Aplica����o de t��cnicas de biologia molecular no estudo da diversidade gen��tica

Disserta����o apresentada na Faculdade de Ci��ncias e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para a obten����o do grau de Grau de Mestre por Licenciados Pr��-Bolonha, em Biotecnologia

Aplica����o da T��cnica de "Nested PCR" Durante o Per��odo Pr��-patente para Identifica����o de Schistosoma mansoni no Hospedeiro Intermedi��rio Biomphalaria glabrata

Biomphalaria glabrata, molusco de ��gua doce, desempenha um importante papel em Parasitologia M��dica, por ser o hospedeiro intermedi��rio de Schistosoma mansoni, trem��tode digen��tico respons��vel pela schistosomose intestinal. A detecção de moluscos infectados pelo Schistosoma mansoni tem uma grande import��ncia em Sa��de p��blica, porque identifica focos de transmiss��o da schistosomose. As limita����es dos m��todos cl��ssicos para o diagnóstico de infec����es pr�� patentes fazem com que os m��todos de biologia moleculares sejam vistos como poss��veis alternativas atrav��s da detecção de ADN do S. mansoni em moluscos hospedeiros. A detecção de sequ��ncias espec��ficas de ADN por reac����o de polimerase em cadeia (PCR) tem-se verificado ser de extrema import��ncia para a an��lise gen��tica e diagnóstico de v��rias doen��as infecciosas. Neste estudo foi aplicada a t��cnica de Nested-PCR, com o objectivo de identificar, no per��odo pr��-patente, S. mansoni em moluscos expostos a 1, 5 e 10 mirac��dios em diferentes per��odos de tempo. Foram utilizados moluscos das estirpes albina e selvagem de B. glabrata. Para a realiza����o das t��cnicas de PCR e de Nested���PCR (NPCR) foram utilizados dois pares de oligonucle��tidos desenhados especificamente para detectar o ADN de S. mansoni . Verificou-se amplifica����o do fragmento de ADN do parasita em 80% das amostras analisadas, independentemente da dose de mirac��dios e do per��odo de exposi����o. O m��todo utilizado �� altamente sens��vel, mostrando ser uma ferramenta ��til na detecção de hospedeiros intermedi��rios de S. mansoni, consequentemente na identifica����o de focos de schistosomose intestinal. Palavras-chave: Schistosoma mansoni, Biomphalaria glabrata, per��odo pr��-patente e Reac����o em Cadeia de Polimerase.

Geo-localiza����o de viaturas na gest��o de frotas

Relat��rio de Est��gio apresentado para cumprimento dos requisitos necess��rios �� obten����o do grau de Mestre em Gest��o do Territ��rio especializa����o em Detecção Remota e Sistemas de Informa����o Geogr��fica

Anima����o Cultural na Perspectiva do Envelhecimento Participativo.Diagnóstico Cultura da Freguesia de S��o Jo��o de Deus. Proposta de Actividades Culturais

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Detecção remota em meio urbano: teste com classificadores supervisionados a n��vel do pixel sobre imagens de alta resolu����o espacial aplicados numa l��gica hier��rquica de classes

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Detecção de periodicidades em s��ries temporais: o Periodograma

Neste texto, depois de uma breve introdu����o �� an��lise de Fourier, com especial incid��ncia na apresenta����o de Fourier de sucess��es peri��dicas, definimos o periodograma e deduzimos algumas das suas propriedades estat��sticas. Mostramos como este pode ser utilizado para a detecção de periodicidades numa s��rie temporal, e damos alguns testes nas ordenadas do periodograma. Por fim, aplicamos a teoria desenvolvida a um conjunto de observa����es referentes �� temperatura da ��gua do mar.

Medi����o do coeficiente de difus��o aparente (ADC) e da anisotropia fraccional (FA) em doentes de Alzheimer

Disserta����o apresentada na Faculdade de Ci��ncias e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para obten����o do Grau de Mestre em Engenharia Biom��dica

Valida����o de t��cnicas de prospec����o geoel��ctrica para a detecção de ��gua subterr��nea em rochas vulc��nicas na Ilha Terceira, A��ores

Disserta����o para obten����o do Grau de Mestre em Engenharia do Ambiente, perfil de Gest��o de Sistemas Ambientais

S��filis cong��nita : caracteriza����o da infec����o e avalia����o de t��cnicas laboratoriais para o seu diagnóstico

RESUMO: Um dos maiores problemas da s��filis �� a infec����o intra-uterina do feto, que pode resultar em morte fetal com aborto espont��neo. Os objectivos desta tese foram comparar os cinco testes serol��gicos para o diagnóstico de s��filis cong��nita e optimizar e aplicar a v��rias amostras cl��nicas, colhidas de indiv��duos com suspeita de infec����o por Treponema pallidum, uma t��cnica de PCR-Multiplex e uma t��cnica de PCR em tempo real. Na globalidade dos soros estudados obtiveram-se os seguintes resultados: o RPR reactivo em 87/517; TPHA reactivo em 135/517; e EIA reactivo em 127/517. A pesquisa de anticorpos espec��ficos de tipo IgM foi efectuada em 33 soros sendo estudada pelas t��cnicas de imunofluoresc��ncia indirecta e de westernblot. Quanto aos resultados obtidos pelas duas t��cnicas, o teste FTA-Abs-IgM demonstrou reactividade em 3/33, enquanto que a t��cnica de westernblot-M, apresentou reactividade em 18/33. Para a avalia����o de uma t��cnica de PCR-TR, foram estudadas 318 amostras de 236 indiv��duos classificados, com base em crit��rios cl��nicos e laboratoriais, em diferentes est��dios de infec����o por Treponema pallidum e em indiv��duos sem infec����o por aquele microrganismo. Relativamente a estas t��cnicas foi poss��vel observar amplifica����o de ADN de Treponema pallidum em 133/318 pela t��cnica de PCR-TR e 90/318 pela t��cnica de PCR-Multiplex. Mediante os resultados obtidos e de outros estudos efectuados parece poder concluir-se que o teste EIA �� o mais indicado para o rastreio da infec����o por Treponema pallidum, devendo um resultado reactivo por esta t��cnica, ser confirmado com a realiza����o de um teste n��o trepon��mico (RPR). Relativamente ao diagnóstico de infec����o cong��nita, o teste westernblot para pesquisa de anticorpos espec��ficos de tipo IgM, parece ser o mais apropriado. A t��cnica PCR-TR, parece ser a mais indicada, pois apresenta uma maior sensibilidade e especificidade que a PCR-Multiplex.----------------- ABSTRACT:The syphilis major problem is the intrauterine infection of the fetus, which may result in fetal death with spontaneous abortion. The objectives of this thesis were to compare the five serological tests for the diagnosis of congenital syphilis and optimize and apply several clinical samples taken from individuals suspected of infection with Treponema pallidum, a PCR-Multiplex and real-time PCR. In all sera studied were obtained the following results: the RPR reactive in 87/517; reactive TPHA in 135/517, and 127/517 in reactive EIA. The search for specific IgM antibodies was performed on 33 sera that were studied by indirect immunofluorescence and westernblot. The results obtained by both techniques, the test FTA-Abs-IgM showed reactivity in 3/33, while the technique westernblot-M, showed reactivity in 18/33. For an RT-PCR evaluation, we studied 318 samples from 236 individuals classified based on clinical and laboratory criteria at different stages of infection by Treponema pallidum and in individuals without infection by that organism. For these techniques it was possible to observe ADN amplification of Treponema pallidum in 133/318 by RT-PCR and 90/318 by PCR-Multiplex. Based on obtained results and in other studies seems that we can conclude that the EIA test is the most suitable for Treponema pallidum screening infection, and a reactive result by this technique, should be confirmed with the realization of a non-treponemal test (RPR). For the congenital infection diagnosis, testing for antibodies westernblot specific IgM appears to be the most appropriate. The RT-PCR seems to be the most suitable, since it has a higher sensitivity and specificity than the PCR-Multiplex.

Desenvolvimento de um biossensor de ADN integrado num chip de microflu��dica

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Detecção de correla����o e causalidade em s��ries temporais n��o categ��ricas

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Concep����es alternativas em ci��ncia: um instrumento de diagnóstico

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Desenvolvimento de um sensor para detecção de nano e micro concentra����es de deltametrina

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