1 resultado para Crisler, Herbert O. (Fritz)
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Resumo:
Este trabalho foi realizado com o objetivo de isolar e identificar os alcalides presentes nas espcies H. vittatum e H. striatum, analisar a atividade antitumoral, inibidora da enzima acetilcolinesterase, antioxidante dos extratos e alcalides obtidos, realizar ensaio de toxicidade para o alcalide montanina, bem como observar sua atividade em pesquisa bsica do comportamento em roedores e verificar comparativamente a modulao da montanina e da galantamina sobre a via de sinalizao das protenas quinases pRaf/pMEK/pERK/pCREB. Mtodo: Fitoqumico: As partes areas e subterrneas das espcies coletadas foram maceradas em etanol e processadas em extrao cido-base para a obteno dos extratos diclorometano e n-BuOH. Os alcalides isolados foram identificados com a utilizao de mtodos cromatogrficos, espectromtricos e espectroscpicos. Testes in vitro: Atividade antitumoral: Os extratos e alcalides obtidos foram avaliados em mtodo in vitro, onde se aplicaram clulas tumorais biopsiadas de humanos. Inibio da enzima acetilcolinesterase: Os compostos isolados, montanina (Hv1 e Hv2), vitatina (Hv4), pancracina (Hv5) e Hv6 de H. vittatum e a galantamina foram testados em ensaio de bioautografia por cromatografia em camada delgada (CCD) com 1-naftil acetato. Atividade antioxidante: Os compostos anteriormente citados foram testados pelo mtodo que utiliza o difenilpicrilhidrazol (DPPH) em CCD. Testes in vivo: Toxicidade da montanina (24 horas): A montanina foi administrada com doses de 10 a 100 mg/kg i.p. em camundongos e a toxicidade observada por 24 horas comparando-se aos grupos controle. A dose letal mediana foi calculada com mtodo dos probitos. Avaliao da atividade central da montanina: Foram realizados experimentos com camundongos machos em Campo Aberto (CA), Nado Forado (NF), Labirinto em Cruz Elevado (LCE), Induo do Sono por Pentobarbital (ISP) e sobre a consolidao da memria em ratos (esquiva inibitria passiva). Anlise bioqumica da via das MAPKs: Aplicou-se metodologia in vitro em homogenatos (fatias hipocampais) tratados com os alcalides montanina ou galantamina. A obteno dos resultados ocorreu a partir da realizao de eletroforese de alta voltagem e Western Blot. Resultados e Concluses: A partir dos extratos de alcalides totais de H. vittatum foram isoladas cinco substncias: (a) Hv1 (montanina 0,007%) isolado do extrato diclorometano de folhas, (b) Hv2 (montanina 0,09%), (c) Hv3 (licorina 0,003%) e (d) Hv4 (vitatina 0,0003%), isolados do extrato diclorometano de bulbos. Do extrato n-BuOH dos bulbos foram isolados o alcalide Hv5 (pancracina 0,0025%) e o composto Hv6 (0,0034%). Da espcie H. striatum foi isolado o alcalide licorina (Hs3) e dois compostos no identificados (Hs1 e Hs3). O alcalide vitatina demonstrou inibir moderadamente o crescimento das clulas tumorais com os valores de IC50 29 g/ml. A montanina apresentou o maior efeito antiproliferativo entre os produtos testados. Os valores de IC50 foram menores que 1,0 g/ml para as linhagens testadas. Os extratos diclorometano e n-BuOH de H. vittatum foram considerados antiproliferativos para as clulas tumorais humanas empregadas, com valores de absorvncia 25% menores que o controle. Para as atividades inibidoras da enzima acetilcolinesterase e antioxidante, somente o composto Hv6 apresentou ao. A dose letal mediana para a montanina em camundongos machos foi calculada em 64 mg/kg i.p. A montanina no alterou a locomoo e a atividade exploratria de camundongos quando administrada pela via intraperitoneal (i.p.) nas doses de 10 e 30 mg/kg (CA). Na avaliao da atividade central da montanina administrada por via i.p., observamos atividade ansioltica (0,1; 1,0; 3,0 mg/kg LCE), antidepressiva (3,0 mg/kg - NF) e tendncia para atividade hipntica (ISP). No paradigma de memria de esquiva inibitria passiva, a montanina no alterou significativamente o comportamento dos ratos wistar, na via de administrao e nas doses testadas. Na investigao comparativa da modulao da via de sinalizao das MAPKs (envolvidas com a memria) em fatias hipocampais tratadas (ratos), concluiu-se que a montanina e a galantamina aumentam a fosforilao (atividade) das protenas testadas. Os resultados obtidos para a galantamina sugerem um possvel mecanismo de ao que explique bioquimicamente uma de suas aes que contribuem para a melhora da memria em ratos na esquiva inibitria.
