Efeito da idade sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen diluído, resfriado a 14ºC e transportado

Para estudar o efeito da idade sobre características ovulatórias e de fertilidade, 147 ciclos estrais de 99 éguas foram agrupados em classes por idade (1 - 3-6 anos; 2 - 7-10 anos; 3 - 11-14 anos; e 4 - 15-19 anos), de acordo com o ano do nascimento. As éguas foram inseminadas com sêmen diluído, resfriado e transportado de apenas um garanhão, três vezes por semana (segundas, quartas e sextas-feiras).O controle folicular, por meio da palpação retal, e a rufiação foram realizados diariamente, durante todo o período experimental. Utilizou-se, para o transporte, o sêmen diluído no diluidor de leite desnatado-glicose no conteiner Celle modificado, sendo a dose inseminante de 400 x 10(6) espermatozóides móveis, no momento da diluição final, pré-resfriamento. O tempo médio da coleta do sêmen à inseminação artificial foi de 3,5 horas e a temperatura final do sêmen, no momento da inseminação, de 14ºC. Não houve influência da idade sobre a velocidade de crescimento folicular e o tamanho do folículo ovulatório. A fertilidade decaiu após os 15 anos de idade, traduzida pela diminuição da taxa de concepção/ciclo e eficiência de prenhez, entretanto, não foram observadas características indicativas de senescência até os 19 anos de idade.

Efeito do número de inseminações artificiais sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen diluído, resfriado a 14ºC e transportado

Estudou-se o efeito do número de inseminações sobre a fertilidade de éguas inseminadas, três vezes/semana (segundas, quartas e sextas-feiras), com sêmen diluído, resfriado e transportado, de apenas um garanhão. As éguas foram inseminadas a partir da detecção, pela palpação retal, de um folículo de 3,0 a 3,5 cm de diâmetro, em um dos ovários, até a ovulação. Utilizaram-se para o transporte o sêmen diluído no diluidor leite desnatado-glicose e o conteiner Celle modificado, sendo a dose inseminante de 400 x 10(6) espermatozóides móveis, no momento da diluição final, pré-resfriamento. de acordo com o número de inseminações artificiais (IA) utilizadas/ciclo, os resultados de 148 ciclos, de 100 éguas, foram agrupados em: 1 IA, 2IA, 3 IA e 4 ou mais IA. A eficiência de prenhez foi de 4,29; 5,04; 5,67; e 3,43, para 1, 2, 3 e 4 ou mais IA, respectivamente. As características foliculares diferiram em relação à freqüência de inseminações com os maiores valores observados no grupo de éguas inseminadas quatro ou mais vezes. Concluiu-se que menor velocidade de crescimento folicular e maior diâmetro do folículo ovulatório estiveram associados a maior número de inseminações artificiais/ciclo. Na presença de uma concentração espermática adequada, o número de inseminações/ciclo não exerceu influência sobre a fertilidade.

Fertilidade do sêmen eqüino diluído, resfriado e transportado

Objetivou-se neste experimento estudar o efeito do transporte de sêmen equino, entre haras, sobre a fertilidade de éguas inseminadas. Setenta e seis fêmeas da raça Mangalarga Marchador foram distribuídas, ao acaso, com número desigual de repetições, para se estudarem os efeitos do sêmen in natura, transportado ou não, e do sêmen diluído, resfriado e transportado, sobre a fertilidade de éguas e diferentes características reprodutivas. O sêmen foi diluído no diluidor lactose-gema de ovo sem glicerina. As fêmeas foram inseminadas, em dias alternados, com sêmen de apenas um garanhão, com volumes/dose inseminante variáveis dependendo do número de fêmeas a serem inseminadas por dia com determinado ejaculado. Utilizou-se para o transporte do sêmen um contêiner especialmente projetado para este fim (MSP-1). As taxas de concepção ao primeiro ciclo e totais, a eficiência de prenhez, o número de ciclos/égua, ciclos/égua gestante, ciclo/prenhez e prenhez/ciclo, o número de IA/égua, o número de IA/égua gestante e o número de IA/égua vazia não foram influenciados pelos tratamentos. O diluidor de lactose gema, modificado pela retirada do glicerol de sua formulação, constitui uma opção para a diluição do sêmen a ser resfriado e transportado. O suceso do transporte do sêmen, diluído e resfriado, a pequenas distâncias, por período de tempo curto, depende mais de um bom diluídor que de um sofisticado contêiner de transporte.

Avaliação de uma Técnica de Diluição e Transporte de Sêmen Eqüino, para as Condições Brasileiras

Ninety-seven Mangalarga Marchador mares were allocated in a randomized experimental design, with different number of replicates per treatments. The objective of this experiment was to study the effect of raw (T3) or diluted, cooled semen transported to the breeding farms 1 (T1) and 3 (T2), on mare fertility and different aspects of reproductive efficiency. The mares were inseminated, with semen of only one stallion (Farm 2), on alternate days using different inseminating volumes, according to number of inseminated mares per day using only one ejaculate. For transportation, semen diluted in a lactose-egg yolk modified extender and the MSP-2 container were used. There was no difference among treatments in relation to conception rates of mares inseminated with raw or diluted, cooled and transported semen. Regardless of the farm, the total fertility obtained with cooled semen was 80% (52/65). The following variables were not affected by the treatments: cycles/mare, cycles/pregnant mare, cycles/pregnancy, pregnancy/cycle, number of inseminations/mare, number of inseminations/pregnant mare, number of inseminations/open mare and efficiency of pregnancy. However, the breeding farm had an effect on water and semen temperature in the container, time between collection and insemination, according to time and distance covered. Based on the results, cooling and transporting equine semen, using an extender, lactose-egg yolk without glycerine and the MSP-2 container should be recommended for short distances. The use of raw semen immediately after collection is also recommended.

Efeito de Diferentes Concentrações Espermáticas sobre a Fertilidade de Éguas Inseminadas com Sêmen Eqüino Diluído, Resfriado a 20oC e Transportado

One hundred and one estral cycles of 92 Mangalarga Marchador breed mares were analyzed to study the effect of different spermatic concentrations on different reproductive characteristics. The mares were inseminated with diluted equine semen, cooled at 20 degrees C and transported: T1-concentrations below 250 x 10(6) (177.58 +41.74 x 10(6) viable spermatozoa per inseminate dose), T2-concentrations between 250 and 350 10(6) sptz (315.51 +/- 20.78 x 10(6)), and T3-concentrations above 350 x 10(6) sptz (477.71 +/- 136.83 x 10(6)). The conception rates in the first cycle were 43.75 (7/16), 57.89 (11/19)and 54.55% (18/33) for treatments 1, 2 and 3,respectively. After five cycles, the conception rates were 36.00 (9/25), 44.12 (15/34) and 54.76% (23/42) for treatments 1,2 and 3, respectively. Concentrations of 177.58 +/- 41,74 x 10(6) viable spermatozoa perinseminate dose had moderate fertility index in a commercial program using cooled and transported semen.

Efeito de Diferentes Diluídores na Fertilidade de Éguas de Diferentes Haras Inseminadas com Sêmen Diluído, Resfriado e Transportado em Conteiner Especial

The effects of extender and farms on the fertility of sixty-five Mangalarga Marchador breed mares were studied. The mares were randomly assigned to a 2 x 2 factorial experiment, with two breeding farms (H1 and H2) and two extenders (glycine-egg yolk-T1 and lactose-egg yolk modified-T2), from only one stallion, with different number of replicates. The mares were inseminated, on alternated days, with diluted, cooled, transported semen, in a special container (MSP-2). There were no differences in the conception rate at first cycle, regardless of the breeding farm or extender used. Also. there was no difference among breeding farm or extender concerning the conception rate/cycle and the following reproductive characteristics: number of cycles/pregnancy, number of inseminations/mare, inseminations/pregnant mare, inseminations/open mare, water temperature in the container, temperature of semen in the container, time between collection and insemination and efficiency of pregnancy. The use of lactose-egg yolk modified extender for the dilution, cooling and transport of stallion semen between farms is recommended. The new container MSP-2 showed to be a option for the transportation between farms, for the same purpose.

Efeito de diferentes concentrações espermáticas sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen eqüino diluído, resfriado a 20°C e transportado

One hundred and one estral cycles of 92 Mangalarga Marchador breed mares were analyzed to study the effect of different spermatic concentrations on different reproductive characteristics. The mares were inseminated with diluted equine semen, cooled at 20°C and transported: T1 - concentrations below 250×10 6 (177.58±41.74×10 6 viable spermatozoa per inseminate dose), T2 - concentrations between 250 and 350 10 6 sptz (315.51±20.78×106), and T3 - concentrations above 350×10 6 sptz (477.71±136.83×10 6). The conception rates in the first cycle were 43.75 (7/16), 57.89 (11/19) and 54.55% (18/33) for treatments 1, 2 and 3, respectively. After five cycles, the conception rates were 36.00 (9/25), 44.12 (15/34) and 54.76% (23/42) for treatments 1, 2 and 3, respectively. Concentrations of 177.58±41,74×10 6 viable spermatozoa per inseminate dose had moderate fertility index in a commercial program using cooled and transported semen.

Artificial fertilization of oocytes and sperm activation in pacu: effects of the spermatozoa:oocyte ratio, water volume, and in natura semen preservation

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Comparative validation using quantitative real-time PCR (qPCR) and conventional PCR of bovine semen centrifuged in continuous density gradient

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Effect of sequence of insemination after simultaneous thawing of multiple semen straws on conception rate to timed AI in suckled multiparous Nelore cows

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Effects of discontinuous Percoll gradient centrifugation on the quality of bovine spermatozoa evaluated with computer-assisted semen analysis and fluorescent probes association

The objective of this study was to evaluate the quality of bovine frozen-thawed sperm cells after Percoll gradient centrifugation. Frozen semen doses were obtained from six bulls of different breeds, including three taurine and three Zebu animals. Four ejaculates per bull were evaluated before and after discontinuous Percoll gradient centrifugation. Sperm motility was assessed by computer-assisted semen analysis and the integrity of the plasma and acrosomal membranes, as well as mitochondrial function, were evaluated using a combination of fluorescent probes propidium iodide, fluorescein isothiocyanate-conjugated Pisum sativum agglutinin and 5,5',6,6'-tetrachloro-1,1',3,3'-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide. The procedure of Percoll gradient centrifugation increased the percentage of total and progressive sperm motility, beat frequency, rectilinear motility, linearity and rapidly moving cells. In addition, the percentage of cells with intact plasma membrane and mitochondrial membrane potential was increased in post-centrifugation samples. However, the percentage of sperm cells with intact acrosomal membrane was markedly reduced. The method used selected the motile cells with intact plasma membrane and higher mitochondrial functionality in frozen-thawed bull semen, but processing, centrifugation and/or the Percoll medium caused damage to the acrosomal membrane.

Detection of Leptospira spp. in the semen and urine of bulls serologically reactive to Leptospira interrogans serovar hardjo

O presente trabalho avaliou a PCR na detecção de leptospiras em sêmen e urina de dez touros sorologicamente reagentes, comparando seus resultados com aqueles obtidos por outras técnicas de diagnóstico. Foram realizadas duas colheitas de materiais em dias alternados. As amostras de sêmen e de urina foram separadas em alíquotas para visualização direta em microscopia de campo escuro, inoculação em hamsters (apenas para o sêmen), isolamento em meio de cultura e PCR. Nenhum hamster apresentou positividade na prova de soroaglutinação microscópica (SAM); fragmentos de rins e fígado desses animais foram utilizados para a tentativa de isolamento em meio de cultura, sendo positivo o cultivo a partir do rim de hamster inoculado com semen de um touro, e do fígado de hamsters inoculados com o semen de três touros. O isolamento em meio de cultura foi negativo para todas as amostras de sêmen, mas foi positivo para cinco amostras de urina. Na PCR não houve resultado positivo para as amostras de sêmen, e apenas uma amostra de urina apresentou resultado positivo, sendo coincidente com uma das culturas positivas. Não foi possível visualizar leptospiras em nenhuma das amostras por exame direto em microscopia de campo escuro.

Behavioural and seminal characteristics of Santa Ines rams subjected to successive semen collections in the Amazonian region

The objective of this study was to evaluate the reproductive performance of Santa Ines rams subjected to successive semen collections in an Amazonian climate. Four rams were subjected to successive ejaculations during a maximum period of three hours. This procedure was repeated three times at 15-day intervals. Sexual and behavioural (libido) and andrological (testicular and seminal) assessments were performed. A total of 81 ejaculates were collected. Libido and semen vigour, volume, appearance and concentration decreased as the ejaculation frequency increased (P<0.05) and sperm motility showed a decreasing trend (P=0.06). The seminal pH increased over the sequence of collections (P<0.05). The only significant differences observed between individual rams were the variable scrotal circumference and the percentages of live sperm and sperm abnormalities (P<0.05). All the parameters of the first ejaculation were within the normal range for this species, which suggests that the local climatic conditions (high temperature and humidity) did not affect the behavioural, testicular or seminal parameters of experimental rams. Our findings indicate that the reproductive performance of Santa Ines rams could be affected by the intensification of ejaculation frequency; however, individual male variation needs to be taken into consideration.