Modelos de Atm��sferas Estelares y estrellas de Carbono deficientes en Hidr��geno

El trabajo apunta a determinar el origen y naturaleza de las estrellas de C deficientes en H y por lo tanto, su relaci��n con las restantes estrellas de nuestra galaxia. Apunta a determinar la edad y el estado evolutivo de estas estrellas. En lo que se refiere a las atm��sferas, se trata de desarrollar una rutina que calcule en forma autom��tica un modelo, tomando debidamente en cuenta las dificultades del problema (apartamiento de LTE, transporte convectivo, etc.), de modo de poderlo aplicar al estudio e interpretaci��n de los espectros de las estrellas HdC. Objetivos Contribuye a clarificar la naturaleza de las estrellas HdC: 1. Una correcta identificaci��n de las estrellas de esta clase por las caracter��sticas que presentan sus espectros. 2. Determinar la abundancia de los distintos elementos en sus atm��sferas. 3. Determinar su luminosidad intr��nseca. 4. Poder decidir cu��les son las caracter��sticas cinem��ticas del grupo. Dentro del tema de las atm��sferas estelares, es de inter��s contar con una rutina que sobre la base de ciertos datos b��sicos (temperatura efectiva, composici��n qu��mica y gravedad superficial) calcule un modelo con un m��nimo de intervenci��n externa. Con este elemento disponible, hay temas interesantes que se est��n investigando dentro del grupo, como formaci��n de l��neas del He en estrellas B con atm��sferas extendidas (en presencia de un viento estelar y de una crom��sfera) y la distinta estructura que se debe esperar de una atm��sfera de una estrella HdC, a causa de ser el C el siguiente elemento en importancia despu��s del He.

Desarrollo y aplicaci��n de biotecnolog��as de la reproducci��n en ganado caprino, ovinos y cam��lidos

Las t��cnicas especiales de reproducci��n (inseminaci��n artificial y transferencia de embriones) resultan auxiliares importantes para los planes de mejoramiento gen��tico. En ovinos y caprinos est��n desarrolladas las t��cnicas, pero los resultados son a��n deficientes con semen congelados, y las transferencias de embriones dan resultados err��ticos. En cambio, en Cam��lidos sudamericanos no se posee una t��cnica confiable para inseminaci��n y la transferencia de embriones es a��n incipiente. En el presente proyecto se tratan de obtener t��cnicas de inseminaci��n con semen fresco y congelados en ovinos y caprinos de acuerdo a nuestra realidad productiva, y en Cam��lidos Sudamericanos lograr el desarrollo de la t��cnica. Los trabajos se realizan simult��neamente en la Pampa y en R��o Negro y se aplican en simult��neo en los mismos lugares donde se hace la investigaci��n. Los pasos del trabajo consisten en recolecci��n con vagina artificial, diluci��n y expansi��n, congelamiento, evaluaci��n y siembra. La siembra requiere sincronizaci��n de celo en caso de ovinos y caprinos y est��mulo de ovulaci��n en el caso de Cam��lidos. Se trabaja con instalaciones simples dise��adas ad hoc y con el apoyo de un laboratorio port��til que consta de los elementos b��sicos para realizar el trabajo. La evaluaci��n se hace finalmente en el laboratorio de Teriogenolog��a de la Universidad Nacional de Comahue, Fac. De Ciencias Agrarias.

Preservaci��n de la informaci��n g��nica en bacterias; mecanismos y modulaci��n molecular. Preservation of the genetic information in bacteria; mechanisms and molecular modulation.

El objetivo general del presente proyecto es contribuir a la caracterizaci��n gen��tica y bioqu��mica molecular de mecanismos involucrados en el mantenimiento de la informaci��n g��nica, a trav��s del estudio de sistemas fisiol��gicos involucrados en la prevenci��n, reparaci��n y tolerancia de mutaciones. Dichos sistemas se encuentran evolutivamente conservados y ampliamente distribuidos en los seres vivos. La importancia de los mismos se refleja en el hecho que su deficiencia genera en humanos, enfermedades gen��ticas, apoptosis y c��ncer; y en especies procariotas, c��lulas denominadas "hipermutadoras". En los ��ltimos a��os el estudio de la hipermutabilidad en bacterias ha cobrado gran inter��s ya que se le atribuye importancia en procesos infectivos y en aspectos b��sicos relacionados a evoluci��n. Nuestro modelo de estudio son las bacterias Pseudomonas aeruginosa y Escherichia coli, siendo esta ��ltima especie no solo modelo de estudio sino tambi��n especie de referencia. P. aeruginosa es una bacteria ambiental gram negativa, e importante pat��geno oportunista de humanos. Espec��ficamente nos proponemos estudiar en P. aeruginosa algunos aspectos particulares del Sistema de Reparaci��n de Bases Apareadas Incorrectamente (Mismatch Repair System, MRS), del Sistema de Prevenci��n/Reparaci��n de Lesiones Oxidativas generadas a trav��s de 8-oxo-7,8-dihidroguanina (8-oxo-dG �� GO) y el papel de las ADN Polimerasas de baja fidelidad en la modulaci��n de la tasa de mutaci��n. Asimismo estamos interesados en estudiar en cepas de E. coli deficientes en el sistema Dam, la existencia de subpoblaciones de alta estabilidad gen��tica debido a la eliminaci��n de posibles mutantes por incremento de la expresi��n de los otros componentes del MRS. Metodol��gicamente la caracterizaci��n bioqu��mica de factores proteicos se llevar�� a cabo utilizando prote��nas recombinantes purificadas, an��lisis de interacci��n prote��na-prote��na y prote��na-ADN mediante electroforesis en geles y resonancia plasm��nica de superficie (Biacore), mutagen��sis dirigida in vitro, y estudios de complementaci��n en cepas mutantes espec��ficas. Aspectos fenot��picos y de regulaci��n g��nica en cultivos de biofilm y c��lulas en suspensi��n ser��n estudiados mediante la construcci��n de cepas mutantes, fusiones transcripcionales, PCR en tiempo real, western blot y microscopia de fluorescencia confocal.

Exposici��n prenatal al alcohol y s��ndrome de hiperactividad con d��ficit de la atenci��n: un abordaje conductual, farmacol��gico y bioqu��mico. Alcohol prenatal exposure and attention deficit with hyperactivity disorder: behavioral, pharmacological and biochemical approaches.

El Trastorno por D��ficit de Atenci��n con Hiperactividad (ADHD) es un s��ndrome conductual de origen org��nico, que se manifiesta principalmente en ni��os. Est�� caracterizado por distracci��n moderada a severa, per��odos de atenci��n breve, hiperactividad, inestabilidad emocional e impulsividad. Los tratamientos se basan "parad��jicamente" en psicoestimulantes. Las sustancias mas empleadas son metilfenidato y anfetamina. La sintomatolog��a indica un mal funcionamiento en los circuitos dopamin��rgicos que ser��a el resultado de factores gen��ticos como ambientales, ya que es com��n encontrar ADHD en ni��os expuestos prenatalmente al alcohol. Los modelos animales son importantes para estudiar patolog��as de etiolog��a desconocida, en este sentido, estudios de nuestro laboratorio indican que ratones deficientes en p35 son hiperactivos y responden paradojalmente a psicoestimulantes. Cdk5/p35 participa en el desarrollo neuronal, liberaci��n de ves��culas, se��ales dopamin��rgicas, etc. Adem��s resultados preliminares indican que la experiencia prenatal con una dosis et��lica moderada durante la gestaci��n tard��a, es suficiente para incrementar los patrones de actividad locomotora, semejantes a los descriptos en los modelos animales de ADHD. De acuerdo a estas consideraciones hipotetizamos que la exposici��n et��lica prenatal a dosis moderadas y durante un periodo acotado de la gestaci��n tard��a, resulta en un patr��n conductual similar al descripto en modelos de ADHD. Asimismo, drogas psicoestimulantes pueden revertir dichos efectos. Por otra parte, proponemos que estas alteraciones son consecuencia de los efectos ocasionados por el insulto et��lico sobre el equilibrio en el funcionamiento del sistema de neurotransmisi��n dopamin��rgio mesol��mbico/cortical. Teniendo en cuenta que la etiolog��a del ADHD aun no se conoce, el desarrollo de modelos animales, que recapitulen caracter��sticas cl��nicas de este trastorno, constituye una herramienta muy poderosa para el estudio de los mecanismos celulares y moleculares que subyacen a este s��ndrome, por lo tanto, en este proyecto nos proponemos obtener evidencias acerca de las alteraciones originadas a partir de efectos delet��reos de la exposici��n et��lica prenatal, que recapitulan el desarrollo de fenotipos conductuales y bioqu��micos descriptos en modelos para ADHD. Espec��ficamente nos proponemos determinar, por medio de experimentos conductuales, si la exposici��n a distintas dosis moderadas de alcohol durante un periodo acotado de la gestaci��n tard��a, son suficientes para generar alteraciones conductuales caracter��sticas de ADHD y establecer si metilfenidato y anfetamina, son capaces de revertirlas. Evaluar, mediante m��todos bioqu��micos, si este modelo involucra cambios en algunos de los componentes claves de la neurotransmisi��n dopamin��rgica, tales como niveles de dopamina y sus metabolitos, niveles de expresi��n de tirosina-hidroxilasa, de receptores y transportador de dopamina, del complejo cdk5/p35, entre otros. Esperamos recapitular caracter��sticas an��logas a las observadas en sujetos diagnosticados con ADHD y que el tratamiento con psicoestimulantes re-establezca los niveles de conducta normales. Mediante ensayos bioqu��micos, esperamos encontrar mayores niveles de dopamina en tejido estriatal, acompa��ados con un aumento en los niveles de sus metabolitos y mediante western blot y ensayos de actividad esperamos encontrar mayor nivel de expresi��n en D1, menor de DAT y alteraciones en la normal actividad y expresi��n de cdk5/p35, que podr��an explicar los resultados comportamentales esperados. Dada la alta prevalencia de ADHD y que estos j��venes pacientes son medicados con psicoestimulantes, junto con la poca informaci��n sobre las respuestas neuroadaptativas del cerebro inmaduro, es importante investigar los mecanismos que subyacen las alteraciones neurofisiol��gicas de este trastorno. Estos abordajes experimentales resultan centrales para el desarrollo de terapias mas eficientes para el tratamiento de este s��ndrome.

PARTICIPACI��N DEL RECONOCIMIENTO INMUNE INNATO EN LA RESPUESTA DE CARDIOMIOCITOS DURANTE LA INFECCI��N EXPERIMENTAL CON TRYPANOSOMA CRUZI. Characterization of the cardiac innate immune response during Trypanosoma cruzi experimental infection.

La enfermedad de Chagas, causada por Trypanosoma cruzi, constituye la principal miocarditis infecciosa a nivel mundial. Crecientes evidencias revelan que la respuesta inmune innata tendr��a un rol determinante en la fisiopatolog��a de las enfermedades cardiovasculares. La inmunidad innata es la primera l��nea de defensa, no espec��fica, preprogramada para combatir agentes infecciosos. Este sistema censa la presencia de ant��genos extra��os a trav��s de los receptores tipo toll (TLR) produciendo citoquinas y activando mecanismos microbicidas. Sin embargo, los TLRs tambi��n se hayan distribuidos en las c��lulas parenquimales no inmunes, jugando un importante rol tanto en la defensa como en la homeostasis de cada tejido. Durante la etapa aguda de la infecci��n, el T. cruzi invade y se replica dentro de una amplia variedad de c��lulas y tejidos. Pero posteriormente, los par��sitos son efectivamente eliminados de la mayor��a de los tejidos persistiendo durante toda la vida en las c��lulas del m��sculo card��aco y esquel��tico de los pacientes infectados. Debido a que el mantenimiento de la c��lula card��aca infectada es cr��tica para la patog��nesis de la enfermedad, los mecanismos que participan en la sobrevida de los cardiomiocitos est��n siendo foco de nuestro estudio. Hemos demostrado, que la infecci��n ejerce efectos antiapopt��ticos sobre c��lulas card��acas aisladas. Nuestra hip��tesis es que la inmunidad innata card��aca estar��a involucrada en el mantenimiento de la sobrevida de los miocitos as�� como en la defensa contra el par��sito. Objetivo general: determinar la participaci��n de la respuesta inmune innata card��aca en el desarrollo de la enfermedad de Chagas experimental murina. Objetivos espec��ficos: 1) Analizar el compromiso de TLRs en la respuesta anti-apopt��tica y de autofagia de cardiomiocitos aislados de ratones salvajes y de ratones deficientes en TLR4, TLR2 y en MyD88, mol��cula adaptadora de la se��alizaci��n por TLRs, sometidos a la infecci��n con el par��sito. 2) Determinar la importancia de la actividad ciste��n proteasa parasitaria en el grado de infectividad y la sobrevida de cultivos primarios de ratones salvajes infectados con par��sitos transg��nicos que poseen disminu��da o nula actividad ciste��n proteasa. 3) Establecer la cin��tica de expresi��n de TLR2/TLR6, TLR4 y TLR9, factores antiapopt��ticos (Bcl-2, Bcl-xL, etc.), da��o card��aco y la carga parasitaria en el tejido card��aco de ratones infectados salvajes y/o deficientes antes mencionados. Materiales y M��todos: Los animales ser��n infectados i.p. con 5x103 par��sitos y se determinar�� la cin��tica de expresi��n de los mediadores mencionados por western blot e inmunofluorescencia, la carga parasitaria ser�� determinada por qRT-PCR. Como controles se procesar��n animales inyectados con soluci��n salina. En cultivos primarios de cardiomiocitos de ratones neonatos salvajes y deficientes infectados se estudiar�� la carga parasitaria, la activaci��n de los mecanismos microbicidas (producci��n de ��xido n��trico, metabolitos reactivos del ox��geno y del nitr��geno, ciclooxigenasa, etc.), producci��n de citoquinas y expresi��n de mol��culas anti-apopt��ticas (Bcl-2, Bcl-xL, Bax, etc.). Se explorar�� la tasa de apoptosis en cultivos deprivados de suero. La autofagia se analizar�� por microscopia electr��nica. Cultivos controles ser��n mantenidos en medio o tratados con ligandos de los diferentes TLRs. Resultados preliminares sugieren que tanto TLR2 como Bcl-2 se incrementan en tejido card��aco infectado. Esto nos lleva a profundizar en los mecanismos observados en cultivos y estudiarlos en un modelo in vivo, analizando la posible importancia que tiene la inmunidad innata card��aca en el control del establecimiento de la infecci��n. La comprensi��n de los mecanismos que mantienen la sobrevida de los cardiomiocitos y su respuesta a la infecci��n es importante ya que el conocimiento de las bases moleculares es fundamental para el desarrollo de nuevos agentes quimioterap��uticos. Chagas disease is endemic in Central and South America and causes the most common myocarditis worldwide. We have previously reported that the cardiotrophic parasite Trypanosoma cruzi, its etiological agent, protects cardiomyocytes against apoptosis induced by growth factor deprivation activating the PI3K/Akt and MEK1/ERK signaling pathways. Recent studies have shown that local innate immunity plays a key role in initiating and coordinating homeostatic as well as defense responses in the heart. One of the mechanisms by which the innate immune system senses the presence of foreign antigens is through TLRs. The stimulation of these receptors leads to the activation and nuclear translocation of NF-kB transcription factor and the production of cytokines. Proinflammatory cytokines, in turn, appear to play a central role in the orchestration and timing of the intrinsic cardiac stress response providing, under different situations, instantaneous anti-apoptotic cytoprotective signals, which allow tissue repair and/or remodeling. The aim of the present project is to study the cardiomyocyte innate immune responses to T. cruzi infection and its role in target cell protection from apoptosis. Specific objectives: 1) Study the mechanism triggered by TLR in the anti-apoptotic response and parasite load of infected cardiomyocyte primary cultures from wild type and mice deficient in TLR2, TLR4 or MyD88. 2) Determine the effect of parasite ciste��n protease activity on primary cultures from wild type mice. 3) Determine the TLR signaling-involvement in parasite load and survival indicators in deficient mice. Preliminary results showed us that cardiac-TLR2 may be involved in the anti-apoptotic effect elicited by the parasite and prompted us to establish the mechanisms triggered by the innate immunity that mediate parasite persistence within the host cell.

Intervenci��n sanitaria en barrio Cabildo: estudio de la prevalencia de factores de riesgo para la salud p��blica.

La intervenci��n sanitaria con su objetivo de prevenci��n, tratamiento y educaci��n en el ��rea de salud es un modelo de atenci��n primaria que intenta alcanzar ���la salud para todos���. El bienestar y la calidad de vida de las poblaciones se ven influenciados por varias causas, entre las que pueden mencionarse los problemas asociados al medio ambiente, a la atenci��n sanitaria, y a los h��bitos, comportamientos y estilos de vida de los individuos. Las ���enfermedades de la pobreza���, seg��n indica la OMS responden a causas multifactoriales, donde muchas de ellas no escapan a cuestiones estructurales desatendidas por actores institucionales, sociales y a veces por el propio estado. Las m��s importantes se relacionan con estructuras edilicias deficientes, saneamiento ambiental inapropiado, una realidad socioepidemiol��gica inadecuada para la salud p��blica y falta de pautas culturales o educativas que permitan alcanzar niveles de salud y bienestar aceptables, tanto a nivel individual como comunitario, haciendo de este tipo de poblaciones un blanco vulnerable para un sinn��mero de enfermedades transmisibles Para que las personas alcancen un desarrollo arm��nico se debe hacer un gran esfuerzo de prevenci��n y promoci��n de la salud. Este programa propone mejorar la calidad de vida de los pobladores en relaci��n a enfermedades que afectan a poblaciones vulnerables partiendo desde su propia realidad, basados en una mirada interdisciplinaria, integrando investigaci��n, docencia y proyecci��n social para dar respuestas por un lado a necesidades sentidas de los pobladores de la zona y como docente, al desaf��o de ense��ar a aprender en un contexto variable, formando personas ��ntegras y libres como base para una sociedad m��s justa, con pensamiento propio, capaces de transformar, de reconstruir, de ���ver��� nuevos caminos, fomentando iniciativas que contemplen acciones tendientes a cumplir un importante rol en la sociedad, contribuyendo as�� a que la comunidad educativa en su conjunto se transforme en un sujeto comprometido con los problemas que aquejan a nuestra sociedad.