L'effet de la gémellité associée à la prématurité sur l'interaction précoce et les processus d'attachement

Objectif Le but de cette recherche est d'observer un possible rôle de la gémellité dans la qualité de l'interaction précoce mère-enfant et dans le développement de l'attachement à une année par rapport à des non-jumeaux respectivement prématurés et non prématurés selon l'observation directe selon la description des enfants par leurs mères. Méthode Il s'agit d'une étude longitudinale exploratoire qui vise à comparer les compétences sociales et communicatives de trois populations: prématurés respectivement jumeaux et non- jumeaux ainsi qu'enfants nés à terme non-jumeaux à 4, 6, 12 et 18 mois. Cette recherche est réalisée dans le cadre de deux études prospectives menées au Service Universitaire de Psychiatrie de l'Enfant et de l'Adolescent sur le devenir des grands prématurés. Les outils utilisés sont le CARE-Index qui évalue la qualité de l'interaction mère-enfant, la situation étrange qui détermine le type d'attachement de l'enfant et le Toddler tempérament scale (TTS) qui permet d'apprécier le tempérament de l'enfant tel que perçu par leurs mères. Limites Les deux principales limites de ce travail sont certainement le nombre restreint de sujets observés et le fait que les sujets étudiés proviennent de deux études différentes et soient comparés entre eux. Les questionnaires du TTS remplis par les mères représentent également une limite car peuvent comporter une part de "désirabilité sociale". Résultats Cette étude a permis de retrouver les résultats de certaines théories de base de l'interaction mère-enfant et du processus d'attachement en les appliquant à un groupe de jumeaux prématurés. Nous avons retrouvé des différences significatives dans les résultats du CARE- Index qui suggère que la gémellité influencerait la qualité de l'interaction précoce. Celle-ci ne semble par contre pas empêcher le développement d'un attachement secure à une année.

Using group role-playing games with gifted children and adolescents: A psychosocial intervention model

Gifted children develop asynchronously, often advanced for their age cognitively, but at or between their chronological and mental ages socially and emotionally (Robinson, 2008). In order to help gifted children and adolescents develop and practice social and emotional self-regulation skills, we investigated the use of an Adlerian play therapy approach during pen-and-paper role-playing games. Additionally, we used Goffman's (1961, 1974) social role identification and distance to encourage participants to experiment with new identities. Herein, we propose a psychosocial model of interactions during role-playing games based on Goffman's theory and Adlerian play therapy techniques, and suggest that role-playing games are an effective way of intervening with gifted children and adolescents to improve their intra- and interpersonal skills. We specifically targeted intrapersonal skills of exercising creativity, becoming self-aware, and setting individual goals by raising participants' awareness of their privately logical reasons for making decisions and their levels of social interest. We also targeted their needs and means of seeking significance in the group to promote collaboration and interaction skills with other gifted peers through role analysis, embracement, and distancing. We report results from a case study and conclude that role-playing games deserve more attention, both from researchers and clinical practitioners, because they encourage change while improving young clients' social and emotional development.

Biophysical characterization of the interaction of endotoxins with hemoglobins.

Bacterial endotoxin (lipopolysaccharide, LPS) is the major component of the outer leaflet of the outer membrane in gram-negative bacteria. During severe infections, bacteria may reach the blood circuit of humans, and endotoxins may be released from the bacteria due to cell division or cell death. In particular enterobacterial forms of LPS represent extremely strong activator molecules of the human immune system causing a rapid induction of cytokine production in monocytes and macrophages. Various mammalian blood proteins have been documented to display LPS binding activities mediating normally decreasing effects in the biological activity of LPS. In more recent studies, the essential systemic oxygen transportation protein hemoglobin (Hb) has been shown to amplify LPS-induced cytokine production on immune cells. The mechanism responsible for this effect is poorly understood. Here, we characterize the interaction of hemoglobin with LPS by using biophysical methods. The data presented, revealing the changes of the type and size of supramolecular aggregates of LPS in the presence of Hb, allow a better understanding of the hemoglobin-induced increase in bioactivity of LPS.

Rôle des paramètres sociopolitiques et des connaissances dans la gestion des risques hydrologiques

Résumé Rôle des paramètres sociopolitiques et des connaissances dans la gestion des risques hydrologiques¦La recherche analyse (1) la mise en oeuvre de la gestion des risques hydrologiques et (2) les connaissances dont disposent les acteurs sur ces derniers, ainsi que (3) les interdépendances entre ces deux volets. Au total, trois études de cas ont été réalisées dont deux études régionales (ville de Berne, commune de Saillon) et une étude sur un acteur spécifique (les corporations de digues dans le canton de Berne). Les données empiriques ont été obtenues par des entretiens oraux semi-directifs et des enquêtes écrites.¦La gestion des risques hydrologiques est fortement influencée par des paramètres sociopolitiques, c'est-à-dire par les intérêts et les objectifs des acteurs, par les rapports de force entre ceux-ci ainsi que par les processus de négociation et de décision. Dans la pratique, les démarches de gestion se restreignent toutefois majoritairement aux aspects physiques, techniques et administratifs des risques hydrologiques. La dimension sociopolitique est ainsi négligée, ce qui est source de conflits qui ralentissent considérablement la planification de la protection contre les crues, voire la bloquent même complètement. La gestion des risques hydrologiques est en outre largement focalisée sur la réduction des aléas. Lés débats sur la vulnérabilité sont nettement plus rares bien qu'ils soient indispensables lorsqu'il s'agit de traiter les risques de façon holistique.¦Etant donné l'importance de la dimension sociopolitique et de la vulnérabilité, il est nécessaire que les démarches prévues dans la gestion des risques hydrologiques soient reconsidérées et adaptées. De plus, une meilleure intégration de tous les acteurs concernés est primordiale afin de trouver des solutions qui soient acceptables pour une majorité. Pour l'instant, le recours à des instruments de négociation est insuffisant.¦Les connaissances des risques hydrologiques et de leur gestion peuvent être classées en quatre répertoires (connaissances du système, de l'événement, de l'intervention et connaissances sociopolitiques) qui influent tous sur la réduction des risques. Parmi les facteurs les plus importants susceptibles de déclencher des transformations se trouvent l'occurrence de crues, la réalisation d'études (portant sur les aléas, la vulnérabilité, les mesures, etc.), l'échange de connaissances entre les acteurs, ainsi que la recherche de solutions lors de la gestion.¦Les caractéristiques des connaissances varient considérablement selon les acteurs. L'appartenance à un groupe donné ne permet toutefois pas à elle seule de déterminer l'état des connaissances : tous les acteurs peuvent avoir des connaissances pertinentes pour la gestion des risques. Les différences entre les acteurs rendent pourtant la communication compliquée. Ce problème pourrait être atténué par des médiateurs qui assureraient un travail de traduction. Dans la pratique, de telles instances manquent généralement.¦La gestion et les connaissances des risques hydrologiques sont fortement interdépendantes. L'état et les caractéristiques des connaissances déterminent directement la qualité de la protection contre les crues. Des lacunes ou des imprécisions peuvent donc entraîner une gestion non adaptée aux risques présents. Afin d'éviter une telle situation, il est important que les connaissances sur les risques hydrologiques et sur les possibilités d'y faire face soient régulièrement remises à jour. Ne devant pas se restreindre à l'expérience de crues passées, il est impératif qu'elles contiennent aussi des réflexions prospectives et des scénarios novateurs.¦La gestion n'est pas seulement demandeuse en connaissances, elle est également susceptible d'en générer de nouvelles et d'élargir les connaissances existantes. Il convient donc de considérer la création et le transfert de connaissances comme une tâche centrale de la gestion des risques.¦Zusammenfassung Die Rolle der soziopolitischen Parameter und des Wissens im Umgang mit hydrologischen Risiken¦Die Arbeit untersucht drei Themenbereiche: (1) den soziopolitischen Umgang mit hydrologischen Risiken, (2) das Wissen, über das die Akteure bezüglich der Hochwasserrisiken verfügen sowie (3) die Wechselwirkungen zwischen diesen beiden Themenfeldern. Insgesamt wurden drei Fallstudien durchgeführt, darunter zwei regionale Studien (Stadt Bern, Gemeinde Saillon) und eine Untersuchung eines spezifischen Akteurs (Schwellenkorporationen im Kanton Bern). Die empirischen Daten wurden anhand von halbstandardisierten Interviews und schriftlichen Umfragen erhoben.¦Das Management hydrologischer Risiken ist stark von soziopolitischen Parametern beeinflusst, d.h. von Interessen und Zielvorstellungen der Akteure, von Machtverhältnissen und von Verhandlungs- und Entscheidungsprozessen. Die in der Praxis vorgesehenen Schritte zur Reduktion der Hochwasserrisiken beschränken sich jedoch meist auf die physischen, administrativen und technischen Aspekte der Risiken. Die Vernachlässigung ihrer soziopolitischen Dimension führt zu Konflikten, welche die Planung von Hochwasserschutzprojekten deutlich verlangsamen oder gar blockieren. Des Weiteren konzentriert sich das Risikomanagement im Wesentlichen auf die Reduktion der Gefahren. Gesellschaftliche Debatten zur Vulnerabilität sind deutlich seltener, obschon sie für einen umfassenden Umgang mit Risiken unabdingbar sind.¦Angesichts der Bedeutung der soziopolitischen Dimension und der Vulnerabilität ist es notwendig, dass die Vorgehensweise im Risikomanagement überdacht und angepasst wird. Zudem ist eine bessere Integration aller betroffener Akteure unablässig, um mehrheitsfähige Lösungen zu finden. Zur Zeit ist der Rückgriff auf entsprechende Instrumente ungenügend.¦Das Wissen über hydrologische Risiken und deren Management kann in vier Repertoires eingeteilt werden (Systemwissen, Ereigniswissen, Interventionswissen, soziopolitisches Wissen), die alle bei der Reduktion von Risiken bedeutsam sind. Zu den wichtigsten Faktoren, die Wissenstransformationen auslösen, gehören Hochwasserereignisse, die Durchführung von Studien (zu Gefahren, zur Vulnerabilität, zu Massnahmen usw.), der Wissensaustausch zwischen Akteuren und die Suche nach Lösungen während des Risikomanagements.¦Die Merkmale der Wissensformen unterschieden sich stark zwischen den verschiedenen Akteuren. Die Zugehörigkeit eines Akteurs zu einer bestimmten Gruppe ist jedoch kein ausreichendes Kriterium, um dessen Wissensstand zu bestimmen: Alle Akteure können über Wissen verfügen, das für den Umgang mit Risiken relevant ist. Die Unterschiede zwischen den Akteuren gestalten die Kommunikation allerdings schwierig. Das Problem liesse sich entschärfen, indem Mediatoren eingesetzt würden, die als Übersetzer und Vermittler agierten. In der Praxis fehlen solche Instanzen weitgehend.¦Zwischen dem Umgang mit hydrologischen Risken und dem Wissen bestehen enge Wechselwirkungen. Der Zustand und die Eigenschaften der Wissensformen bestimmen direkt die Qualität des Hochwasserschutzes. Lückenhaftes und unpräzises Wissen kann demnach zu einem Risikomanagement führen, das den tatsächlichen Gegebenheiten nicht angepasst ist. Um eine solche Situation zu verhindern, muss das Wissen über Risiken und Hochwasserschutz regelmässig aktualisiert werden. Dabei darf es sich nicht auf die Erfahrung vergangener Hochwasser beschränken, sondern hat auch vorausschauende Überlegungen und neuartige Szenarien einzubeziehen.¦Das Risikomanagement benötigt nicht nur Wissen, es trägt auch dazu bei, neues Wissen zu t generieren und bestehendes zu erweitern. Die Erarbeitung und der Transfer von Wissen sind deshalb als zentrale Aufgaben des Risikomanagements zu betrachten.¦Abstract¦The role of socio-political parameters and of knowledge in the management of hydrological risks¦The purpose of the thesis is to analyse (1) the socio-political management of hydrological risks, (2) the knowledge about hydrological risks, and (3) the interaction between risk management and knowledge. Three case studies were carried out, two at a regional level (city of Berne, village of Saillon) and one about a specific stakeholder (the dyke corporations in the canton of Berne). Empirical data were collected by the means of semi-structured interviews and surveys.¦The management of hydrological risks is highly influenced by socio-political issues, i.e. by interests and goals of stakeholders, by the balance of power between stakeholders, as well as by negotiations and decision-making processes. In practice, however, risk management is mainly constrained by physical, technical, and administrative aspects. The neglect of the socio-political dimension may thus be the source of conflicts which significantly delay the planning and implementation of flood protection measures, or even stop them. Furthermore, risk management mostly concentrates on hazard reduction. Discussions on vulnerability issues are less frequent although they are fundamental for treating risks in a holistic manner.¦Because of the importance of the social-political dimension and of vulnerability issues, it is necessary that the common approach of managing hydrological risks is reconsidered and adapted. Moreover, the integration of all stakeholders that are concerned with hydrological risks is essential for finding solutions which are supported by a majority. For instance, the application of appropriate negotiation instruments is insufficient.¦Knowledge about hydrological risks and their management can be classified into four categories (system knowledge, event knowledge, intervention knowledge, socio-political knowledge) which are all influencing the reduction of risks. Among the most important factors that are likely to trigger knowledge transformations, one can point out flood events, studies about risk parameters (hazards, vulnerability, protection measures, etc.), knowledge exchange between stakeholders, and the search for solutions during risk management.¦The characteristics of knowledge vary considerably between stakeholders. The affiliation to a specific group is thus not a sufficient criterion to determine the quality of a stakeholder's knowledge: every stakeholder may have knowledge that is relevant for risk management. However, differences between stakeholders complicate the communication. This problem could be attenuated by mediators which ensure the translation between stakeholders. In practice, such instances are generally lacking.¦The management and knowledge of hydrological risks are highly interdependent. The state and the characteristics of the four categories of knowledge determine directly the quality of flood protection. Gaps and imprecison may thus lead to forms of management which are not adapted to the actual risks. This kind of situation can be avoided by updating regularly the knowledge about hydrological risks and about protection measures. However, knowledge must not be restricted to the experience of past floods. On the contrary, it is indispensable also to involve prospective reflections and new scenarios.¦Risk management does not only require knowledge, it may also generate new knowledge and enlarge existing knowledge. The creation and the transfer of knowledge has thus to be seen as a central task in risk management.

Stress radiography and posterior pathological laxity of knee: comparison between two different techniques.

Stress radiographs have been recommended in order to obtain a better objective quantification of abnormal compartment knee motion. This tool has showed to be superior in quantifying a posterior cruciate ligament (PCL) lesion compared to clinical or arthrometer evaluation. Different radiographic techniques have been described in literature to quantify posterior pathological laxity. In this study we evaluated the total amount of posterior displacement (PTD) and side to side difference (SSD), before and after surgical reconstruction of PCL or PCL and posterolateral complex (PLC), using two different stress radiography techniques (Telos stress and kneeling view). Twenty patients were included in this study. We found a statistical significant difference about both total PTD and SSD among the two techniques preoperatively and at follow-up, with greatest values occurring using the kneeling view. Although stress radiographies has been introduced to allow an objective quantification of laxity in ligamentous injured knee, we believe that further studies on a large numbers of subjects are required to define the relationship between PTD values, measured with stress knee radiography, particularly using kneeling view, and ligamentous knee injury, in order to obtain a real useful tool in the decision making process, as well as to evaluate the outcome after ligamentous surgery.

SNCA, MAPT, and GSK3B in Parkinson disease: a gene-gene interaction study.

Background and purpose:  Recent evidence suggests that variation in the SNCA, MAPT, and GSK3B genes interacts in affecting risk for Parkinson disease (PD). In the current study, we attempt to validate previously published findings, evaluating gene-gene interactions between SNCA, MAPT, and GSK3B in association with PD. Methods:  Three Caucasian PD patient-control series from the United States, Ireland, and Norway (combined n = 1020 patients and 1095 controls) were genotyped for SNCA rs356219, MAPT H1/H2-discriminating SNP rs1052553, and GSK3B rs334558 and rs6438552. Results:  Our findings indicate that as previously reported, the SNCA rs356219-G allele and MAPT rs1052553 (H1 haplotype) were both associated with an increased risk of PD, whilst contrary to previous reports, GSK3B variants were not. No pair-wise interaction was observed between SNCA, MAPT, and GSK3B; the risk effects of SNCA rs356219-G and MAPT rs1052553-H1 were seen in a similar manner across genotypes of other variants, with no evidence suggesting synergistic, antagonistic, or deferential effects. Conclusions:  In the Caucasian patient-control series examined, risk for PD was influenced by variation in SNCA and MAPT but not GSK3B. Additionally, those three genes did not interact in determining disease risk.

New imaging techniques applied to Paleogene radiolaria

A simple and time efficient technique to illustrate specimens is described and demonstrated with Paleogene radiolarians. This method produces Scanning Electron Microscope (SEM) and composite focal depth Transmitted Light Microscope (TLM) images for single radiolarian specimens. We propose the use of this technique to clarify radiolarian taxonomy. This technique has distinct advantages over previously published time consuming techniques that can also require toxic materials.

Cytostatic lung perfusion results in heterogeneous spatial regional blood flow and drug distribution: evaluation of different cytostatic lung perfusion techniques in a porcine model.

OBJECTIVES: Comparison of doxorubicin uptake, leakage and spatial regional blood flow, and drug distribution was made for antegrade, retrograde, combined antegrade and retrograde isolated lung perfusion, and pulmonary artery infusion by endovascular inflow occlusion (blood flow occlusion), as opposed to intravenous administration in a porcine model. METHODS: White pigs underwent single-pass lung perfusion with doxorubicin (320 mug/mL), labeled 99mTc-microspheres, and Indian ink. Visual assessment of the ink distribution and perfusion scintigraphy of the perfused lung was performed. 99mTc activity and doxorubicin levels were measured by gamma counting and high-performance liquid chromatography on 15 tissue samples from each perfused lung at predetermined localizations. RESULTS: Overall doxorubicin uptake in the perfused lung was significantly higher (P = .001) and the plasma concentration was significantly lower (P < .0001) after all isolated lung perfusion techniques, compared with intravenous administration, without differences between them. Pulmonary artery infusion (blood flow occlusion) showed an equally high doxorubicin uptake in the perfused lung but a higher systemic leakage than surgical isolated lung perfusion (P < .0001). The geometric coefficients of variation of the doxorubicin lung tissue levels were 175%, 279%, 226%, and 151% for antegrade, retrograde, combined antegrade and retrograde isolated lung perfusion, and pulmonary artery infusion by endovascular inflow occlusion (blood flow occlusion), respectively, compared with 51% for intravenous administration (P = .09). 99mTc activity measurements of the samples paralleled the doxorubicin level measurements, indicating a trend to a more heterogeneous spatial regional blood flow and drug distribution after isolated lung perfusion and blood flow occlusion compared with intravenous administration. CONCLUSIONS: Cytostatic lung perfusion results in a high overall doxorubicin uptake, which is, however, heterogeneously distributed within the perfused lung.

Regulation of HCF-1 function via proteolytic maturation and HCF-1 subunit interaction

Abstract : Host-Cell Factor 1 (HCF-1) was first discovered in the study of the herpes simplex virus (HSV) infection. HCF-1 is one of the two cellular proteins that compose the VP16-induced complex, a key activator of HSV lytic infection. lncleed, when HSV infects human cells, it is able to enter two modes of infection: lytic or latent. The V`P16-induced complex promotes the lytic mode and in so doing the virus targets important cellular regulatory proteins, such as HCF-1, to manipulate the status of the infected cell. Indeed, HCF-1 regulates human cell proliferation and the cell cycle at different steps. In human, HCF-1 is unusual in that it undergoes a process of proteolytic maturation that results from cleavages at six centrally located 26 amino acid repeats called HCF-1pro repeats. This generates a heterodimeric complex of stably associated amino- (HCF-1n) and carboxy- (HCF-1c) terminal subunits. The absence of the HCF-1 N or HCF-1; subunit leads predominantly to either G1 or M phase defects, respectively. We have hypothesized that HCF-1 forms a heterodimeric complex to permit communication between the two subunits of HCF-1 involved in regulating different phases of the cell cycle. Indeed, there is evidence for such inter-subunit communication because a point mutation called P134S in the HCF-1N subunit in the temperature-sensitive hamster cell line tsBN67 causes, addition to G1- phase defects associated with the HCF-1n subunit, M-phase defects similar to the defects seen upon loss of HCF-1 function. Furthermore, inhibition of the proteolytic maturation of HCF-1 by deletion of the six HCF-1pro repeats (HCF-1Aimo) also leads to M-phase defects, specifically cytokinesis defects leading to binucleation, indicating that there is loss of HCF-15 function in the absence of HCF-1 maturation. I demonstrate that individual point mutations in each of the six HCF-1pro repeats that prevent HCF-1 proteolytic maturation also lead to binucleation; however, this defect can be latgely rescued by the presence of just one HCF-1pRO sequence in I-ICF»1. These results argue that processing itself is important for the HCF-1g function. In fact, until now, the hypothesis was that the proteolytic processing per se is more important for HCF-1C function than the proteolytic processing region. But I show that processing per se is not sufticient to rescue multinucleation, but that the HCF-lpm sequence itself is crucial. This discovery leads to the conclusion that the I-ICF-1pRO repeats have an additional function important for HCF-le function. From the studies of others, one potential function of the HCF-lrxo tepeats is as a binding site for O-link NAcetyl glycosamine tansferase (OGT) to glycosylate an HCF-1n-sunbunit region called the Basic region. This new function suggests the Basic region of HCF-1n is also implicated in the communication between the two subunits. This inter-subunit communication was analyzed in more detail with the studies of the Pl34S mutation and the residues 382-450 region of HCF-l that when removed prevents HCF-l subunit association. I demonstrate that the point mutation also leads to a binucleation defect in Hela cells as well as in the tsBN67 cells. In addition, the effect of this mutation on the regulation of HCF-1c activity seems to interfere with that of the HCF-lpgg repeats because the sum of the deletion of the proteolytic processing region and the point mutation surprisingly leads to re-establishment of correct cytokinesis. The study of the 382-450 HCF-lN region also yielded surprising results. This region important for the association of the two subunits is also important for both HCF-1c function in M phase and G1 phase progression. Thus, I have discovered two main functions of this region: its role in the regulation of HCF-lc function in M phase and its involvement in the regulation of G1/S phase ?- an HCF-1n function. These results support the importance of inter-subunit communication in HCF-1 functions. My research illuminates the understanding of the interaction of the two subunits by showing that the whole HCF-1n subunit is involved in the inter-subunit communication in order to regulate HCF-1c function. For this work, I was concentrated on the study of cytokinesis; the first phenotype showing the role of HCF-1c in the M phase. Then, I extended the study of the M phase with analysis of steps earlier to cytokinesis. Because some defects in the chromosome segregation was already described in the absence of HCF-1, I decided to continue the study of M phase by checking effects on the chromosome segregation. I showed that the HCF-1n subunit and HCF-1pro repeats are both important for this key step of M phase. I show that the binucleation phenotype resulting from deletion or mutation in HCF-1pro repeats, Pl34S point mutation or the lack of the region 382-450 are correlated with micronuclei, and chromosome segregation and alignment defects. This suggests that HCF«lç already regulates M phase during an early step and could be involved in the complex regulation of chromosome segregation. Because one of the major roles of HCF-1 is to be a transcription regulator, I also checked the capacity of HCF-1 to bind to the chromatin in my different cell lines. All my recombinant proteins can bind the chromatin, except for, as previously described, the HCF-1 with the P134S point mutation, This suggests that the binding of HCF-1 to the chromatin is not dependant to the Basic and proteolytic regions but more to the Kelch domain. Thus, if the function of HCF-ig in M phase is dependant to its chromatin association, the intercommunication and the proteolytic region are not involved in the ability to bind to the chromatin but more to bind to the right place of the chromatin or to be associated with the co-factors. Résumé : L'étude de l'infection par le virus Herpes Simplex (HSV) a permis la découverte de la protéine HCF-1 (Host-Cell Factor). HCF-1 est une des protéines cellulaires qui font partie du complexe induit par VP16 ; ce complexe est la clef pour l'activation de la phase lytique de HSV. Afin de manipuler les cellules infectées, le complexe induit pas le VPIG devrait donc cibler les protéines importantes pour la régulation cellulaire, telles que la protéine HCF-1. Cette dernière s'avère donc être un senseur pour la cellule et devrait également jouer un rôle de régulation lors des différentes phases du cycle cellulaire. Chez l'humain, HCF-1 a la particularité de devoir passer par une phase de maturation pour devenir active. Lors de cette maturation, la protéine subit une coupure protéolytique au niveau de six répétitions composées de 26 acides aminés, appelé HCF-1pro repeats. Cette coupure engendre la formation d'un complexe formé de deux sous-unités, HCF-1n et HCF-1c, associées l'une à l'autre de façon stable. Enlever la sous-unité HCF-IN ou C entraîne respectivement des défauts dans la phase G1 et M. Nous pensons donc que HCF-1 forme un complexe hétérodimérique afin de permettre la communication entre les molécules impliquées dans la régulation des différentes phases du cycle cellulaire. Cette hypothèse est déduite suite à deux études: l'une réalisée sur la lignée cellulaire tsBN67 et l'autre portant sur l'inhibition de la maturation protéolytique. La lignée cellulaire tsBN67, sensible à la température, porte la mutation Pl 345 dans la sous-unité HCF-1n. Cette mutation, en plus d'occasionner des défauts dans la phase G1 (défauts liés à la sous-unité HCF-1N), a aussi pour conséquence d'entrainer des défauts dans la phase M, défauts similaires à ceux dus a la perte de la sous-unité HCF-1c. Quant à la maturation protéolytique, l'absence de la région de la protéolyse provoque la binucléation, défaut lié à la cytokinèse, indiquant la perte de la fonction de la sous-unité HCF-1c. Au cours de ma thèse, j'ai démontré que des mutations dans les HCF-1=no repeats, qui bloquent la protéolyse, engendrent la binucléation ; cependant ce défaut peut être corrigé pas l'ajout d'un HCF-1pro repeat dans un HCF-1 ne contenant pas la région protéolytique. Ces résultats soutiennent l'idée que la région protéolytique est importante pour le bon fonctionnement de HCF-1c. En réalité jusqu'a maintenant on supposait que le mécanisme de coupure était plus important que la région impliquée pour la régulation de la fonction de HCF-1;. Mais mon étude montre que la protéolyse n'est pas suffisante pour éviter la binucléation ; en effet, les HCF-1pro repeats semblent jouer le rôle essentiel dans le cycle cellulaire. Cette découverte conduit à la conclusion que les HCF-1pro repeats ont sûrement une fonction autre qui serait cruciale pour la foncton de HCF-1c. Une des fonctions possibles est d'être le site de liaison de l'O-linked N-acetylglucosamine transférase (OGT) qui glycosylerait la région Basique de HCF-1n. Cette nouvelle fonction suggère que la région Basique est aussi impliquée dans la communication entre les deux sous- unités. L'intercommunication entre les deux sous-unités ai été d'ailleurs analysée plus en détail dans mon travail à travers l'étude de la mutation Pl34S et de la région 382-450, essentielle pour l'association des deux sous»unités. J'ai ainsi démontré que la mutation P134S entraînait aussi des défauts dans la cytokinése dans la lignée cellulaire Hela, de plus, son influence sur HCF-1c semble interférer avec celle de la région protéolytique. En effet, la superposition de ces deux modifications dans HCF-1 conduit au rétablissement d'une cytokinése correcte. Concernant la région 382 à 450, les résultats ont été assez surprenants, la perte de cette région provoque l'arrêt du cycle en G1 et la binucléation, ce qui tend à prouver son importance pour le bon fonctionnement de HCF-1n et de HCF-1c. Cette découverte appuie par conséquent l'hypotl1èse d'une intercommunicatzion entre les deux sous-unités mettant en jeu les différentes régions de HCF-1n. Grâce à mes recherches, j'ai pu améliorer la compréhension de l'interaction des deux sous-unités de HCF-1 en montrant que toutes les régions de HCF-1n sont engagées dans un processus d'intercommunication, dont le but est de réguler l'action de HCF-1c. J'ai également mis en évidence une nouvelle étape de la maturation de HCF-1 qui représente une phase importante pour l'activation de la fonction de HCF-1c. Afin de mettre à jour cette découverte, je me suis concentrée sur l'étude de l'impact de ces régions au niveau de la cytokinése qui fut le premier phénotype démontrant le rôle de HCF-1c dans la phase M. A ce jour, nous savons que HCF-1c joue un rôle dans la cytokinèse, nous ne connaissons pas encore sa fonction précise. Dans le but de cerner plus précisément cette fonction, j'ai investigué des étapes ultérieures ai la cytokinèse. Des défauts dans la ségrégation des chromosomes avaient déjà été observés, ai donc continué l'étude en prouvant que HCF-1n et les HCF-1pro repeats sont aussi importants pour le bon fonctionnement de cette étape clef également régulée par HCF-1c. J' ai aussi montré que la région 382-450 et la mutation P134S sont associées à un taux élevé de micronoyaux, de défauts dans la ségrégation des chromosomes. L'une des fonctions principales de HCF-1 étant la régulation de la transcription, j'ai aussi contrôlé la capacité de HCF-1 à se lier à la chromatine après insertion de mutations ou délétions dans HCF-1n et dans la région protéolytique. Or, à l'exception des HCF-1 contenant la mutation P134S, la sous-unité HCF-1c des HCF-1 tronquées se lie correctement à la chromatine. Cette constatation suggère que la liaison entre HCF-1c et chromatine n'est pas dépendante de la région Basique ou Protéolytique mais peut-être vraisemblablement de la région Kelch. Donc si le rôle de HCF-1c est dépendant de sa capacité â activer la transcription, l'intercommunication entre les deux sous-unités et la région protéolytique joueraient un rôle important non pas dans son habileté à se lier à la chromatine, mais dans la capacité de HCF-1 à s'associer aux co-facteurs ou à se placer sur les bonnes régions du génome.

Techniques for CT and MR, post-processing, radiation

Brain perfusion can be assessed by CT and MR. For CT, two major techniques are used. First, Xenon CT is an equilibrium technique based on a freely diffusible tracer. First pass of iodinated contrast injected intravenously is a second method, more widely available. Both methods are proven to be robust and quantitative, thanks to the linear relationship between contrast concentration and x-ray attenuation. For the CT methods, concern regarding x-ray doses delivered to the patients need to be addressed. MR is also able to assess brain perfusion using the first pass of gadolinium based contrast agent injected intravenously. This method has to be considered as a semi-quantitative because of the non linear relationship between contrast concentration and MR signal changes. Arterial spin labeling is another MR method assessing brain perfusion without injection of contrast. In such case, the blood flow in the carotids is magnetically labelled by an external radiofrequency pulse and observed during its first pass through the brain. Each of this various CT and MR techniques have advantages and limits that will be illustrated and summarized.Learning Objectives:1. To understand and compare the different techniques for brain perfusion imaging.2. To learn about the methods of acquisition and post-processing of brain perfusion by first pass of contrast agent for CT and MR.3. To learn about non contrast MR methods (arterial spin labelling).

The promise of advanced imaging techniques for the detection of hepatitis C virus antigens in the infected liver.

Injection drug use before and after liver transplantation: a retrospective multicenter analysis on incidence and outcome. Clin Transplant 2009 DOI: 10.1111/j.1399-0012.2009.01121.x. Background and aims: Injecting drug use (IDU) before and after liver transplantation (LT) is poorly described. The aim of this study was to quantify relapse and survival in this population and to describe the causes of mortality after LT. Methods: Past injection drug users were identified from the LT listing protocols from four centers in Switzerland and France. Data on survival and relapse were collected and used for uni- and multivariate analysis. Results: Between 1988 and 2006, we identified 59 patients with a past history of IDU. The mean age at transplantation was 42.4 yr and the majority of patients were men (84.7%). The indication for LT was for the vast majority viral cirrhosis accounting for 91.5% of cases, while alcoholic cirrhosis was 5.1%. There were 16.9% of patients who had a substitution therapy before and 6.8% who continued after LT. Two patients (3.4%) relapsed into IDU after LT and died at 18 and 41 months. The mean follow-up was 51 months. Overall survival was 84%, 66%, and 61% at 1, 5, and 10 yr after transplantation. Conclusions: Documented IDU was rare in liver transplanted patients. Past IDU was not associated with poorer survival after LT, and relapse after LT occurred in 3.4%.

Therapeutic Blockade of LIGHT Interaction With Herpesvirus Entry Mediator and Lymphotoxin β Receptor Attenuates In Vivo Cytotoxic Allogeneic Responses.

BACKGROUND: Tumor necrosis factor/tumor necrosis factor receptor superfamily members conform a group of molecular interaction pathways of essential relevance during the process of T-cell activation and differentiation toward effector cells and particularly for the maintenance phase of the immune response. Specific blockade of these interacting pathways, such as CD40-CD40L, contributes to modulate the deleterious outcome of allogeneic immune responses. We postulated that antagonizing the interaction of LIGHT expression on activated T cells with its receptors, herpesvirus entry mediator and lymphotoxin β receptor, may decrease T cell-mediated allogeneic responses. METHODS: A flow cytometry competition assay was designed to identify anti-LIGHT monoclonal antibodies capable to prevent the interaction of mouse LIGHT with its receptors expressed on transfected cells. An antibody with the desired specificity was evaluated in a short-term in vivo allogeneic cytotoxic assay and tested for its ability to detect endogenous mouse LIGHT. RESULTS: We provide evidence for the first time that in mice, as previously described in humans, LIGHT protein is rapidly and transiently expressed after T-cell activation, and this expression was stronger on CD8 T cells than on CD4 T cells. Two anti-LIGHT antibodies prevented interactions of mouse LIGHT with its two known receptors, herpesvirus entry mediator and lymphotoxin β receptor. In vivo administration of anti-LIGHT antibody (clone 10F12) ameliorated host antidonor short-term cytotoxic response in wild type B6 mice, although to a lesser extent than that observed in LIGHT-deficient mice. CONCLUSION: The therapeutic targeting of LIGHT may contribute to achieve a better control of cytotoxic responses refractory to current immunosuppressive drugs in transplantation.

Quantification of nicotine, cotinine, trans-3'-hydroxycotinine and varenicline in human plasma by a sensitive and specific UPLC-tandem mass-spectrometry procedure for a clinical study on smoking cessation.

A sensitive and specific ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry method for the simultaneous quantification of nicotine, its metabolites cotinine and trans-3'-hydroxycotinine and varenicline in human plasma was developed and validated. Sample preparation was realized by solid phase extraction of the target compounds and of the internal standards (nicotine-d4, cotinine-d3, trans-3'-hydroxycotinine-d3 and CP-533,633, a structural analog of varenicline) from 0.5mL of plasma, using a mixed-mode cation exchange support. Chromatographic separations were performed on a hydrophilic interaction liquid chromatography column (HILIC BEH 2.1×100mm, 1.7μm). A gradient program was used, with a 10mM ammonium formate buffer pH 3/acetonitrile mobile phase at a flow of 0.4mL/min. The compounds were detected on a triple quadrupole mass spectrometer, operated with an electrospray interface in positive ionization mode and quantification was performed using multiple reaction monitoring. Matrix effects were quantitatively evaluated with success, with coefficients of variation inferior to 8%. The procedure was fully validated according to Food and Drug Administration guidelines and to Société Française des Sciences et Techniques Pharmaceutiques. The concentration range was 2-500ng/mL for nicotine, 1-1000ng/mL for cotinine, 2-1000ng/mL for trans-3'-hydroxycotinine and 1-500ng/mL for varenicline, according to levels usually measured in plasma. Trueness (86.2-113.6%), repeatability (1.9-12.3%) and intermediate precision (4.4-15.9%) were found to be satisfactory, as well as stability in plasma. The procedure was successfully used to quantify nicotine, its metabolites and varenicline in more than 400 plasma samples from participants in a clinical study on smoking cessation.