmica do crescimento muscular por aspectos morofológicos e turnover isotópico do carbono-13 e do nitrogênio-15

Pós-graduação em Zootecnia - FCAV

Queijos tipo parmesão ralados industrialmente e no ato da venda, adquiridos no comércio varejista, como fontes de agentes deteriorantes e patogênicos

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Efeito do 1,3/1,6 beta-glucano no sistema imune de cadelas submetidas a ovário-histerectomia

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV