Influence of consumption of probiotics on presence of enterobacteria in the oral cavity

Clinical benefits of probiotics have been clearly reported in different gastrointestinal disorders, many of them caused by enterobacteria. The oral cavity is a port of entry and can be an important reservoir of these microorganisms. This work evaluated whether consumption of probiotics was able to influence the presence of enterobacteria in the oral cavity and the specific secretory response against these microorganisms. Saliva samples of healthy individuals were collected and plated in Mac-Conkey agar. Carriers of Gram-negative, rod-shaped microorganisms in the oral cavity were selected and instructed to use the probiotic Yakult LB for 20 days. Saliva was then collected and enterobacteria species were identified using the API 20 E system and by ELISA using anti-enterobacteria IgA. The results showed reduction in the prevalence of enterobacteria, but no significant changes in enterobacterial counts (log CFU/mL; p = 0.3457). The species most frequently isolated were Enterobacter cloacae and Klebsiella oxytoca, both before and after probiotic consumption. No significant changes were observed in anti-enterobacteria IgA levels. In conclusion, probiotic consumption had some influence on enterobacterial presence in the oral cavity, but did not affect enterobacterial counts or the specific immune secretory response against them.

Perdas fermentativas e estabilidade aeróbia de silagens de milho inoculadas com bactérias ácido-láticas em diferentes estádios de maturidade

Objetivou-se, nesta pesquisa, avaliar o efeito de inoculantes bacterianos em silagens produzidas com plantas de milho em diferentes estádios de maturidade quanto às perdas fermentativas e estabilidade aeróbia. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3x5, e avaliaram-se dois inoculantes (Silobac® e Maize All®) e uma silagem controle em 5 estádios de maturação fisiológica do milho, com 4 repetições. Verificou-se efeito positivo dos inoculantes quanto às perdas fermentativas, e a adição de Silobac® e Maize All® promoveram perda de matéria seca (PMS) 1,78 e 1,75 pontos percentuais a menos que a silagem controle (7,95%). As silagens produzidas com 2/3 de linha de leite e camada negra (CN) apresentaram menor PMS, o que se deve principalmente a menor produção de efluente. A silagem que levou maior tempo para apresentar quebra da estabilidade aeróbia foi aquela produzida a partir de plantas de milho no estádio camada negra e inoculada com Maize All®, ao passo que se notou menor estabilidade para outras silagens inoculadas com esse mesmo produto em virtude do aumento no teor de umidade das silagens. Os inoculantes utilizados neste trabalho são eficientes em diminuir as perdas de MS durante o processo fermentativo, contudo, contribuem com maior aporte de nutrientes nas silagens, o que resulta em menor estabilidade após a abertura dos silos. Silagens produzidas com maior concentração de MS apresentam menores perdas de MS durante a fermentação, assim como são mais estáveis em contato com o oxigênio.

Prevalência e caracterização de espécies de lactobacilos vaginais em mulheres em idade reprodutiva sem vulvovaginites

OBJETIVO: identificar espécies de lactobacilos isolados do conteúdo vaginal de mulheres saudáveis e assintomáticas; determinar as espécies mais prevalentes e caracterizá-las fenotipicamente. MÉTODOS: lactobacilos foram isolados em meio seletivo a partir de amostras de conteúdo vaginal de 135 mulheres, sem queixa de corrimento e com diagnóstico laboratorial negativo para infecções vaginais, acompanhadas em um ambulatório de Planejamento Familiar. Os isolados foram identificados por PCR multiplex e, quando necessário, submetidos ao sequenciamento do gene RNAr 16S. Foram também avaliados quanto à acidificação do meio de cultura, à produção de ácido láctico, de H2O2, bacteriocinas e a capacidade de adesão às células epiteliais. RESULTADOS: oitenta e três cepas de lactobacilos foram isoladas e identificadas, sendo as espécies predominantes L. crispatus (30,1%), L. jensenii (26,5%), L. gasseri (22,9%) e L. vaginalis (8,4%). Apenas 20 destes isolados não produziram H2O2 em quantidades detectáveis. Das 37 linhagens selecionadas para teste de adesão a células epiteliais, 12 apresentaram adesão entre 50 a 69%, 10 apresentaram 70% ou mais, e as restantes pouca ou nenhuma adesão. Nenhum dos isolados produziu bacteriocinas. CONCLUSÕES: as espécies de lactobacilos mais prevalentes em mulheres sem vulvovaginites, isoladas em meio de cultura seletivo e identificadas por métodos moleculares, foram L. crispatus, L. jensenii e L. gasseri. Além de mais frequentes, tais linhagens também apresentaram melhor produção de H2O2 e atingiram menores valores de pH em meio de cultura.

Efeitos de probióticos sobre a digestibilidade, escore fecal e características hematológicas em cães

Avaliaram-se os efeitos da suplementação de dois tipos de probióticos para cães filhotes, que receberam dois tipos de dieta - de alta e de baixa qualidade -, sobre a digestibilidade dos nutrientes, escore fecal e parâmetros sanguíneos. Foram utilizados 18 animais, distribuídos em três tratamentos. No tratamento 1, controle, os cães receberam somente a ração; no tratamento 2, ração com probiótico 1 (Bifidobacterium) e, no tratamento 3, ração com probiótico 2 (Lactobacillus). O experimento foi dividido em duas fases. Verificaram-se que os valores médios do coeficiente de metabolizabilidade da energia bruta (CMEB) na fase 1, caracterizada pela troca da dieta Super Premium para a dieta Standard, apresentaram resultados significativos (P<0,05), sendo os melhores resultados obtidos nos animais que receberam o probiótico 2. Não houve diferenças significativas (P>0,05) para o escore fecal e para as análises hematológicas.

Avaliações ultrassonográfica e radiográfica dos efeitos da suplementação com dois tipos de probióticos sobre o intestino de cães filhotes

Avaliaram-se os efeitos da suplementação de dois tipos de probióticos para cães filhotes da raça Beagle, que receberam dois tipos de dieta de alta e baixa qualidade, sobre os achados em exames de diagnóstico por imagem. Foram utilizados 18 cães filhotes da raça Beagle, distribuídos em três tratamentos inteiramente ao acaso: tratamento 1, controle (ração); tratamento 2, ração com probiótico 1 (Bifidobacterium); e tratamento 3, ração com probiótico 2 (Lactobacillus). O experimento foi dividido em duas fases, cada uma caracterizada pela mudança da dieta de qualidades diferentes. Ao exame ultrassonográfico, foi avaliada a espessura da parede gastrintestinal, e ao radiográfico, a presença de gás em alças intestinais e o espessamento da parede. Observou-se aumento da espessura da parede das alças intestinais (P<0,05), nos animais dos grupos tratados com probiótico 1 e 2 (5,74mm e 6,01mm, respectivamente) em relação aos do grupo-controle (5,03mm). O uso de probióticos não influenciou a produção de gás intestinal. Não houve diferença (P>0,05) entre os tratamentos quanto ao escore de gás intestinal. A avaliação quantitativa permitiu a determinação de um escore de gás intestinal, de forma não invasiva, por meio do software Image J®. Concluiu-se que o diagnóstico por imagem sustenta a recomendação dessa metodologia como ferramenta auxiliar na avaliação nutricional de dietas para cães.

Fermentation, losses, and aerobic stability of sugarcane silages treated with chemical or bacterial additives

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Padrão de fermentação e composição química de silagens de grãos úmidos de milho e sorgo submetidas ou não a inoculação microbiana

Objetivou-se avaliar o padrão de fermentação e a composição química de silagens de grãos úmidos de milho e de sorgo confeccionadas com ou sem o uso de inoculante microbiano. Avaliou-se, no experimento 1, a silagem de grãos úmidos de milho e, no experimento 2, a silagem de grãos úmidos de sorgo. O material foi ensilado em silos experimentais de PVC (50 cm de comprimento e 100 mm de diâmetro), três por tratamento (tempo de armazenagem, com ou sem inoculante) para cada grão. Amostras foram tomadas antes (0) e aos 1, 2, 3, 4, 8, 16, 32 e 64 dias após a ensilagem, totalizando 48 silos experimentais para cada grão. Os tratamentos foram arranjados em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2 x 9 (com e sem inoculante microbiano, nove tempos de armazenagem), com três repetições para cada grão. Não houve efeito da inoculação e do tempo pós-ensilagem sobre o teor de MS dos grãos úmidos de milho e de sorgo, com médias de 64,13 e 64,03% e de 67,66 e 67,48% para silagens controle e inoculadas, respectivamente. Não houve efeito da inoculação sobre o pH dos grãos úmidos de milho e de sorgo aos 64 dias após ensilagem, com médias de 3,97 e 3,92 e de 3,94 e 3,95 unidades para silagens controle e inoculadas, respectivamente. O inoculante microbiano não promoveu alterações na composição química nem redução de perdas da MS nas silagens de grãos úmidos de milho e de sorgo. Nas condições estudadas, não é necessária inoculação para melhoria nos padrões fermentativos de silagens de grãos úmidos de milho e de sorgo.

Sugarcane silage production treated with additives at different times post burning

Objetivou-se estudar a ação do tempo após a queima do canavial e o uso de aditivos sobre as características fermentativas, as perdas e a composição química de silagens de cana-de-açúcar. A cultivar utilizada foi a IAC 86-2480 colhida em cinco tempos (1, 4, 7, 10 e 14 dias) pós-queima. Os aditivos utilizados foram controle, sem aditivos, Lactobacillus buchneri, cal virgem micropulverizada e Lactobacillus buchneri + cal virgem micropulverizada. Antes da ensilagem em cada tempo, foram determinadas as populações de leveduras presentes na cana-de-açúcar. Decorridos 56 dias após a ensilagem, os silos experimentais foram abertos. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial, considerando os fatores aditivos e tempo pós-queima. Houve recontaminação da cana-de-açúcar pelas leveduras, elevando a população de 5,04 para 6,48 log ufc/g de forragem. Os teores de matéria seca (MS) após a abertura do silo reduziram em média 7,6 unidades percentuais em comparação aos observados na ensilagem. As silagens controle e com Lactobacillus buchneri tiveram menores recuperações da matéria seca (613 e 631 g/kg, respectivamente), em comparação às observadas nas silagens com cal e com a combinação Lactobacillus buchneri + cal (807 g/kg e 832 g/kg, respectivamente), fato que pode ser justificado pelo controle de levedura pela cal. Após a queima, as maiores variações foram na produção de gás e na recuperação de matéria seca: a produção de gás foi maior nos primeiros dias e diminuiu com o tempo após a queima, consequentemente, a recuperação de MS foi menor nos primeiros dias e aumentou com o tempo após a queima. O tempo após a queima altera o valor nutritivo da cana-de-açúcar fresca e das suas silagens, assim como a magnitude das perdas no processo de ensilagem.

Preparation and antimicrobial activity of gelatin microparticles containing propolis against oral pathogens

Gelatin microparticles containing propolis ethanolic extractive solution were prepared by spray-drying technique. Particle,, with regular morphology, mean diameter ranging of 2.27 mu m to 2.48 mu m, and good entrapment efficiency for propolis were obtained. The in vitro antimicrobial activity of microparticles was evaluated against microorganisms of oral importance (Enterococcus faecalis, Streptococcus salivarius, Streptococcus sanguinis, Streptococcus mitis, Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Candida albicans, and Lactobacillus casei). The utilized techniques were diffusion in agar and determination of minimum inhibitory concentration. The choice of the method to evaluate the antimicrobial activity of microparticles showed be very important. The microparticles displayed activity against all tested strains of similar way to the propolis, showing greater activity against the strains of E. salivarius, S. sanguinis, S. mitis, and C albicans.

Production of transgalactosylated oligosaccharides (TOS) by galactosyltransferase activity from Penicillium simplicissimum

Ingestion of transgalactosylated oligosaccharides (TOS) and other non-digestible oligosaccharides (NDOs) induces a significant increase in Bifidobacterium, Lactobacillus and some desirable species of Streptococcus populations in the gut of human and other animals (prebiotic effect). This change in the intestinal flora is responsible for several beneficial physiological effects such as a decrease of putrefactive products in the feces, lower blood cholesterol content, higher Ca2+ absorption, a smaller loss of bone tissue in ovariotomized female rats and a lower incidence of colon cancer. beta-Galactosidase from Penicillium simplicissimum, a strain isolated from soil, showed high galactosyltransferase activity when incubated with a highly concentrated lactose solution. Optimum pH and temperature ranges for hydrolytic activity were 4.0-4.6 and 55-60 degrees C, respectively, for a lactose concentration of 5.0% (w/v). Maximal galactosyltransferase activity was obtained at pH 6.5 and 50 degrees C and TOS synthesis was positively associated with lactose concentration in the reaction medium. Thus, when 50 ml of a 60% (w/v) lactose solution was incubated with 26.6 U of beta-galactosidase under the best pH and temperature conditions for transferase activity, a final product with 30.5% TOS (183 mg ml(-1)), 27.5% residual lactose and 42.0% monosaccharides was obtained. (C) 1999 Elsevier B.V. Ltd. All rights reserved.

Effect of 3,4,4 '-trichlorocarbanilide on growth of lactic acid bacteria contaminants in alcoholic fermentation

3,4,4'-trichlorocarbanilide (TCC) was rested as a new method of bacterial growth control for S. cerevisiae alcoholic fermentations of diluted high test molasses (HTM). Minimal inhibitory concentration (MIC) was tested to determine the necessary concentration of TCC to control bacterial growth. The fed-batch alcoholic fermentation process was used with cell recycle similar to industrial conditions and Lactobacillus fermentum CCT 1407 was mixed in the first inoculum to grow with the yeast. Yeast extract was added into the must to stimulate bacterial growth. The best results of TCC's MIC to bacterial growth of Lactobacillus fermentum and Leuconostoc mesenteroides (< 0.125-1.0 mu g/ml) and Saccharomyces cerevisiae (16 mu g/ml) occurred when it was combined with sodium dodecylsulphate (SDS) in a 1: 4 TCC/SDS ratio (wt/wt) in distilled water solution. 1.8 g/l TCC entrapped in calcium alginate added to the must with yeast extract inhibited the growth of Lactobacillus fermentum CCT 1407 maintaining a controlled acidity, higher yeast viability and up to 20.8% of improvement in the average of alcoholic efficiency. Addition of 0.075 g/l TCC entrapped in calcium alginate and 1.67 mg/l SDS in the wort with yeast extract (0-5.0 g/l), inhibited and controlled the extensive bacterial contamination for 19 cycles of fermentation. (C) 1998 Published by Elsevier B.V. Ltd.

Chlorine dioxide against bacteria and yeasts from the alcoholic fermentation

The ethanol production in Brazil is carried out by fed-batch or continuous process with cell recycle, in such way that bacterial contaminants are also recycled and may be troublesome due to the substrate competition. Addition of sulphuric acid when inoculum cells are washed can control the bacterial growth or alternatively biocides are used. This work aimed to verify the effect of chlorine dioxide, a well-known biocide for bacterial decontamination of water and equipments, against contaminant bacteria ( Bacillus subtilis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum and Leuconostoc mesenteroides) from alcoholic fermentation, through the method of minimum inhibitory concentration ( MIC), as well as its effect on the industrial yeast inoculum. Lower MIC was found for B. subtilis ( 10 ppm) and Leuconostoc mesenteroides ( 50 ppm) than for Lactobacillus fermentum ( 75 ppm) and Lactobacillus plantarum ( 125 ppm). Additionally, these concentrations of chlorine dioxide had similar effects on bacteria as 3 ppm of Kamoran (R) ( recommended dosage for fermentation tanks), exception for B. subtilis, which could not be controlled at this Kamoran (R) dosage. The growth of industrial yeasts was affected when the concentration of chlorine dioxide was higher than 50 ppm, but the effect was slightly dependent on the type of yeast strain. Smooth yeast colonies ( dispersed cells) seemed to be more sensitive than wrinkled yeast colonies ( clustered cells/pseudohyphal growth), both isolated from an alcohol-producing unit during the 2006/2007 sugar cane harvest. The main advantage in the usage of chlorine dioxide that it can replace antibiotics, avoiding the selection of resistant populations of microorganisms.

Presença de microrganismos na silagem de grãos úmidos de milho ensilado com diferentes proporções de sabugo

This experiment was carried out in the Microbiology Laboratory of UNESP-Jaboticabal, to evaluate the different species of microorganisms in high-moisture corn grain silage. The treatments were five percentages of corn cob in the silage (0, 5, 10, 15 and 20% DM) and four sampling periods after the opening of the silos (0, 2, 4 and 6 days), using a factorial arrangement in randomized block design with three replications. The growth of Lactobacillus was higher (P<0.01) in the silage prepared only with grains in relation to the other treatments. The presence of Clostridium differed (P<0.01) among the treatments, with values ranging from 1.30 and 3.32 log CFU/g of silage. It was concluded that the population of Lactobacillus was satisfactory to obtain a good fermentation of the silages, and the presence of corn cob facilitated the development of Clostridium and also of yeast and Enterobacteriaceae after the silos were opened.