Immunohistochemical expression of HLA-DR in the conjunctiva of patients under topical prostaglandin analogs treatment

PURPOSE: Subclinical inflammation may be observed in patients using topical antiglaucomatous drugs. The objective of this study was to investigate inflammation in conjunctiva of glaucoma patients using prostaglandin analogs, by the detection of an immunogenetic marker (HLA-DR) and compare the effect of 3 different drugs: latanoprost, bimatoprost, and travoprost in the induction of this inflammation. SUBJECTS AND METHODS: Thirty-three patients with primary open-angle glaucoma were evaluated without and with prostaglandin analogs topical therapy. Imprints of conjunctival cells were obtained, fixed on glass slides, and prepared for immunohistochemical analysis. RESULTS: Before the use of prostaglandin analogs, 4 of the 33 patients evaluated presented expression of HLA-DR in the conjunctiva (mild). After 1 month on prostaglandin analog treatment, all but 1 patient presented HLA-DR staining. HLA-DR expression of these 32 patients was scored as mild (19 patients), medium (11 patients), or intense (2 patients). The differences were statistically significant both when the presence and the increased expression of HLA-DR were considered (P<0.001). When the 3 different groups were analyzed (latanoprost, bimatoprost, and travoprost) no statistically significant difference was found (P=0.27). CONCLUSIONS: The use of prostaglandin analogs eye drops provokes a subclinical inflammatory reaction, observed by HLA-DR expression, even after a short period of treatment, independently of the class of the prostaglandin analogs used. © 2009 Lippincott Williams & Wilkins, Inc.

Frequency of different human mollicutes species in the mucosa of the oropharynx, conjunctiva, and genitalia of free-ranging and captive capuchin monkeys (Cebus spp.)

This study is the first to evaluate the occurrence of several Mollicutes species in Brazilian capuchin monkeys (Cebus spp.). Mollicutes were detected by culture and polymerase chain reaction (PCR) in samples of the oropharyngeal, conjuctiva, and genital mucosae of 58 monkeys. In the oropharynx, Mollicutes in general (generic PCR to the Class), and those of the genus Ureaplasma (genus PCR), were detected in 72.4% and 43.0% of the samples, respectively. The identified species in this site included: Mycoplasma arginini (43.1%), M. salivarium (41.4%), and M. pneumoniae (19.0%). Both Ureaplasma and Mycoplasma are genera of the order Mycoplasmatales. In the preputial/vaginal mucosa, PCR detected Mollicutes in general in 27.58% of the samples, the genus Ureaplasma in 32.7%, the species M. arginini in 8.6%, and Acholeplasma laidlawii of the order Acholeplasmatales in 1.7% In the conjunctiva, Mollicutes in general were detected in 29.3% of the samples, with 1.7% being identified as A. laidlawii. Culturing was difficult due to contamination, but two isolates were successfully obtained. The Mollicutes species of this study provided new insights into these bacteria in Brazilian Cebus. Studies are lacking of the actual risk of Mollicutes infection or the frequency at which primates serve as permanent or temporary reservoirs for Mollicutes. In the present study, the samples were collected from monkeys without clinical signs of infection. The mere presence of Mollicutes, particularly those also found in humans, nevertheless signals a need for studies to evaluate the impact of these microorganisms on the health of non-human primates (NHPs) and the possibility of cross-species transmission between NHPs and humans. © 2013 Wiley Periodicals, Inc.

Third eyelid gland protrusion in dogs: an experimental model proposal

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Exposição de fibroblastos da cápsula de Tenon normal de portadores de pterígio ao 5-fluorouracil e à mitomicina C

OBJETIVO: Avaliar a atividade proliferativa dos fibroblastos da cápsula de Tenon normal, proveniente de portadores de pterígios primários e recidivados. MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, aleatório, avaliando-se fragmentos da cápsula de Tenon normal, removidos de 20 portadores de pterígios primários e 21, recidivados. A taxa de proliferação foi avaliada em fibroblastos de terceira passagem, quando as culturas foram expostas a agentes antimitóticos: mitomicina C e 5-fluorouracil. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística. RESULTADOS: Dentre os 41 espécimes cultivados, apenas 1 de pterígio primário e 2 de recidivado proliferaram. Quando expostos a mitomicina C e ao 5-fluorouracil não houve diferença estatisticamente significativa quanto a inibição de proliferação celular. CONCLUSÃO: Desta forma, in vitro, ambos os antimitóticos estudados têm a mesma eficácia na inibição da proliferação sobre os fibroblastos de cápsulas de Tenon normal.

Carcinoma espinocelular de conjuntiva com evolução para exenteração: relato de caso

Portador de carcinoma espinocelular da conjuntiva teve a lesão removida, com recorrência em outra localização. O paciente recebeu ciclos de 5-Fluoruracila como tratamento adjuvante à remoção cirúrgica, apresentando evolução desfavorável que chegou à exenteração orbitária. São feitos comentários quanto ao uso de antimitóticos no tratamento destas lesões.

Análise do cultivo de fibroblastos de pterígios primários e recidivados e da cápsula de Tenon normal

OBJETIVO: Avaliar a atividade proliferativa dos fibroblastos da cápsula de Tenon, provenientes de explantes de pterígios primários e recidivados e da conjuntiva normal. MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, randomizado, avaliando-se 43 peças cirúrgicas, produto da exérese de 30 pterígios primários e 13 recidivados, além de fragmentos da cápsula de Tenon normal, obtida dos próprios portadores de pterígio. Foram avaliadas a taxa de proliferação, migração e confluência, analisadas segundo dados dos portadores como: idade, localização da lesão, tipo de lesão (tamanho, involutivo ou carnoso), primário ou recidivado. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística. RESULTADOS: Dentre os 30 pterígios primários cultivados, 70% migraram e proliferaram e 60% chegaram à confluência. A migração, proliferação e confluência iniciaram-se mais precocemente nas culturas de fibroblastos provenientes de pterígios em comparação àquelas provenientes da Tenon normal. Os pterígios recidivados apresentaram migração mais precoce que os primários. Não houve diferença estatisticamente significativa quanto ao início da migração, proliferação e confluência entre os pterígios carnosos ou involutivos, assim como entre os pterígios de graus I-II e os de graus III-IV. CONCLUSÃO: O cultivo celular de fibroblastos de pterígios é mais viável que o de Tenon normal. A migração, proliferação e confluência diferem em pterígios primários e recidivados. Pterígios carnosos e involutivos são semelhantes em cultura, assim como não existe diferença entre os pterígios segundo o tamanho da lesão.

Lack of papillomavirus (HPV) in pterygia of a Brazilian sample

OBJETIVO: Existem controvérsias a respeito da influência do papilomavirus (HPV) no desenvolvimento do pterígio. Assim, este estudo foi elaborado com o objetivo de verificar se o papilomavirus está presente na lesão. MÉTODOS: Trinta e seis portadores de pterígio unilateral foram operados, preparando-se o tecido removido e uma amostra de conjuntiva normal para exame de reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção de DNA. RESULTADOS: em todas as amostras do pterígio e da conjuntiva normal a pesquisa do DNA-papilomavirus por PCR resultou negativa. CONCLUSÃO: Segundo nossos resultados, o papilomavirus não é importante para o desenvolvimento do pterígio.

Segurança e efetividade no tratamento do pterígio usando infiltração de 5-fluoruracila no intraoperatório

OBJETIVO: Avaliar a segurança e a efetividade do uso do 5-fluoruracila (5-FU) como tratamento adjuvante do pterígio, aplicado sob a forma de infiltração subconjuntival, no período intraoperatório. MÉTODOS: Foram avaliados prospectivamente 125 indivíduos (125 olhos) portadores de pterígio. Os indivíduos foram operados segundo a técnica de retalho de deslizamento e receberam, ao final do procedimento, injeção subconjuntival de 0,2 mL de 5-FU (25 mg/mL). Foram anotados os dados do paciente como idade, sexo, profissão, características da lesão (primário ou recidivado, tamanho, carnoso ou involutivo) e feito seguimento pós-operatório, aos 7, 21, 60 e 180 dias. Os dados foram submetidos à avaliação estatística. RESULTADOS: Não foram observados casos de complicação decorrente do uso do 5-FU em injeção no intraoperatório do pterígio. A taxa de recidiva geral observada aos 180 dias de pós-operatório foi de 35,8%, sendo de 35,7% para os pterígios primários e de 36,4% para os recidivados. CONCLUSÃO: A aplicação do 5-FU no período intraoperatório sob a forma de infiltração subconjuntival é segura. Entretanto, ainda resulta em altas taxas de recidiva e novos estudos devem ser realizados a fim de conhecer a concentração/dose ideal que permitirá menores chances de recidiva da lesão.

Tratamento do pterígio recidivado por transplante autólogo de conjuntiva

Objetivo: Avaliar a resposta ao tratamento do pterígio recidivado, usando a técnica do transplante autólogo de conjuntiva. Métodos: Foi realizado estudo retrospectivo de 36 pacientes (36 olhos), portadores de pterígio recidivado, submetidos a transplante autólogo de conjuntiva. O tempo de seguimento mínimo foi de seis meses. Resultados: Observou-se recidiva em 41,6% dos pacientes, perda do enxerto em 5,5% e deiscência de sutura em 2,7%. Conclusões: O transplante de conjuntiva é procedimento com baixo índice de complicações. Porém, quando usado no tratamento do pterígio recidivado, a taxa de recorrência permanece alta.

Microbiota conjuntival de cães sadios da cidade de Araçatuba (SP)

Objetivo: Identificar os microrganismos da conjuntiva ocular de cães clinicamente sadios na região de Araçatuba (SP), no verão e no inverno. Métodos: Foram utilizados quarenta cães, machos e fêmeas, com idade variando entre 2 e 5 anos. Após limpeza ocular com água tratada, foram realizadas colheitas de material do saco conjuntival inferior com auxílio de swabs estéreis, para posterior isolamento e identificação de bactérias aeróbicas, anaeróbicas e fungos. Resultados: As bactérias de maior ocorrência foram o Staphylococcus aureus e o Staphylococcus beta-haemolyticus. O fungo de maior ocorrência foi Penicilium sp. Conclusão: Pôde-se concluir que houve variação da microbiota conjuntival normal em função da estação do ano. Dos microrganismos isolados, o único que apresentou diferença estatística significativa quanto à incidência sazonal foi o Staphylococcus beta-haemolyticus, que foi isolado apenas no inverno.

Regeneration of the Corneal Epithelium after Debridement of its Central Region: An Autoradiographic Study on Rabbits

Purpose: To investigate the proliferative behavior of the corneal and limbal epithelia after debridement on the central region of the rabbit cornea. Methods: After scraping a circular epithelial area, 5 mm in diameter, in the center of the cornea, (3)H-thymidine ((3)H-TdR) was injected intravitreally, and the rabbits killed from 1 to 49 days afterward. The cornea, together with the adjacent conjunctiva, was processed for autoradiography. Results: The regenerating epithelium at the center of the cornea exhibited high frequencies of labeled nuclei when compared to controls. The mitotic indexes for the limbus were comparable in experimental and control eyes. The unique basal stratum of the limbal epithelium exhibited quick proliferation and vertical migration in all eyes. Cells that remained labeled for four weeks or more were observed throughout the corneal epithelium, including its basal stratum, and this did not depend on epithelial damage. Conclusion: Corneal epithelium wounds are healed by sliding and proliferation of cells surrounding the epithelial gap without any evidence for the participation of the limbal epithelium. Daughter cells labeled with (3)H-TdR were visualized in all layers of the corneal epithelium up to 7 weeks after the DNA precursor injection. However, at this long interval, the only labeled cells in the limbus were in the suprabasal layers.

Morphological and autoradiographic studies on the corneal and limbal epithelium of rabbits

The investigation was centered on the morphological features of the conjunctiva-cornea transition (limbus) of the rabbit eye and the proliferative behavior of its epithelium. The eyes were processed for examination with light and electron microscopy, as well as for autoradiography after intravitreal injection of [H-3]thymidine ([H-3]TdR). At the sites of extraocular muscle insertion, the vascularization of the stroma extended to the peripheral cornea, and the limbal epithelium was thin with its basal stratum made up by clear cuboidal cells. In between the muscle insertions, the cuboidal clear cells, as well as the stroma blood vessels; were scarce. At the light microscope level, the basement membrane was distinct in the cornea but not in the limbus or the conjunctiva. Autoradiographs demonstrated that, at the limbus, the basal cells migrated very quickly to the suprabasal region and remained there up to the 28-day interval. Labeled cells were identified in all epithelial layers of the cornea, including the basal one, at 21 and 28 days but not in the limbal basal clear cells. The rate of renewal of conjunctival epithelium was similar to that observed for the transition with scarce clear cells. The high-resolution autoradiographs demonstrated that the basal cuboidal clear limbal cells exhibit a quick renewal and that they are not label-retaining cells. These latter ones were detected all over the corneal epithelium and in the suprabasal layers of the limbus up to 28 days, in physiological conditions, without the need of stimulation by damage to the corneal epithelium.

Histopathological findings and detection of parasites in the eyes of dogs infected naturally with Leishmania chagasi

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Conjunctival impression cytology in dogs

Objective Ocular conjunctivas of healthy dogs were studied by conjunctival impression cytology for evaluation of feasibility, protocol standardization, and normal cytologic pattern recognition of this technique.Animals studied Twenty healthy, adult, cross-breed dogs.Procedures Samples of the bulbar conjunctiva were collected after instillation of topical anesthetic drops at the ocular surface. Impression cytology was performed by applying asymmetric strips of Millipore filter on the superior temporal bulbar conjunctiva near the limbus. The filter strip was gently pressed against the conjunctiva for 5 s and removed with a peeling motion. Samples were immediately fixed in 95% ethyl alcohol, stained with periodic acid-Schiff and hematoxylin, and mounted on slides cover-slipped using synthetic resin. The slides were examined by light microscopy.Results Microscopic examination of the impressions revealed superficial, intermediate and basal epithelial cells arranged in sheets. Keratinized epithelial cells, goblet cells and leukocytes, as well as cellular debris and mucus were observed.Conclusions Feasibility of impression cytology for sampling the bulbar conjunctiva of the dog and the standardization the the proposed protocol was shown. The results allowed the recognition the the normal cytologic pattern of healthy conjunctivas in dogs.

Mast cells in the developing avian eye

Mast cells are present in the eye of Gallus domesticus, appearing in the anterior uvea in embryos at stage 39 HH (13th day). In hatching and adult birds, they are present in the sclera, uvea, pectinate Ligament, and conjunctiva. Mast cells are absent in the cornea, retina, and pecten oculi.Maturing mast cells in the anterior eye segment appear as round cells having eccentric nuclei and a few cytoplasmic metachromatic granules, whose fluorescence increases during development. Mature cells are more numerous in late development, and their cytoplasm is rich in metachromatic and intensely fluorescent granules. Ultrastructurally, maturing mast cells display progranules and a few electron dense and homogeneous granules on one side of the cell. Mast cells of adult birds possess homogeneous cytoplasmic granules, some of which display protuberances that penetrate hollows of adjoining granules. Heterogeneous granules exhibiting latticed and mottled patterns are also present. The existence of mast cells in the anterior eye segment indicates that these cells might perform a physiological role during development and in aqueous humor outflow. They might modulate exchanges between blood and aqueous humor through chemical mediators present in their granules. (C) 1996 Wiley-Liss, Inc.