A suite of parallel vectors for baculovirus expression

The expression of proteins using recombinant baculoviruses is a mature and widely used technology. However, some aspects of the technology continue to detract from high throughput use and the basis of the final observed expression level is poorly understood. Here, we describe the design and use of a set of vectors developed around a unified cloning strategy that allow parallel expression of target proteins in the baculovirus system as N-terminal or C-terminal fusions. Using several protein kinases as tests we found that amino-terminal fusion to maltose binding protein rescued expression of the poorly expressed human kinase Cot but had only a marginal effect on expression of a well-expressed kinase IKK-2. In addition, MBP fusion proteins were found to be secreted from the expressing cell. Use of a carboxyl-terminal GFP tagging vector showed that fluorescence measurement paralleled expression level and was a convenient readout in the context of insect cell expression, an observation that was further supported with additional non-kinase targets. The expression of the target proteins using the same vectors in vitro showed that differences in expression level were wholly dependent on the environment of the expressing cell and an investigation of the time course of expression showed it could affect substantially the observed expression level for poorly but not well-expressed proteins. Our vector suite approach shows that rapid expression survey can be achieved within the baculovirus system and in addition, goes some way to identifying the underlying basis of the expression level obtained. (c) 2006 Elsevier Inc. All rights reserved.

Les variations formelles d'un moule stylistique: rubrique, texte et image à la charnière du Merlin et de sa Suite Vulgate

Le passage du Merlin propre à sa Suite Vulgate, espace de suture entre le texte et sa continuation est dans la tradition manuscrite l'objet de variances et de déplacements. A la paix annoncée à la fin du Merlin succède en effet le conflit qui oppose le jeune roi Arthur à ses barons. Les passages de rubrication et d'entrelacement sont le lieu privilégié de variations formelles gommées par l'adoption et la reprise de moules stylistiques attendus. Ceux-ci exhibent tout en les masquant de subtiles divergences relevant de partis pris à la fois narratifs, interprétatifs et idéologiques.

'Conment Merlin se mua en guise de cerf' : écrire et représenter la métamorphose animale dans les manuscrits enluminés de la Suite Vulgate du Merlin

Les manuscrits enluminés du Merlin illustrent l’arrivée du personnage transformé en cerf à la table de Jules César, mais sa transformation elle-même n’est jamais représentée. Cette intervention théâtralisée permet ultimement de dénoncer les faux semblants et le désordre qui règnent autour de l’empereur. Elle a une dimension purgative, visant la restauration de l’ordre moral, politique et sexuel, tout en promouvant une démarche heuristique placée au cœur du processus de lecture et d’interprétation.

'Si en i ot de teus qui i conterent plus lor honte que leur honour', Enadain et Gauvain, les chevaliers transformés en nains dans la Suite Vulgate du Merlin

Dans le récit de la transformation de Gauvain en nain, la honte est à la fois la conséquence d'une culpabilité mise en avant par un interlocuteur féminin, et l'instrument de la purgation de la faute commise par le héros. La gestion narrative de cet épisode à la fois dramatique et comique interroge autant les valeurs chrétiennes que les principes de conduite chevaleresques. La nature de la faute et son intériorisation personnelle importent moins que sa dimension sociale et collective.

Composition cyclique et programme d’illustrations. L’épisode de Grisandole dans le manuscrit enluminé de la Suite Vulgate du Merlin, B. L. Add. 10292

L'étude du texte et de l'illustration de l'épisode romain dans la Suite Vulgate du Merlin du manuscrit British Library Add. 10292 (XIVe s.) permet d'explorer la relation entre l'amplification cyclique à l'œuvre dans ce passage au statut textuel complexe et le développement spécifique d'une série voire d'un cycle d'illustrations.

Le festin de l'homme sauvage dans la 'Suite Vulgate du Merlin' et le 'Roman de Silence': l'attrait de la nourriture et la mise en scène paradoxale du personnage de Merlin

Cette étude comparative de la Suite Vulgate et du Roman de Silence, focalisée sur le guet-apens qui attire Merlin dans les mailles du filet de Grisandole / Silence, explore la façon dont l’apparition de Merlin en homme sauvage et son comportement face à la nourriture éclairent son mode d’action, son identité et ses intentions. La capture spectaculaire de Merlin et sa transformation permettent de creuser la question centrale du rapport entre Nature et Noreture et du travestissement de Grisandole / Silence.

"De rappels en prédictions, savoir convaincre et savoir agir : le rôle ambigu de Merlin, de la naissance d'Arthur à son accès au trône de Bretagne (dans le Merlin en prose et la Suite Vulgate)"

Bénéficiant de la connaissance du passé, du présent et du futur, Merlin ne se contente pas de rappeler, observer, ou prédire, mais il agit et influence le cours de l'histoire en favorisant la conception problématique d'Arthur. L'étude porte sur la nature et la portée de son investissement dans une trame narrative où il n'a de cesse d'argumenter, de convaincre, et de se justifier.

La Suite Vulgate, 'Suite historique' du Merlin? Histoire et roman dans un récit arthurien en prose

La Suite Vulgate, une œuvre d'orientation à la fois romanesque et historique, interroge la pertinence des constructions et catégories génériques dans la littérature médiévale. Afin de mieux cerner le statut de cette œuvre hybride, cet article explore les questions de l'écriture de l'histoire, la terminologie à travers laquelle l'œuvre s'auto-désigne, son rapport à la temporalité, et le mode de représentation de l'histoire que propose le texte.

Arthur et ses barons rebelles: la fin remaniée et abrégée de la Suite Vulgate dans le manuscrit du cycle du Graal, Paris, BNF fr. 344

The ms. Paris, BnF, fr. 344 was produced in Lorraine at the end of the thirteenth century and contains the whole Lancelot-Grail cycle. It presents an abridged version of the end of the Vulgate Sequel to Merlin. The rewriting of the end of the sequel glosses over the romantic episodes of the common version and focuses on the figure of Arthur, a legitimate sovereign and skilful war leader confronted by his barons’ dissidence. From the end of f° 182 to f° 184v°, BnF, fr. 344, narrates the departure of Kings Ban and Bohort for the Continent, the embassy of King Loth and his sons, and the fight against the Saxons of the Christian coalition gathered at Logres for the feast of the Holy Cross. This article shows the ideological implications of the abridgement and the illustration used at the end of the Vulgate Sequel in ms. fr. 344, as it exalts Arthur’s kingship and insists on the rallying, penance and submission of his rebelled vassals.