68 resultados para Células Adesão - Teses
Resumo:
A mielopoiese depende do estroma mielossuportivo tanto no que diz respeito a produo de fatores de crescimento como de proteoglicanos de heparan-sulfato. O ambiente intercelular formado entre células do estroma e células progenitoras mielides possui caractersticas cidas, conferidas por molculas carregadas negativamente e sensveis a sialidase. Gangliosdios, glicoesfingolipdios contendo pelo menos uma molcula de cido silico, tm sido relacionados modulao de fatores de crescimento e diferenciao de células hematopoiticas. Neste trabalho, estudamos a produo, a distribuio e o papel dos gangliosdios em um modelo experimental in vitro de mielopoiese dependente do estroma derivado de fgado fetal murino AFT-024. Utilizamos como sistema de resposta para o monitoramento da disponibilidade e atividade local de GM-CSF a linhagem celular precursora mielide FDC-P1, a qual dependente de GM-CSF para sua sobrevivncia e proliferao. O GM3 foi o principal gangliosdio produzido pelo estroma, mas no pelas células mielides, sendo requerido para que a funo mielossuoprtiva do estroma seja tima. Este gangliosdio foi liberado para o sobrenadante de cultura das células AFT-024 e seletivamente incorporado pelas células progenitoras mielides, onde foi segregado em rafts e colocalizou-se com a cadeia do receptor de GM-CSF. Alm disso, o gangliosdio GM3 foi encontrado na frao insolvel de células AFT-024 tratadas com Triton X-100 a 4C, estando presente tambm nas fraes menos densas do fracionamento em gradiente de sacarose, indicando sua presena em rafts. O GM3 captado pelas células FDC-P1 foi metabolizado, gerando gangliosdios das sries a e b, da mesma forma que o GM3 endgeno. Nestas células, o GM1 o principal gangliosdio, tambm sendo encontrado na interface entre estroma e células mielides, mas com colocalizao apenas parcial com a cadeia do receptor de GM-CSF. As imagens de imunocitoqumica ainda revelaram que o GM1 no apresenta colocalizao significante com a cadeia do receptor de GM-CSF, com o gangliosdio GM3, ou com CD44. Em um outro grupo de experimentos, analisamos o perfil de sntese e shedding de gangliosdios em um estroma derivado de medula ssea, a linhagem celular S17; na linhagem celular GRX, derivada de células estreladas hepticas isoladas de reao fibro-granulomatosa inflamatria; e em cultivos primrios de fibroblasto de pele murinos. Alm disso, comparamos a habilidade destes estromas para sustentar a sobrevivncia e a proliferao das células precursoras mielides. A concentrao de cido silico reflete a capacidade mielossuportiva dos estromas. Embora os diferentes estromas sintetizem os mesmos gangliosdios, existem diferenas no contedo relativo de cada gangliosdio. Aparentemente, o GM3 o principal gangliosdio envolvido na modulao da atividade dos fatores de crescimento. O shedding foi similar ao perfil de sntese de gangliosdios, mas a atividade mielossuportiva dos sobrenadantes foi diferente entre os tipos celulares e em relao a sustentao por contato. No entanto, a proliferao das células FDC-P1 diminuiu em todos os sobrenadantes obtidos de células estromais em que a sntese de gangliosdios foi inibida e onde o gangliosdio GM3 foi neutralizado pelo anticorpo monoclonal anti-GM3. As diferenas encontradas na capacidade de sustentao da proliferao de células progenitoras mielides por fator de crescimento solvel ou apresentado podem estar relacionadas a diferenas na concentrao de gangliosdios inseridos na membrana plasmtica ou liberados para o meio de cultura. Sendo assim propomos que as células do estroma mielossuportivo produzem e secretam os fatores de crescimento necessrios e seus cofatores, tais como proteoglicanos de heparan-sulfato. O estroma tambm fornece gangliosdios, os quais so transferidos do estroma para as célulasalvo, onde geram domnios de membrana especficos contendo complexos macromoleculares que incluem os receptores para fatores de crescimento.
Resumo:
Biofilmes bacterianos na indstria de alimentos freqentemente so prejudiciais, uma vez que podem abrigar patgenos e deteriorantes que contaminam os produtos. Este trabalho se props a avaliar e correlacionar o papel dos fatores de adesão e da hidrofobicidade na formao de biofilmes em diversos materiais. Leite in natura foi aliquotado em tubos contendo corpos de prova constitudos de vidro, polipropileno, ao inoxidvel e pano de algodo e incubados em 10 C e 25 C. Aps 2 h, 5 h e 8 h de contato, as células no aderidas foram removidas da superfcie dos materiais, e as aderidas contadas em PCA. Foram isolados e identificados microrganismos dos biofilmes, sendo verificada a produo de cpsula (colorao com vermelho congo), fmbria (hemaglutinao em placa), hemolisinas (gar sangue) e proteases (gar leite). As hidrofobicidades celular e dos materiais foram determinadas pelos testes de agregao com sulfato de amnio e do ngulo do raio da gota sssil, respectivamente. Verificou-se a adesão de consrcios formados por E. coli, S. aureus e B. cereus. Os 103 isolados obtidos pertencem, principalmente, a espcies da famlia Enterobacteriaceae (46) e do gnero Staphylococcus (45). Na produo de fatores de virulncia, 50,4% dos isolados produziram cpsula, 48,5% produziram fmbria, 55,3% hemolisina e 20,3% proteases. Dos microrganismos Gram-positivos e Gram-negativos, 86,6% e 84,4% foram positivos para o teste de hidrofobicidade, respectivamente. O ao inoxidvel foi o material mais hidrofbico testado, seguido por polipropileno e vidro. A temperatura de 25 C e o polipropileno foram os maiores favorecedores de adesão dos consrcios bacterianos.
Resumo:
Desde o incio da histria taxonmica de Relbunium, muitos foram os trabalhos que enfatizaram sua autonomia e posio taxonmica. Atualmente, alguns estudos sugerem que as espcies pertencentes a Relbunium devam ser includas em uma seo do gnero Galium. Porm, recentes estudos moleculares na tribo Rubieae, destacam Galium como um grupo parafiltico, e Relbunium como um gnero independente e monofiltico. O problema taxonmico referente a Galium e Relbunium de difcil soluo, devido ausncia de estudos que integrem caracteres morfolgicos, ecolgicos e moleculares. No presente trabalho objetivou-se adicionar informaes para o conhecimento bsico das espcies de Relbunium e Galium para o sul do Brasil, a partir de caracteres morfolgicos e moleculares, buscando responder a seguinte questo: Relbunium pode ser considerado um gnero ou apenas uma seo dentro de Galium?. Para atingir os objetivos, foi analisada a morfologia das espcies, com nfase nas folhas, flores e frutos para duas espcies de Galium e treze de Relbunium: G. latoramosum, G. uruguayense, R. equisetoides, R. gracillimum, R. hirtum, R. humile, R. humilioides, R. hypocarpium, R. longipedunculatum, R. mazocarpum, R. megapotamicum, R. nigro-ramosum, R. ostenianum, R. richardianum e R. valantioides. Chaves de identificao foram geradas a partir dos resultados das anlises morfolgicas. As folhas foram analisadas quanto forma, pice, padro de venao, tricomas, estmatos, distribuio de idioblastos secretores e vascularizao do hidatdio. Esses caracteres no evidenciaram a separao entre os gneros, auxiliando apenas na individualizao das espcies. A morfologia das flores e frutos auxiliou na diferenciao dos gneros e espcies estudadas. As flores so comumente bispricas, a exceo de G. latoramosum. Brcteas involucrais, ausentes em Galium, esto presentes nas espcies de Relbunium, de duas a quatro; nesse gnero h presena de antopdio, ausente em Galium. A corola possui tricomas glandulares unicelulares na face adaxial, e na face abaxial os tricomas, quando presentes, so simples e idioblastos secretores esto presentes apenas em R. gracillimum. O androceu tem quatro estames alterniptalos e exsertos, com anteras dorsifixas e tetrasporangiadas, de deiscncia longitudinal. O ovrio nfero, bicarpelar, bilocular, com um rudimento seminal antropo e unitegumentado por lculo. O desenvolvimento dos frutos, a estrutura do pericarpo e da testa foram descritos. Os frutos so do tipo baga, em R. gracillimum e R. hypocarpium, ou esquizocarpo, nas demais espcies. A consistncia do pericarpo pode variar de carnosa, nos frutos do tipo baga, a levemente seca, nos frutos esquizocarpos. Entre as espcies, observou-se uma variao com relao ao exocarpo, que pode ser liso, piloso ou com idioblastos secretores. A testa constituda por apenas uma camada de células, que em R. hypocarpium mostra-se descontnua. Alm das descries morfolgicas, foram realizados estudos moleculares das espcies, atravs do seqenciamento de fragmentos do DNA nuclear (ITS) e plastidial (trnL-F). A partir dos resultados obtidos formam elaborados cladogramas com base nos dados morfolgicos e moleculares. O cladograma construdo a partir dos dados morfolgicos (vegetativos e reprodutivos) evidenciou a distino dos dois gneros, ou seja, sustenta Relbunium como txon independente. Nesse cladograma observa-se que a VI presena ou ausncia de brcteas foi determinante, e proporcionou a separao dos gneros. A uniformidade dos caracteres morfolgicos vegetativos entre as espcies auxiliou apenas na distino das espcies de Relbunium. Com relao aos dados moleculares, os fragmentos de DNA utilizados mostraram-se pouco informativos. A anlise do fragmento ITS, em especial, contribuiu para confirmao da relao entre algumas espcies (R. hirtum e R. ostenianum, e R. humile e R. mazocarpum). A anlise combinada dos dados morfolgicos e moleculares no caracterizou Relbunium como um clado monofiltico, sendo sua manuteno no sustentada, isso, principalmente, devido falta de diferenas moleculares entre as espcies. Conclui-se que para o grupo em questo as anlises morfolgicas, das folhas, flores e frutos, foram suficientes para destacar Relbunium como um gnero autnomo e monofiltico na tribo Rubieae.
