Lead (pb) toxicity in saccharomyces cerevisiae: the role of cell wall

O chumbo é utilizado em muitos produtos, tais como baterias, gasolina, tintas e corantes, resultando na sua libertação no meio ambiente. Neste trabalho, foi examinado o papel da parede celular da levedura Saccharomyces cerevisiae como uma barreira ou como alvo da toxicidade do chumbo. A biodisponibilidade do Pb é muito reduzida pelos componentes do meio de cultura YEPD, o que dificulta a avaliação da toxicidade deste elemento em concentrações ambientalmente realistas. Para avaliar a toxicidade de Pb em S. cerevisiae, em condições de crescimento, foram efetuadas diferentes diluições (10-100 vezes) do meio YEPD, as quais foram misturadas com várias concentrações de Pb (0,1-1,0 mmol/l). Observou-se que o YEPD diluído 25 vezes constituía a melhor condição de compromisso entre o crescimento celular e a precipitação de Pb. Os genes CWP1 e CWP2 codificam para duas grandes manoproteínas da parede celular da levedura S. cerevisiae; a deleção destes genes CWP aumenta a permeabilidade da parede celular. A suscetibilidade de células de levedura interrompidas no gene CWP1 (estirpe cwp1Δ) ou CWP2 (estirpe cwp2Δ) foi comparada com a da estirpe, isogénica, selvagem (WT). Verificou-se que o crescimento das estirpes cwp1Δ e cwp2Δ, no meio de cultura YEPD 25 vezes diluído, na presença de Pb, não diferiu do crescimento da estirpe WT. Este resultado sugere que a alteração da permeabilidade da parede celular não altera a sensibilidade de células de levedura ao Pb. Foi investigada o impacto do Pb na parede celular de levedura. Para este efeito, comparou-se a suscetibilidade ao dodecil sulfato de sódio (SDS), ao calcofluor (CFW) e a uma enzima que degrada a parede da célula (liticase), em células da estirpe WT não expostas ou expostas a Pb durante 4, 8 ou 24 h. Além disso, o conteúdo de quitina da parede celular de levedura foi investigada por coloração das células com CFW. Os resultados não mostraram uma alteração da suscetibilidade ao SDS e ao CFW, nas células tratadas com Pb; contudo, nas células tratadas durante 24 h com Pb, observou-se um aumento da sensibilidade à liticase e um aumento da coloração com CFW. Estes resultados sugerem que o chumbo interage com a parede celular da levedura e influencia a sua composição. Deve ser levado a cabo trabalho adicional a fim de confirmar estes resultados.

Relatório de estágio de qualificação profissional (Fase intercalar do estágio)

Relatório EPE - Relatório de estágio em Educação Pré-Escolar: O presente relatório de estágio de qualificação profissional surge no âmbito da unidade curricular de Prática Pedagógica Supervisionada na Educação Pré- Escolar, por forma a evidenciar o desenvolvimento pessoal e profissional da mestranda ao longo da prática pedagógica. Neste sentido, a mestranda foi desenvolvendo um conjunto de competências, tendo em vista a construção dos seus saberes profissionais, atendendo a uma postura de pendor reflexiva e indagadora, capaz de tomar decisões adequadas de acordo com o contexto educativo onde está inserida, uma vez que o mesmo se carateriza por ser imprevisível. O desenvolvimento dos saberes profissionais foi possibilitado através da adoção da metodologia de investigação-ação, sendo que a mesma se processa numa espiral cíclica de observação, planificação, ação e reflexão, pelo que a reflexão é intrínseca e implícita em todas as fases. Efetivamente, foram várias as estratégias que fomentaram o desenvolvimento desta metodologia, nomeadamente: elaboração de planificações, realização de narrativas colaborativas, elaboração do diário de formação, construção dos guiões de préobservação, reestruturação do Projeto Curricular de Grupo e as reuniões realizadas com o supervisor institucional. Importa, ainda, referir que o desenvolvimento da prática pedagógica em díade de formação, potenciou momentos de reflexão partilhada que contribuíram para a transformação das práticas. A elaboração deste relatório assumiu um papel fulcral, uma vez que despoletou na mestranda uma reflexão crítica sobre as práticas, confluindo na identificação da evolução das suas competências pessoais e profissionais, bem como das dificuldades que ainda predominam, por forma a contorná-las futuramente.