Molecular characterization and clonal diversity of methicillin-susceptible Staphylococcus aureus in milk of cows with mastitis in Brazil

Mastitis is an important disease for the dairy industry worldwide, causing economic losses and reducing milk quality and production. Staphylococcus aureus is a worldwide agent of this intramammary infection, which also causes foodborne diseases. The objective of this study was to determine the frequency of methicillin-susceptible Staphylococcus aureus (MSSA) isolates in milk of mastitis cows in Brazil and to analyze the genetic lineages and the content of antimicrobial resistance genes and virulence factors among these isolates. Fifty-six MSSA isolates were recovered from 1,484 milk samples (positive for the California mastitis test) of 518 cows from 11 different farms in Brazil (representing 51% of total Staph. aureus obtained), and they were further characterized. Methicillin-susceptible Staphylococcus aureus were isolated from 3.7% of California mastitis test-positive tested milk samples and from 6.2% of tested mastitic cows. Methicillin-susceptible Staphylococcus aureus isolates were characterized by spa typing, agr typing, and multilocus sequence typing, and resistance and virulence traits were investigated by PCR. Seven spa types were identified among MSSA (% of isolates): t127 (44.6), t605 (37.5), t002, t1784, t2066 (1.8), and 2 new ones: t10856 (10.7) and t10852 (1.8). Five distinct sequence types (ST) were detected (% of isolates): ST1 (46.4), ST126 (37.5), ST133 (10.7), ST5 (3.6), and a novel ST registered as ST2493 (1.8). Resistances were detected for streptomycin, chloramphenicol, and tetracycline. One strain contained the chloramphenicol resistance gene (fexA; included within transposon Tn558) and 3 strains contained the tetracycline resistance gene [tet(K)]. Methicillin-susceptible Staphylococcus aureus strains were susceptible to most of the antibiotics studied and lacked the virulence genes of Panton-Valentine leukocidin (lukF/S-PV), toxic shock syndrome toxin 1 (tst), exfoliative toxin A (eta), and exfoliative toxin B (etb), as well as the genes of the immune evasion cluster. Methicillin-susceptible Staphylococcus aureus isolates were detected in a relatively low proportion of cows with mastitis (6.2%) and recovered isolates presented high diversity of genetic lineages, with CC1 and CC126 the predominant clonal complexes, and CC133 also being detected. Larger epidemiological studies with molecular characterization of isolates are required to deepen the knowledge on the circulating genetic lineages among the cow population with mastitis. © 2013 American Dairy Science Association.

Escherichia coli strains isolated from the uteri horn, mouth, and rectum of bitches suffering from pyometra: virulence factors, antimicrobial susceptibilities, and clonal relationships among strains

Pyometra is recognized as one of the main causes of disease and death in the bitch, and Escherichia coli is the major pathogen associated with this disease. In this study, 70 E. coli isolates from the uteri horn, mouth, and rectum of bitches suffering from the disease and 43 E. coli isolates from the rectum of clinically healthy bitches were examined for the presence of uropathogenic virulence genes and susceptibility to antimicrobial drugs. DNA profiles of isolates from uteri horn and mouth in bitches with pyometra were compared by REP, ERIC, and BOX-PCR. Virulence gene frequencies detected in isolates from canine pyometra were as follows: 95.7% fim, 27.1% iss, 25.7% hly, 18.5% iuc, and 17.1% usp. Predominant resistance was determined for cephalothin, ampicillin, and nalidixic acid among the isolates from all sites examined. Multidrug resistance was found on ∼ 50% pyometra isolates. Using the genotypic methods some isolates from uteri, pus, and saliva of the same bitch proved to have identical DNA profiles which is a reason for concern due to the close relationship between household pets and humans.

Bamboo overabundance alters forest structure and dynamics in the Atlantic Forest hotspot

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Antimicrobial resistance and persistence of Staphylococcus epidermidis clones in a Brazilian university hospital

Oxacillin is an alternative for the treatment of Staphylococcus spp. infections; however, resistance to this drug has become a major problem over recent decades. The main objective of this study was to epidemiologically characterize coagulase-negative staphylococci (CoNS) strains recovered from blood of patients hospitalized in a Brazilian teaching hospital. Oxacillin resistance was analyzed in 160 strains isolated from blood culture samples by phenotypic methods, detection of the mecA gene, and determination of intermediate sensitivity to vancomycin on brain heart infusion agar supplemented with 4 and 6 μg/mL vancomycin. In addition, characterization of the epidemiological profile by staphylococcal cassette chromosome mec (SCC. mec) typing and clonal analysis by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) were performed. The mecA gene was detected in 72.5% of the isolates. Methicillin-resistant CoNS isolates exhibited the highest minimum inhibitory concentrations and multiresistance when compared to methicillin-susceptible CoNS strains. Typing classified 32.8% of the isolates as SCC. mec I and 50% as SCC. mec III. PFGE typing of the SCC. mec III Staphylococcus epidermidis isolates identified 6 clones disseminated in different wards that persisted from 2002 to 2009. The high oxacillin resistance rates found in this study and clonal dissemination in different wards highlight the importance of good practices in nosocomial infection control and of the rational use of antibiotic therapy in order to prevent the dissemination of these clones. © 2013 Elsevier Inc.

Caracterização do perfil clonal, fatores de virulência e determinação da resistência em Staphylococcus spp. isolados de leite ovino

Pós-graduação em Biologia Geral e Aplicada - IBB

Staphylococcus epidermis e Staphylococcus haemolycus: detecção de genes de biofilme, toxinas, resistência a antimicrobianos e tipagem clonal em isolados de hemoculturas

Pós-graduação em Biologia Geral e Aplicada - IBB

Can hydrogen peroxide and quercetin improve production of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla?

Vegetative propagation is considered the best choice for the rapid multiplication of plant species, however, rooting may still present difficulties. Substances, such as auxins, phenolic compounds and hydrogen peroxide, are recognized as able to improve this process. The aim of the present work was to determine if hydrogen peroxide in combination with quercetin or indole butyric acid, can modify some characteristics related to rooting and development in cuttings of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla. Cuttings were periodically evaluated at 30, 60 and 90 days according to the following criteria: height, diameter and survival percentage. After planting (90 days), a destructive evaluation was performed to determine rooting percentage, average size and number of roots. Polyamines content and polyamine oxidase activity, as biochemical markers of plant development, were determined. No statistically significant differences in height, diameter, survival and rooting percentage, root length and number of roots per cuttings were found. Treatments induced a decrease in putrescine levels and polyamine oxidase activity in roots. For absence of positive responses, the use of these substances as a treatment to improve cutting production is economically unviable.

Efeito do comprimento de estacas herbáceas de dois clones de umezeiro (Prunus mume Sieb & Zucc.) no enraizamento adventício

O umezeiro (Prunus mumeSieb & Zucc.) é uma rosácea de folhas caducas, nativa da China, cujos frutos e flores são muito apreciados pelos povos orientais. No Brasil, alguns estudos foram realizados visando a sua utilização como porta-enxerto para pessegueiro e nectarineira, dadas as suas características de adaptação, rusticidade, redução do porte da planta e compatibilidade com algumas cultivares de Prunus persica. O presente estudo foi conduzido em câmara de nebulização sob ripado, pertencente ao Departamento de Produção Vegetal da FCAV/UNESP, Câmpus de Jaboticabal-SP. Objetivou-se verificar a influência de quatro comprimentos de estacas herbáceas no enraizamento de dois clones de umezeiro. O material vegetal, identificado como Clone 10 e Clone 15, foi oriundo do Programa de Melhoramento Genético do Instituto Agronômico de Campinas-SP. O experimento foi constituido de fatorial 2 x 4, em blocos casualizados, sendo o fator clone em 2 níveis (Clone 10 e Clone 15) e o fator comprimento de estaca em 4 níveis (12; 15; 18 e 25cm). Pelos resultados observados, verificou-se diferença entre os clones somente na porcentagem de estacas brotadas e número de raízes por estaca. O comprimento da estaca influenciou na porcentagem de enraizamento e na mortalidade das estacas, sendo que estacas maiores tenderam a apresentar maiores porcentagens de enraizamento e menores de mortalidade. As estacas com 12cm, embora apresentando menor número de raízes por estaca, são recomendadas por permitirem a obtenção de um maior número de estacas por planta-matriz. Houve efeito significativo da interação entre os fatores para número e comprimento de raízes.

Propagação de três genótipos de abieiro (Pouteria caimito) por estaquia de ramos herbáceos

Foram selecionadas três plantas de um pomar comercial, com características agronômicas desejáveis, proveniente de propagação seminífera, que forneceram estacas herbáceas, contando com cerca de 15 cm de comprimento, um par de folhas no nó superior, corte em bisel na base e foram tratadas com 4 doses de IBA (0, 1.000, 3.000 e 5.000 mg.l-1) e, posteriormente, plantadas em caixas plásticas perfuradas contendo como substrato, vermiculita textura média. A condução do experimento foi em ambiente de 50 % de sombreamento, sob nebulização intermitente. A análise estatística foi em esquema fatorial 3X4, (genótipos X doses de IBA), com 4 repetições de 10 estacas cada. Após 90 dias foram avaliados a percentagem de enraizamento e sobrevivência, o comprimento e número médio de raízes por estaca. O IBA não influenciou as variáveis analisadas. O genótipo somente induziu mais raízes na seleção 3 e maiores raízes nas seleções 1 e 3.

Micropropagação de Croton antisyphiliticus Mart.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Enraizamento de estacas semilenhosas de lichieira utilizando ácido indolbutírico

O objetivo deste trabalho foi estudar o enraizamento de estacas semilenhosas de lichieira ( Litchi chinensis Sonn.) da cultivar Bengal, empregando ácido indolbutírico (AIB) e sistema de nebulização intermitente. As estacas apicais foram coletadas nos meses de outubro (Primavera), janeiro (Verão) e abril (Outono), acondicionadas adequadamente e transferidas para uma estufa com nebulização intermitente, onde receberam as aplicações de : 0; 1.000; 2.000; 3.000 e 4.000 mg L-1 de AIB, com imersão da base das estacas, durante 10 segundos, e de 200 mg L-1 de AIB, com imersão das bases por 24 horas, em aeração. em seguida, foram colocadas para enraizar em substrato de vermiculita, com casca de arroz carbonizada, na proporção de 1:1. Após 100 dias, foram obtidos os dados referentes à porcentagem de estacas vivas com folhas, porcentagem de estacas enraizadas por parcela, comprimento médio de raiz por estaca enraizada (cm), número médio de raízes formadas por estaca enraizada, massa média da matéria fresca das raízes (g), massa média da matéria seca das raízes(g). Pelos resultados, concluiu-se que não há necessidade da aplicação do AIB para o enraizamento de estacas de lichieira, cultivar Bengal, e que a melhor época de coleta das mesmas é o verão.

PRODUÇÃO DE MUDAS DE VIDEIRA 'RUBI' PELO MÉTODO DE ENXERTIA DE MESA em ESTACAS HERBÁCEAS DOS PORTA-ENXERTOS IAC 313 'TROPICAL' E IAC 766 'CAMPINAS'

Com o objetivo de estudar o método de enxertia de mesa em estacas herbáceas para a obtenção de mudas de videira, experimentos foram desenvolvidos em câmara de nebulização, localizada no ripado do Departamento de Produção Vegetal da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias da UNESP, no período de novembro de 1997 a dezembro de 1999. Foram utilizadas estacas herbáceas dos porta-enxertos IAC 313 'Tropical' e IAC 766 'Campinas' e borbulhas e garfos da cultivar Rubi. Foram testados os métodos de enxertia de garfagem em fenda cheia e de borbulhia em placa, em estacas herbáceas sem raízes e enraizadas, o tipo de proteção do enxerto, o tamanho das estacas e o recipiente de enraizamento. Foram avaliados o enraizamento e o pegamento de enxertos. O método de enxertia de mesa com garfagem e com proteção do enxerto com saco plástico apresentou maior pegamento de enxerto aos 30 (45,25%) e 60 dias (66,20%) após a enxertia. O tamanho da estaca não afetou o pegamento dos enxertos. Contudo, em todos os experimentos, o índice de sobrevivência dos enxertos foi muito baixo ou nulo. Estacas sem enxertia proporcionaram maior porcentagem de enraizamento (65,62%) em relação às estacas enxertadas. O método de enxertia de mesa em estacas herbáceas dos porta-enxertos IAC 313 'Tropical' e IAC 766 'Campinas' não foi eficiente para a formação de mudas de videira.

Capacidade de enraizamento de variedades de nespereira submetidas à poda de renovação

O presente trabalho avaliou a capacidade de enraizamento de cinco variedades de nespereira (Eriobotrya japonica Lindl.), sendo Champagne, Precoce de Itaquera, Mizuho, Mogui e Tanaka, obtidas pela poda de renovação. Estacas tenras apicais, contendo um par de folhas e cerca de 15 cm, foram tratadas por cinco segundos com ácido indolbutírico (IBA) (0; 1.000; 3.000; 5.000 e 7.000 mg.L-1). O experimento foi conduzido em câmara de nebulização intermitente pertencente à UNESP/FCAV (21º15'22 S e 48º18'58 W). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 5x5 (5 variedades e 5 concentrações de IBA), com 4 repetições e 10 estacas por parcela. As avaliações foram feitas após 90 dias. Os resultados indicaram um incremento de enraizamento e número de raízes crescente com a concentração de IBA utilizada, com exceção da variedade Mogui, que apresentou melhores resultados apenas quanto ao comprimento de raízes. Posterior ao transplantio, a sobrevivência das mudas foi alta (90%), apresentando condições de serem plantadas no campo, aos seis meses, ou de serem enxertadas aos oito meses, decorrido desde o estaqueamento.

Enraizamento de estacas de atemoieira ‘Gefner’ tratadas com auxinas

A propagação da atemóia deve ser feita assexuadamente e, nesse contexto, a estaquia surge como alternativa. Dessa forma, objetivou-se determinar a parte do ramo de atemoieira (Annona cherimola Mill. x Annona squamosa L.) cv. 'Gefner' mais apropriada para estaquia. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3x3 (reguladores x tipos de estaca), com 5 repetições de 12 estacas. Os reguladores utilizados foram AIB 0,5% e ANA 0,5%, aplicados na forma de talco na base das estacas, além da testemunha. Os diferentes tipos de estacas foram retirados de 3 regiões do caule (apical, mediana e basal). As estacas tratadas foram colocadas para enraizar em bandejas de poliestireno contendo substrato comercial Plantmax® e levadas para câmara de nebulização intermitente, onde permaneceram durante 136 dias. As variáveis avaliadas foram: porcentagem de estacas vivas, porcentagem de estacas vivas com enraizamento, porcentagem de estacas enraizadas com folhas remanescentes, com brotações e com folhas remanescentes + brotações, porcentagem de estacas enraizadas sem folhas, número, comprimento médio e massa da matéria seca de raízes por estaca enraizada, área foliar e massa da matéria seca de folhas remanescentes e brotações. A atemoieira apresenta maior potencial para formação de mudas por estaquia empregando-se estacas apicais sem tratamento e medianas tratadas com ANA (0,5%).

IBA e carboidratos no enraizamento de brotações procedentes de estacas radiciais de Rubus Spp.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)