64 resultados para Pulse width modulation
Resumo:
La relocalisation et la degradation mediee par ubiquitination sont utilisees par la cellule pour controler la localisation et lexpression de ses proteines. LE3 ubiquitine ligase MARCH1 est implique dans la regulation post-traductionnelle de CMH-II et de CD86. Dans ce memoire, on propose un role additionnel a MARCH1. Nos resultats experimentaux nous portent a croire que MARCH1 pourrait moduler le metabolisme cellulaire en favorisant la relocalisation et la degradation denzymes impliquees dans la glycolyse. La grande majorite des cellules utilise la phosphorylation oxydative pour generer de lATP en presence doxygene. Dans un environnement hypoxique, cette derniere est non fonctionnelle et la cellule doit utiliser la glycolyse anaerobique pour produire son ATP. Une cellule cancereuse a des besoins energetiques superieurs en raison de laugmentation de sa biomasse et de sa proliferation incontrolee. Pour subvenir a ces besoins, elle maximise sa production denergie en modifiant son metabolisme; cest leffet Warburg. On retrouve dans les cellules immunitaires des modifications similaires au metabolisme cellulaire suite a un signal dactivation. Ici, nous montrons que la respiration mitochondriale maximale, la reserve respiratoire et la glycolyse maximale sont diminuees dans les cellules presentatrice dantigenes qui expriment MARCH1. Nous avons montre que MARCH1 etait localisable au niveau de la mitochondrie, ce qui lui permet dinteragir avec les enzymes de la glycolyse. Finalement, nous avons quantifie lexpression de Eno1 et de LDHB par Western Blot, pour montrer une augmentation de lexpression de ces enzymes en absence de MARCH1. A la lumiere de ces resultats, nous discutons des avantages que procure la diminution de lexpression de MARCH1 dans un contexte inflammatoire, suite a lactivation des cellules presentatrices dantigenes. Ce phenomene permettrait une presentation antigenique plus efficace, une augmentation de la production denergie et une meilleure resistance aux ROS produits lors de la reponse inflammatoire.
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Linflammation fait partie des processus ractionnels de dfense dont dispose lorganisme en rponse aux agressions, assurant lintgrit de lhte. En rponse au dommage tissulaire, plusieurs mdiateurs inflammatoires interviennent dans le processus de linflammation. Lors de ces dommages, des signaux de dangers provenant de cellules endommages sont relchs dans lenvironnement tissulaire, pouvant causer des dommages cellulaires et tissulaires. Les macrophages, tout comme dautres cellules, peuvent tre activs par ces signaux de danger, menant la scrtion de molcules telles que des cytokines et des chimiokines pouvant modifier le microenvironnement tissulaire. Les insultes au tissu sain peuvent entrainer la mort cellulaire telle que lapoptose. Les molcules pouvant tre relches lors de celle-ci contribuent au microenvironnement, notamment de par linfluence de celles-ci sur le macrophage. Parmi ces mdiateurs, nous avons identifi le Milk Fat Globule-Epidermal growth factor 8 (MFG-E8), un acteur important dans la rsolution de linflammation, comme tant relch spcifiquement par les cellules apoptotiques. Nous avons mis lhypothse que le microenvironnement apoptotique tissulaire, via la relche de MFG-E8, module le phnotype du macrophage, modifiant le microenvironnement, la rponse inflammatoire ainsi que le devenir de linsulte tissulaire. Nos objectifs sont 1) de caractriser ce microenvironnement apoptotique tissulaire et la cintique de relche du MFG-E8 par les cellules apoptotiques, 2) den valuer son rle dans la modulation du phnotype du macrophage ainsi que 3) den tudier, in vivo, son influence sur lenvironnement inflammatoire et le devenir tissulaire. Dans le premier article prsent, nous avons dmontr que les cellules endothliales apoptotiques relchent le MFG-E8 de faon Caspase-3 dpendante. La stimulation des macrophages par lenvironnement conditionn par les cellules endothliales apoptotiques mne ladoption dun profil macrophagien davantage anti-inflammatoire et moindrement pro-inflammatoire. Ce phnotype est rduit par linhibition de la Caspase-3 et il dpend de la prsence de MFG-E8. De plus, le potentiel du MFG-E8 la reprogrammation du macrophage pro-inflammatoire a t dmontr via un modle exprimental de pritonite. Ce changement phnotypique mdi par MFG-E8 implique une signalisation STAT3. Ayant dmontr que les cellules pithliales apoptotiques, linstar des cellules endothliales apoptotiques, relchent elles aussi de faon apoptose-dpendante le MFG-E8, nous avons tudi plus exhaustivement un modle in vivo riche en apoptose pithliale, lobstruction urtrale unilatrale. Dans ce deuxime article prsent, nous rapportons limplication bnfique de MFG-E8 dans ce modle de pathologie rnale obstructive. Nous avons constat que la prsence ou ladministration de MFG-E8 rduit le dommage tissulaire et la fibrose. La protection confre par MFG-E8 est mdie via la modulation de lactivation de linflammasome. De plus, nos rsultats illustrent limportance du phnotype anti-inflammatoire du macrophage mdi par le MFG-E8 dans la rgulation ngative de lactivation de linflammasome rnal et du dommage tissulaire. Cette thse prsente la premire description de la relche Caspase-3-dpendante de MFG-E8 par les cellules apoptotiques. Elle dmontre galement limportance du MFG-E8 dans le microenvironnement apoptotique inflammatoire dans lattnuation du phnotype pro-inflammatoire du macrophage. De plus, nous avons dmontr son rle protecteur dans des modles in vivo de transplantation aortique et de rparation tissulaire, de mme que dans un modle de maladie rnale chronique o nous avons montr que cette protection confre par MFG-E8 est mdie par la rgulation ngative de linflammasome tissulaire. Nos rsultats suggrent ainsi que le MFG-E8 pourrait tre considr comme un interrupteur inflammatoire et ainsi comme une cible potentielle dans la modulation de maladies inflammatoires.
Resumo:
Plusieurs dcennies de recherche ont permis de mieux comprendre les effets de lathrosclrose sur le systme cardiovasculaire, damliorer la prvention et de dvelopper des traitements efficaces. Les effets de lathroslrose sur le cerveau demeurent toutefois mal compris mme si le lien entre le fonctionnement cognitif et la sant du systme vasculaire est maintenant bien tabli. La venue de nouvelles mthodes dimagerie telle la microscopie laser 2-photons (TPLM) permet dtudier limpact de certaines maladies sur la microvasculature crbrale en mesurant le flux sanguin dans des vaisseaux uniques situs dans des rgions crbrales millimtriques sous la surface. Les rsultats des tudes in vitro peuvent dornavant tre corrls ceux obtenus in vivo. En premier lieu, ce mmoire revoit la thorie ayant permis le dveloppement de la TPLM qui permet de prendre des mesures hmodynamiques in vivo dans des vaisseaux de trs petits calibres tels des capillaires crbraux de souris. Par la suite, son utilisation est dcrite chez des souris anesthsies afin de comparer les mesures dhmodynamie crbrale tels la vitesse des globules rouges, le flux de globules rouges, le flux sanguin crbral, lhmatocrite sanguin et le diamtre des vaisseaux. Finalement, nous avons compar les donnes hmodynamiques entre des souris de 3 mois normales (WT ; n=6) et des souris atteintes dathrosclrose prcoce (ATX ; n=6). Les rsultats obtenus sur un nombre total de 209 capillaires (103 pour les souris WT et 106 pour les souris ATX) dmontrent que les souris ATX possdent une vitesse des globules rouges (+40%) plus grande, un flux de globule rouge plus grand (+12%) et un flux capillaire plus lev (+14%) sans dmontrer pour aucun de ces paramtres, une diffrence statistiquement significative. Lhmatocrite moyen (354% vs 332% ; p=0.71) et le diamtre moyen des vaisseaux (4.880.22m vs 4.860.20m ; p=0.23) taient galement comparables. La vitesse des globules rouges a dmontr une faible corrlation avec le diamtre des vaisseaux (r=0.39) et avec le flux de globules rouges/seconde (r=0.59). En conclusion, les travaux mens dans le cadre de ce mmoire de matrise permettent d'envisager, grce aux nouvelles mthodes dimagerie crbrale telle la TPLM, une meilleure comprhension des mcanismes hmodynamiques sous-jacents la microcirculation crbrale. Leffet dune pression pulse augmente, tel que propose dans lathrosclrose reste cependant dmontrer avec cette mthode dimagerie.
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Les prostaglandines modulent dimportants rles physiologiques. Elles sont aussi impliques dans le dveloppement dune varit de conditions pathologiques telles linflammation, la douleur et le cancer. La prostaglandine PGF2 et son rcepteur (rcepteur FP) se trouvent impliqu dans la modulation de nombreuses pathologies tels lors de laccouchement prterme et le cancer colorectal. Rcemment, nous avons fait partie dun groupe de recherche ayant dvelopp des modulateurs allostriques du rcepteur FP. Dans une premire tude, laction du PGF2 sur le dclenchement des contractions myomtriales a t value, car peu dinformation est connue sur la signalisation de cette prostaglandine lors de laccouchement. Ainsi, nous avons utilis un peptidomimtique de la deuxime boucle extracellulaire, dnomme PDC113.824. Nos rsultats ont dmontr que le PDC113.824 permettait de retarder la mise bas chez des souris gestantes, mais agissait de manire diffrente sur les multiples voies de signalisation de la PGF2. Ainsi, le PDC113.824 inhibait la voie RhoA-ROCK, dpendante de lactivation de la protine G12 par le. Les protines RhoA-ROCK sont des acteurs cls dans le remodelage du cytosquelette dactine et des contractions myomtriales lors de laccouchement. De plus, le PDC113.824 en prsence de PGF2 agit comme un modulateur positif sur la voie dpendante de lactivation de la protine Gq. Le PDC113.824 serait donc un modulateur allostrique non comptitif possdant des actions la fois de modulateurs positifs et ngatifs sur la signalisation du rcepteur FP Dans une seconde tude, des analogues du PDC113.824 ont t conus et analyss dans un second modle pathologique, le cancer colorectal. Ce cancer possde de hauts niveaux de rcepteur FP. Nous avons donc tudi le rle du rcepteur FP dans le dveloppement et la progression du cancer colorectal et leffet de modulateurs allostriques. Il est gnralement accept que dans le cancer colorectal, la prostaglandine PGE2 permet la croissance et linvasion tumorale, ainsi que langiogense. Toutefois, peu dinformations sont connues sur le rle du PGF2 dans le cancer colorectal. Cest dans ce contexte que nous avons dcid dexaminer la contribution de ce rcepteur dans la progression du cancer colorectal et cherch dterminer si la modulation des fonctions du rcepteur FP a un impact sur la croissance de tumeurs colorectales. Nos recherches ont rvl que lactivation du rcepteur FP permet la migration et la prolifration de plusieurs lignes cellulaires humaines et murines dadnocarcinomes colorectaux. Dans ce contexte, nos expriences ont dmontr que la migration des cellules cancreuses tait dpendante de lactivation de la voie Rho. Nos rsultats dmontrent quen effet, lactivation de RhoA, une petite GTPase cl de la voie G12, est inhibe de faon slective par nos composs. De plus, nos molcules allostriques sont galement efficaces pour inhiber la voie de signalisation de la -catnine, une protine implique dans la gense du cancer colorectal. In vivo, le traitement de souris avec un des ces modulateurs a permis une inhibition effective de la croissance tumorale. Dans lensemble, nos rsultats suggrent donc que les modulateurs allostriques des rcepteurs FP pourraient constituer une nouvelle classe de mdicaments utiliss pour le traitement du cancer colorectal.
