Reduced ejection fraction after myocardial infarction: is it sufficient to justify implantation of a defibrillator ?

Introduction : La diminution de la fraction d'éjection après infarctus du myocarde est-elle suffisante pour justifier l'implantation prophylactique de défibrillateur ? Introduction: La diminution de la fraction d'éjection (FE) est un facteur prédictif majeur de mortalité cardiaque chez les patients avec ancien infarctus du myocarde (IM). Les plus récentes études, pour la plupart conduites à la fin des années 90, montrent une diminution de la mortalité post-hospitalière à 10 à 20% par année. Une amélioration de la survie par implantation prophylactique de défibrillateurs a été démontrée chez les patients avec dysfonction myocardique avancée après ancien IM dans la cadre de l'étude MADIT II (Multicenter Automatic Defibrillator Implantation Trial) et est depuis lors, considérée comme une thérapie recommandée. Le bénéfice de l'implantation prophylactique de défibrillateurs en terme de nombre nécessaire de patients à traiter pour prévenir un évènement est d'un intérêt primordial en raison des complications potentielles liées à la procédure et l'appareillage, des implications psychologiques ainsi qu'en raison de l'analyse coût-efficacité. Le nombre de patients à traiter est corrélé au risque actuel de mortalité rythmique, probablement influencé par les récentes avancées thérapeutiques dans la prise en charge aigue de l'IM (notamment par angioplastie primaire) et de l'insuffisance cardiaque. Or, dans '' l'étude MADIT II, le recrutement des patients était effectué entre 1997 et 2001 et l'intervalle moyen entre l'IM et le recrutement était de plus de 6 ans. Le but de l'étude était donc d'évaluer, dans la pratique générale, la mortalité actuelle de patients ayant survécu à un IM avec diminution consécutive significative de la FE. La stratification du risque sur la base des variables hospitalières a de même été explorée. Méthode: Une analyse de cohorte de patients avec infarctus aigu du myocarde admis de 1999 à 2000 a été effectuée dans 2 centres hospitaliers (un universitaire et un cantonal). Tous les dossiers cliniques des patients sortis d'hôpital avec FE documentée ≤ 0.40 ont été inclus. Les caractéristiques des patients, les procédures diagnostiques et thérapeutiques ainsi que la médication étaient reportées. La période de suivi débutait à la sortie d'hôpital. Les end-points primaires étaient la mortalité globale, la mortalité cardiaque et les morts subites. Une analyse bivariée et multivariée a été effectuée. Résultats: 165 patients ont été inclus. Durant un suivi médian de 30 mois (interquartile range 22-36), 18 patients sont décédés (5 morts classifiées comme cardiaques, 8 comme subites, 5 de causes non cardiaques). Les taux de mortalité à un et deux ans selon analyse de Kaplan-Meier étaient de 6.7 et 8.6%, respectivement. Les variables reflétant l'atteinte coronarienne et sa prise en charge (antécédent d'IM, reperfusion aigue, revascularisation complète) étaient plus significativement associées à la mortalité comparées aux variables reflétant la dysfonction myocardique (FE, classe Killip à l'admission). Conclusion : La mortalité des patients ayant survécu à un IM avec dysfonction myocardique avancée a diminué de façon substantielle depuis la fin des années 90. La diminution de la mortalité rythmique implique une augmentation proportionnelle du nombre de patients à traiter par implantation de défibrillateur pour prévenir un évènement. Par ailleurs, une stratification du risque après IM basée uniquement sur la FE semble être inappropriée au vu de son impact mineur sur la mortalité comparé aux autres facteurs de risque identifiés dans notre étude. Les patients sans antécédents d'infarctus et ceux ayant bénéficié d'une revascularisation aigue ou complète avait une mortalité cumulée à 2 ans de, respectivement, 2.5%, 3.9% et 2.3%. Pour ce type de patients à bas risque le bénéfice de l'implantation prophylactique de défibrillateur doit être remis en question. Au vu de cette étude, une stratification additionnelle du risque avant implantation de défibrillateur est à considérer.

Regulation of free corticosterone and CBG capacity under different environmental conditions in altricial nestlings.

The concentration of circulating glucocorticoids is regulated in response to environmental and endogenous conditions. Total circulating corticosterone, the main glucocorticoid in birds, consists of a fraction which is bound to corticosterone-binding globulins (CBG) and a free fraction. There is increasing evidence that the environment modulates free corticosterone levels through varying the concentration of CBG, but experimental evidence is lacking. To test the hypothesis that the regulation of chronic stress in response to endogenous and environmental conditions involves variation in both corticosterone release and CBG capacity, we performed an experiment with barn owl (Tyto alba) nestlings in two different years with pronounced differences in environmental conditions and in nestlings experimentally fed ad libitum. In half of the individuals we implanted a corticosterone-releasing pellet to artificially increase corticosterone levels and in the other half we implanted a placebo pellet. We then repeatedly collected blood samples to measure the change in total and free corticosterone levels as well as CBG capacity. The increase in circulating total corticosterone after artificial corticosterone administration varied with environmental conditions and with the food regime of the nestlings. The highest total corticosterone levels were found in nestlings growing up in poor environmental conditions and the lowest in ad libitum fed nestlings. CBG was highest in the year with poor environmental conditions, so that, contrary to total corticosterone, free corticosterone levels were low under poor environmental conditions. When nestlings were fed ad libitum total corticosterone, CBG and free corticosterone did not increase when administering corticosterone. These results suggest that depending on the individual history an animal experienced during development the HPA-axis is regulated differently.

Influence of environmental conditions on the distribution of Central Asian green toads with three ploidy levels.

We studied the distribution of Palearctic green toads (Bufo viridis subgroup), an anuran species group with three ploidy levels, inhabiting the Central Asian Amudarya River drainage. Various approaches (one-way, multivariate, components variance analyses and maximum entropy modelling) were used to estimate the effect of altitude, precipitation, temperature and land vegetation covers on the distribution of toads. It is usually assumed that polyploid species occur in regions with harsher climatic conditions (higher latitudes, elevations, etc.), but for the green toads complex, we revealed a more intricate situation. The diploid species (Bufo shaartusiensis and Bufo turanensis) inhabit the arid lowlands (from 44 to 789 m a.s.l.), while tetraploid Bufo pewzowi were recorded in mountainous regions (340-3492 m a.s.l.) with usually lower temperatures and higher precipitation rates than in the region inhabited by diploid species. The triploid species Bufo baturae was found in the Pamirs (Tajikistan) at the highest altitudes (2503-3859 m a.s.l.) under the harshest climatic conditions.

MENTAL IMAGERY IN PERCEPTUAL LEARNING

L'imagerie mentale est définie comme une expérience similaire à la perception mais se déroulant en l'absence d'une stimulation physique. Des recherches antérieures ont montré que l'imagerie mentale améliore la performance dans certains domaines, comme par exemple le domaine moteur. Cependant, son rôle dans l'apprentissage perceptif n'a pas encore été étudié. L'apprentissage perceptif correspond à l'amélioration permanente des performances suite à la répétition de la même tâche. Cette thèse présente une série des résultats empiriques qui montrent que l'apprentissage perceptif peut aussi être achevé en l'absence des stimuli physiques. En effet, imaginer des stimuli visuels amène à une meilleure performance avec les stimuli réels. Donc, les processus sous-jacents l'apprentissage perceptif ne sont pas uniquement déclenchés par les stimuli sensoriels, mais également par des signaux internes. En plus, l'apprentissage perceptif à travers l'imagerie mentale ne se réalise que seule-ment quand les stimuli ne sont pas (complètement) présents, mais gaiement quand les stimuli montrés ne sont pas utiles quant à la résolution de la tâche. - Mental imagery is described as an experience that resembles pereeptnal ex-perience but which occurs in the absence ef a physical stimulation. Despite its beneficial effects in, among others, motor performance, the role of mental imagery m perceptual learning has not yet been addressed. Here we focus on a specific sensory modality: vision. Perceptual learning is the ability to improve perception in a stable way through the repetition of a given task Here I demonstrate by a series of empirical results that a perceptual improve¬ment can also occur in the absence of a stimulation. Imagining visual stimuli is sufficient for successful perceptual learning. Hence, processes underlying perceptual learning are not only stimulus-driven but can also be driven by internally generated signals. Moreover, I also show that perceptual learning via mental imagery can occur not only when physical stimuli are (partially) absent, but also in conditions where stimuli are uninformative with respect to the task that has to be learned.

Extracellular matrix molecules enhance the neurotrophic effect of schwann cell-like differentiated adipose-derived stem cells and increase cell survival under stress conditions.

Since the first reports of induction of adipose-derived stem cells (ASC) into neuronal and glial cell phenotypes, expectations have increased regarding their use in tissue engineering applications for nerve repair. Cell adhesion to extracellular matrix (ECM) is a basic feature of survival, differentiation, and migration of Schwann cells (SC) during nerve regeneration, and fibronectin and laminin are two key molecules of this process. Interaction between ECM and SC-like differentiated ASC (dASC) could potentially improve the neurotrophic potential of the stem cells. We have investigated the effect of ECM molecules on SC-like dASC in terms of proliferation, adhesion, and cell viability. Fibronectin and laminin did not affect the proliferation of dASC when compared with cell adherent tissue culture plastic, but significantly improved viability and cell attachment when dASC were exposed to apoptotic conditions. To assess the influence of the ECM molecules on dASC neurotrophic activity, dASC were seeded onto ECM-coated culture inserts suspended above dorsal root ganglia (DRG) sensory neurons. Neurite outgrowth of DRG neurons was enhanced when dASC were seeded on fibronectin and laminin when compared with controls. When DRG neurons and dASC were in direct contact on the various surfaces there was significantly enhanced neurite outgrowth and coculture with laminin-conditioned dASC produced the longest neurites. Compared with primary SCs, dASC grown on laminin produced similar levels of neurite outgrowth in the culture insert experiments but neurite length was shorter in the direct contact groups. Anti β1 integrin blocking antibody could inhibit baseline and dASC evoked neurite elongation but had no effect on outgrowth mediated by laminin-conditioned dASC. ECM molecules had no effect on the levels of nerve growth factor and brain-derived neurotrophic factor secretion from dASC. The results of the study suggest that ECM molecules can significantly improve the potential of dASC for nerve regeneration.

Acid-sensing ion channels : modulation by serine-proteases and involvement in acid-induced action potential generation in hippocampal neurons

SUMMARY Acid-sensing ion channels (ASICs) are non-voltage gated sodium channels. They are activated by rapid extracellular acidification and generate an inactivating inward current. Four ASIC genes have been cloned: ASIC1, 2, 3 and 4, with variants a and b for ASIC1and AS1C2. ASICs are expressed in neurons of the central (CNS) and peripheral nervous system (PNS). In the CNS, ASICs have a role in learning, memory, as well as in neuronal death in ischemia. In the PNS, ASICs are involved in the perception of acid-induced pain, as well as in mechanoperception. In one part of my thesis project, we addressed the question of the mechanism of regulation of ASIC1 a by the serine protease trypsin at the molecular level. Trypsin modifies the function of ASIC1 a but not of ASIC1b. In order to identify the channel region responsible for this effect, we created chimeras between ASIC1 a and 1b. Subsequently, to identify the exact trypsin target(s), we mutated predicted trypsin sites in the region identified by the chimera. In the second part of a project, we investigated the role of ASICs at the cellular level, in neuronal signaling. Using the whole-cell patch clamp in hippocampal neuronal culture, we studied the potential involvement of ASICs in action potential (AP) generation. In the first part of the thesis work, we showed that trypsin modifies ASIC1a function: it shifts the pH activation and the steady-state inactivation curve towards more acidic values and accelerates the time course of the channel recovery from inactivation. We also showed that trypsin cleaves ASIC1a and that the functional effect and a channel cleavage correlate. In the inactivated state, channels cannot be modified by trypsin. Cleavage occurs in a channel region that is also important for inactivation of all ASICs; a part of this region is critical for the inhibition of ASIC1 a by the spider toxin Psalmotoxin1. In the second part of the thesis work, we showed that ASIC activity can modulate AP generation. ASIC activity by itself can induce trains of APs. In situations in which this activity by itself is not sufficient to induce APs, it can contribute to AP generation. During high neuronal activity, ASIC activity can block already existing trains of APs. In conclusion, depending on the activity of neuron in a particular moment, ASICs can differently modulate AP generation; they can induce, facilitate or inhibit APs. We also showed that trypsin changes the capability of ASICs to modulate AP generation by shifting the pH dependence to more acidic values, which adapts channel gating to pH conditions which may occur in pathological conditions such as ischemia. Our finding that trypsin modifies ASIC1 a function identifies a novel pharmacological tool, and proposes a mechanism of ASIC1a regulation that may have a physiological importance. The identification of the exact site of trypsin action gives insight to the molecular mechanisms of ASIC regulation. This work proposes a role in modulation of AP generation for ASICs in the CNS. RESUME Les canaux ASIC sont les canaux ioniques activés par l'acidification rapide extracellulaire. Activés, ils génèrent un courant entrant qui inactive en présence de stimulus acide. Quatre gènes ASIC ont été clonés, ASIC1, 2, 3 et 4, avec les variants a et b pour ASIC1 et 2. Les ASICs sont exprimés dans les neurones du système nerveux central (SNC) et périphérique (SNP). Dans le SNC, les ASIC ont un rôle dans le mémoire, apprentissage et la mort neuronale dans t'ischémie. Dans le SNP, ils ont un rôle dans la perception de la douleur et méchanosensation. Dans une partie de mon projet de thèse, nous avons étudié les mécanismes de la régulation d'ASIC1a par la sérine-protéase trypsine au niveau moléculaire. La trypsine modifie la fonction d'ASIC1a et pas ASIC1b. Nous avons créé les chimères entre ASIC1 a et 1 b, afin d'identifier la région du canal responsable pour l'effet. Pour identifier le(s) site(s) exactes de l'action de la trypsine, nous avons muté les sites potentiels de la trypsine dans la région identifiée par les chimères. Dans la deuxième partie du projet, nous avons étudié le rôle des ASICs au niveau cellulaire. En utilisant la technique du patch clamp dans les cultures des neurones de l'hippocampe, nous avons étudié l'implication des ASICs dans la génération des potentiels d'action (PA). Nous avons montré que la trypsine agit sur le canal ASIC1a ; elle décale l'activation et « steady-state » inactivation vers les valeurs plus acides, et elle raccourcit le temps du « recovery » du canal. La trypsine coupe ASIC1a sur le résidu K145 et l'effet fonctionnel et la coupure corrèlent. Nous avons identifié la région du canal responsable pour l'inactivation de tous les ASICs ; une partie de cette région est responsable pour ['inhibition d'ASIC1 a par la Psalmotoxinel . Nous avons montré que les ASICs peuvent moduler la génération des PAs. L'activité des ASICs peut induire les trains des PAs. Quand l'activité des ASICs n'est pas suffisante pour induire le PA, elle peut contribuer à sa génération. Pendant l'activité neuronale forte, l'activité des ASICs peut bloquer les trains des PAs qui existent déjà. En conclusion, dépendant de l'activité neuronale, les ASICs peuvent moduler la génération des PAs différemment ; ils peuvent induire, faciliter ou inhiber les PAs. La trypsine change la capacité des ASICs de moduler les PAs. Après l'action de la trypsine, les ASICs peuvent moduler la génération des PAs dans les conditions légèrement acides, suivies par les fluctuations du pH acide, qui peuvent exister dans l'ischémie. Le fait que la trypsine agit sur ASIC1a définit l'outil pharmacologique et propose le mécanisme de la régulation d'ASICI a qui pourrait avoir l'importance physiologique. L'identification du site de l'action de la trypsine éclaircit les mécanismes moléculaires de la régulation des ASICs. Cette étude propose un rôle des ASICs dans la modulation de la génération des PAs. Résumé pour le public large Les neurones sont les cellules de système nerveux dont la fonction est la signalisation. Comme toutes les autres cellules, les neurones ont une membrane qui sépare l'intérieur du milieu extérieur. Cette membrane est imperméable pour des particules chargées (ions). Dans cette membrane existent les protéines spécifiques, « canaux », qui permettent le transport des ions d'un côté de la membrane à l'autre, comme réponse aux stimuli différents. Ce transport des ions à travers la membrane génère un courant, qu'on peut mesurer. Ce courant est la base de la communication entre les neurones, ou, ce qu'on appelle la signalisation neuronale. Quand ce courant est suffisamment grand, il permet la génération du potentiel d'action, qui est le message principal de communication neuronale. Les canaux ASIC (acid-sensing ion channel), que nous étudions dans le laboratoire, sont activés par les acides. Les acides sont relâchés dans beaucoup de situations dans le système nerveux. Les ASIC ont été découverts récemment (en 1996), et nous ne connaissons pas encore très bien toutes les fonctions de ces canaux. Nous savons qu'ils ont un rôle dans le mémoire, apprentissage, la sensation de la douleur et l'infarctus cérébral. Dans la première partie de ce projet de thèse, nous avons voulu mieux comprendre comment fonctionnent ces canaux. Pour faire ça, nous avons étudié la régulation des ASICs par une protéine, trypsine, qui coupe le canal ASIC. Nous avons étudié ou exactement la trypsine coupe le canal et quels effets ça produit sur la fonction du canal. Dans la deuxième partie du projet de thèse, nous avons voulu mieux connaître comment le canal fonctionne au niveau de la cellule, comment il interagit avec les autres canaux et si il a un rôle dans la génération des potentiels d'action. Nous avons pu montrer que la trypsine change la fonction du canal, ce qui lui permet de fonctionner différemment. Nous avons aussi déterminé ou exactement ta trypsine coupe le canal. Au niveau de la cellule, nous avons montré que les ASIC peuvent moduler la génération des potentiels d'action, étant, dépendant de l'activité du neurone, soit activateurs, soit inhibiteurs. La trypsine est une molécule qui peut être libérée dans le système nerveux pendant certaines conditions, comme l'infarctus cérébral. A cause de ça, les connaissances que la trypsine agit sur le anal ASIC pourraient être important physiologiquement. La connaissance de l'endroit exacte ou la trypsine coupe le canal nous aide à mieux comprendre la relation structure-fonction du canal. La modulation de la génération des potentiels d'actions par les ASIC indique que ces canaux peuvent avoir un rôle important dans la signalisation neuronale.

Functional heterogeneity of memory CD4 T cell responses in different conditions of antigen exposure and persistence.

Memory CD4 T cell responses are functionally and phenotypically heterogeneous. In the present study, memory CD4 T cell responses were analyzed in different models of Ag-specific immune responses differing on Ag exposure and/or persistence. Ag-specific CD4 T cell responses for tetanus toxoid, HSV, EBV, CMV, and HIV-1 were compared. Three distinct patterns of T cell response were observed. A dominant single IL-2 CD4 T cell response was associated with the model in which the Ag can be cleared. Polyfunctional (single IL-2 plus IL-2/IFN-gamma plus single IFN-gamma) CD4 T cell responses were associated with Ag persistence and low Ag levels. A dominant single IFN-gamma CD4 T cell response was associated with the model of Ag persistence and high Ag levels. The results obtained supported the hypothesis that the different patterns observed were substantially influenced by different conditions of Ag exposure and persistence.

Assessment of Physical Activity and Energy Expenditure by GPS Combined With Accelerometry in Real-Life Conditions.

Background: Physical activity (PA) and related energy expenditure (EE) is often assessed by means of a single technique. Because of inherent limitations, single techniques may not allow for an accurate assessment both PA and related EE. The aim of this study was to develop a model to accurately assess common PA types and durations and thus EE in free-living conditions, combining data from global positioning system (GPS) and 2 accelerometers. Methods: Forty-one volunteers participated in the study. First, a model was developed and adjusted to measured EE with a first group of subjects (Protocol I, n = 12) who performed 6 structured and supervised PA. Then, the model was validated over 2 experimental phases with 2 groups (n = 12 and n = 17) performing scheduled (Protocol I) and spontaneous common activities in real-life condition (Protocol II). Predicted EE was compared with actual EE as measured by portable indirect calorimetry. Results: In protocol I, performed PA types could be recognized with little error. The duration of each PA type could be predicted with an accuracy below 1 minute. Measured and predicted EE were strongly associated (r = .97, P < .001). Conclusion: Combining GPS and 2 accelerometers allows for an accurate assessment of PA and EE in free-living situations.

Genetic and environmental effects on early life-history traits in salmonids

Les changements environnementaux, tels la température ou les maladies infectieuses, peuvent influencer l'évolution en induisant de la sélection, mais ceci à la seule condition qu'il y ait assez de diversité génétique pour les traits en question ou pour l'expression plastique de ces traits. Au cours cette thèse, nous avons étudié l'effet de potentielles pressions environnementales sur différents phénotypes de trois représentants des sous familles des salmonidés: l'ombre commun (Thymallus thymallus; Thymallinae), la truite de rivière {Salmo trutta; Salmoninae) et le corégone Coregonus palaea (Coregoninae). Les salmonidés se prêtent particulièrement bien à ce type d'expériences car étant hautement sensibles aux conditions environnementales, ils montrent une large variabilité dans leurs traits morphologiques, comportementaux ainsi que d'histoire de vie, tout en bénéficiant d'un large intérêt général. Nous avons testé si le sexe de l'ombre commun pouvait être modifié par la température, ce qui pourrait ainsi expliquer un changement abrupte de sex ratio observé dans l'une des plus grandes populations de Suisse. Nous n'avons trouvé aucun indice permettant de conclure que la température puisse induire ce changement chez l'ombre commun ou chez la truite de rivière. De plus nous avons étudié la plasticité de développement ainsi que d'éclosion, et avons observé des différences entre familles ainsi qu'entre populations. Alors que ces différences comportementales entre populations suggéraient une adaptation aux conditions environnementales locales, cette prédiction n'a pas été confirmée par une expérience de transplantation réciproque d'embryons entre cinq rivières de la même région. Cette étude a montré que les embryons ne survivaient pas mieux dans leur rivière d'origine, indiquant donc une absence d'adaptation locale. Nous avons aussi montré que la mortalité embryonnaire était influencée autant par des "bons gènes" que par des "gènes compatibles", que la qualité des mâles pouvait être signalée par leur coloration, et que le fait d'élever des poissons dans une pisciculture pouvait aboutir a des relations contre-intuitives entre la coloration des mâles et la qualité de leur jeunes. Nos résultats contribuent ainsi à une meilleure compréhension de l'effet de diverses pressions environnementales sur la morphologie, le comportement ou les traits d'histoire de vie chez les salmonidés. - Environmental changes, such as changes in temperatures or infection levels, can induce selection and drive evolution if there is sufficient genetic variation for the traits or the plasticity in trait expression. In this thesis, we investigated the influence of potential environmental stressors on various phenotypes in representatives of the three salmonid subfamilies: the European grayling (Thymallus thymallus; Thymallinae), the brown trout (,Salmo trutta; Salmoninae), and the whitefish Coregonus palaea (Coregoninae). Salmonids are ideal study species, as they seem sensitive to changing environmental conditions, show considerable variability in morphological, behavioral, and life history traits, and are of broad public interest. We investigated whether temperature-induced sex reversal could explain the sex-ratio distortion found in one of Switzerland's largest grayling populations. We found no evidence of temperature-induced sex reversal in either graylings or brown trout. We also examined plasticity in embryo development and the timing of hatching. We found variation at the level of family and population. Although behavioral differences between populations suggested adaptation to local environmental conditions, no indications of local adaptation could be found in reciprocal transplant experiments carried out over five rivers in the same region. We also demonstrate that embryo development and viability is influenced by 'good genes' and 'compatible genes', that the genetic quality of sires can be signaled by their grey coloration, and that raising larvae in a hatchery environment can produce counter-intuitive relationships between male phenotypes and offspring viability. Our results contribute to the understanding of how changing environmental conditions affect the phenotypes and the heritability of early life-history traits in salmonids.

Is amoxicillin/clavulanic acid sufficient for preemptive antibiotic therapy in type III grade open fractures ?

The risk of infection after type III° open fractures is high (10-50%).Preemptive antibiotic therapy may prevent posttraumatic infection andimprove the outcome. Recommendations about the type and durationof antibiotic vary among the institutions and it remains unclear whethergram-negative bacilli or anaerobs need to be covered. In Europe, themost commonly recommended antibiotic is amoxicillin/clavulanic acid.We retrospectively analyzed microbiology, characteristics and outcomeof patients with open type III° fractures treated at our institution.Methods: Between 01/2005 and 12/2009 we retrospectively includedall type III grade open fractures of the leg at our institution classifiedafter Gustilo into type IIIA, IIIB and IIIC. Demographic characteristics,clinical presentation, microbiology, surgical and antibiotic treatmentand patient outcome were recorded using a standardized case-reportform.Results: 30 cases of patients with type III° open fractures wereincluded (25 males, mean age was 40.5 years, range 17-67 years).27 fractures (90%) were located on the lower leg and 3 (10%) on theupper leg. Microbiology at initial surgery was available for 19 cases(63%), of which 10 grew at least one organism (including 8 amoxicillin/clavulanic acid-resistant gram-negative bacilli [GNB], 7 amoxicillin/clavulanic acid-resistant Bacillus cereus), 11 were culture-negative.Preemptive antibiotics were given in all cases (100%) for an averageduration of 8.5 days (range 1-53 days), the most common antibioticwas amoxicillin/clavulanic acid in 60% (n = 18). 11 cases just receivedpreemptive antibiotic treatment, in 19 of 30 cases the antibiotic therapywas changed and prolonged. Microbiology at revision surgery wasavailable for 25 cases and 22 grew at least one pathogen (including32 amoxicillin/clavulanic acid-resistant gram-negative bacilli and 10amoxicillin/clavulanic acid-resistant Bacillus cereus), 3 were culturenegative.Conclusions: At initial surgery, most common isolated organismswere coagulase-negative staphylococci (43%), Bacillus cereus (23%),and gram-negative bacilli (27%), and others (7%) of which 48% wereresistant to amoxicillin/clavulanic acid. At revision surgery, isolatedorganisms were gram-negative bacilli (64%), Bacillus cereus (20%),and others (16%) of which 88% were resistant to amoxicillin/clavulanicacid. The spectrum of amoxicillin/clavulanic does not cover the mostcommon isolated organisms.FM32

Examining the information content of time-lapse crosshole GPR data collected under different infiltration conditions to estimate unsaturated soil hydraulic properties

Time-lapse geophysical data acquired during transient hydrological experiments are being increasingly employed to estimate subsurface hydraulic properties at the field scale. In particular, crosshole ground-penetrating radar (GPR) data, collected while water infiltrates into the subsurface either by natural or artificial means, have been demonstrated in a number of studies to contain valuable information concerning the hydraulic properties of the unsaturated zone. Previous work in this domain has considered a variety of infiltration conditions and different amounts of time-lapse GPR data in the estimation procedure. However, the particular benefits and drawbacks of these different strategies as well as the impact of a variety of key and common assumptions remain unclear. Using a Bayesian Markov-chain-Monte-Carlo stochastic inversion methodology, we examine in this paper the information content of time-lapse zero-offset-profile (ZOP) GPR traveltime data, collected under three different infiltration conditions, for the estimation of van Genuchten-Mualem (VGM) parameters in a layered subsurface medium. Specifically, we systematically analyze synthetic and field GPR data acquired under natural loading and two rates of forced infiltration, and we consider the value of incorporating different amounts of time-lapse measurements into the estimation procedure. Our results confirm that, for all infiltration scenarios considered, the ZOP GPR traveltime data contain important information about subsurface hydraulic properties as a function of depth, with forced infiltration offering the greatest potential for VGM parameter refinement because of the higher stressing of the hydrological system. Considering greater amounts of time-lapse data in the inversion procedure is also found to help refine VGM parameter estimates. Quite importantly, however, inconsistencies observed in the field results point to the strong possibility that posterior uncertainties are being influenced by model structural errors, which in turn underlines the fundamental importance of a systematic analysis of such errors in future related studies.

Dexamethasone therapy and endogenous cortisol production in severe pediatric head injury.

A prospective randomised study was performed on 25 children aged 1.4 to 15.8 years with severe head injury (Glasgow Coma Scale less than or equal to 7) to determine the clinical effectiveness and the impact on endogenous cortisol production of high-dose steroid therapy. Thirteen patients (group 1) received dexamethasone 1 mg/kg/day during the first 3 days and 12 (group 2) not. All patients were treated with a standardized regimen. Urinary free cortisol was measured by radioimmunoassay, and the clinical data were recorded at hourly intervals. Outcome was assessed 6 months later using the Glasgow Outcome Scale. We found a higher frequency of bacterial pneumonias in the dexamethasone-treated patients (7/13 versus 2/12). Group 1 showed a suppression of endogenous cortisol production from day 1 to day 6. In group 2, mean free cortisol was up to 5-fold higher than under basal conditions. The results in group 2 showed that the endogenous steroid production reacts adequately to the stress of severe head injury. It probably is sufficient to elicit maximum glucocorticoid effects. There was no other statistically significant difference in the clinical and laboratory data between the two groups. We conclude that dexamethasone in high doses suppresses endogenous cortisol production up to 6 days and may increase the risk of bacterial infection without affecting the outcome or the clinical and laboratory data.

Ectopic human telomerase catalytic subunit expression maintains telomere length but is not sufficient for CD8+ T lymphocyte immortalization.

Like most somatic human cells, T lymphocytes have a limited replicative life span. This phenomenon, called senescence, presents a serious barrier to clinical applications that require large numbers of Ag-specific T cells such as adoptive transfer therapy. Ectopic expression of hTERT, the human catalytic subunit of the enzyme telomerase, permits fibroblasts and endothelial cells to avoid senescence and to become immortal. In an attempt to immortalize normal human CD8(+) T lymphocytes, we infected bulk cultures or clones of these cells with a retrovirus transducing an hTERT cDNA clone. More than 90% of transduced cells expressed the transgene, and the cell populations contained high levels of telomerase activity. Measuring the content of total telomere repeats in individual cells (by flowFISH) we found that ectopic hTERT expression reversed the gradual loss of telomeric DNA observed in control populations during long term culture. Telomere length in transduced cells reached the levels observed in freshly isolated normal CD8(+) lymphocytes. Nevertheless, all hTERT-transduced populations stopped to divide at the same time as nontransduced or vector-transduced control cells. When kept in IL-2 the arrested cells remained alive. Our results indicate that hTERT may be required but is not sufficient to immortalize human T lymphocytes.

Adult hippocampal neurogenesis inversely correlates with microglia in conditions of voluntary running and aging.

Adult hippocampal neurogenesis results in the formation of new neurons and is a process of brain plasticity involved in learning and memory. The proliferation of adult neural stem or progenitor cells is regulated by several extrinsic factors such as experience, disease or aging and intrinsic factors originating from the neurogenic niche. Microglia is very abundant in the dentate gyrus (DG) and increasing evidence indicates that these cells mediate the inflammation-induced reduction in neurogenesis. However, the role of microglia in neurogenesis in physiological conditions remains poorly understood. In this study, we monitored microglia and the proliferation of adult hippocampal stem/progenitor cells in physiological conditions known to increase or decrease adult neurogenesis, voluntary running and aging respectively. We found that the number of microglia in the DG was strongly inversely correlated with the number of stem/progenitor cells and cell proliferation in the granule cell layer. Accordingly, co-cultures of decreasing neural progenitor/glia ratio showed that microglia but not astroglia reduced the number of progenitor cells. Together, these results suggest that microglia inhibits the proliferation of neural stem/progenitor cells despite the absence of inflammatory stimulus.