O enigma da "reação espermatofórica": breve síntese do conhecimento sobre a estrutura e o funcionamento dos espermatóforos dos cefalópodes (Mollusca: Cephalopoda)

Cefalópodes coleóides (lulas, sépias e polvos) produzem espermatóforos muito complexos que são transferidos à fêmea durante a cópula por meio do hectocótilo, um apêndice modificado nos machos. Durante a transferência à fêmea, ocorre a chamada "reação espermatofórica", complexo processo de evaginação do aparato ejaculatório do espermatóforo, que conduz à exteriorização da massa espermática e corpo cimentante. A presente revisão sintetiza o conhecimento acerca da morfologia e funcionamento desta estrutura exclusiva dos coleóides, identificando lacunas e definindo estratégias que possibilitem avanços na área. Poucos trabalhos abordam com detalhes a morfologia e anatomia funcional dos espermatóforos dos cefalópodes, grande parte do conhecimento acerca da estrutura do espermatóforo tendo sido gerada por trabalhos clássicos do século XIX e início do século XX. Investigações acerca do funcionamento dos espermatóforos são consideravelmente mais raras, estando o conhecimento básico sobre a reação espermatofórica restrito a apenas 19 espécies de coleóides. A revisão da literatura especializada permite sugerir que existem dois tipos básicos de fixação de espermatóforos em Decapodiformes (lulas e sepióides): fixação superficial e implante profundo (ou intra-dérmico). Na fixação superficial, comum em diversas espécies (e.g., Loliginidae, Sepiidae, Ommastrephidae), a base dos espermatângios é aderida ao tecido-alvo aparentemente por meio do corpo cimentante, a partir de substâncias adesivas e, em alguns casos, estruturas de fixação. No implante profundo, comum em alguns grupos de lulas oceânicas e de águas profundas (e.g., Architeuthidae, Cranchiidae, Octopoteuthidae, Sepiolidae), os espermatóforos implantam-se inteiramente no corpo da fêmea, de forma autônoma. Permanece desconhecido o mecanismo responsável pelo implante profundo. Em Octopodiformes (polvos), o espermatóforo é inserido no gonoduto feminino, alcançando a glândula oviducal, onde estão localizadas as espermatecas, ou a cavidade do ovário. Como o funcionamento extracorpóreo dos espermatóforos depende exclusivamente da intrincada estrutura e organização de seus componentes (e.g., membranas e túnicas), somente investigações detalhadas dessas estruturas proverão as bases para a compreensão do funcionamento e da exata função do complexo espermatóforo dos coleóides. Recomenda-se o desenvolvimento de um protocolo simples e eficiente para coloração e preparação total de espermatóforos, de forma que seja possível expandir as descrições morfológicas do espermatóforo em estudos taxonômicos e anatômicos, permitindo, portanto, ampliação do conhecimento acerca desta enigmática estrutura.

Establishment of a protocol for obtention of neuronal stem cells lineages from the dog olfactory epithelium

A morphological and cell culture study from nasal mucosa of dogs was performed in order to establish a protocol to obtain a cell population committed to neuronal lineage, as a proposal for the treatment of traumatic and degenerative lesions in these animals, so that in the future these results could be applied to the human species. Twelve mongrel dogs of 60-day aged pregnancy were collected from urban pound dogs in São Paulo. Tissue from cribriform ethmoidal lamina of the fetuses was collected at necropsy under sterile conditions around 1h to 2h postmortem by uterine sections and sections from the fetal regions described above. Isolated cells of this tissue were added in DMEM/F-12 medium under standard conditions of incubation (5% CO², >37ºC). Cell culture based on isolated cells from biopsies of the olfactory epithelium showed rapid growth when cultured for 24 hours, showing phase-bright sphere cells found floating around the fragments, attached on culture flasks. After 20 days, a specific type of cells, predominantly ellipsoids or fusiform cells was characterized in vitro. The indirect immunofluorescence examination showed cells expressing markers of neuronal precursors (GFAP, neurofilament, oligodendrocyte, and III â-tubulin). The cell proliferation index showed Ki67 immunostaining with a trend to label cell groups throughout the apical region, while PCNA immunostaining label predominantly cell groups lying above the basal lamina. The transmission electron microscopy from the olfactory epithelium of dogs revealed cells with electron-dense cytoplasm and preserving the same distribution as those of positive cell staining for PCNA. Metabolic activity was confirmed by presence of euchromatin in the greatest part of cells. All these aspects give subsidies to support the hypothesis about resident progenitor cells among the basal cells of the olfactory epithelium, committed to renewal of these cell populations, especially neurons.

A method to immunolabel rodent spinal cord neurons and glia for molecular study in specific laser microdissected cells involved in neurodegenerative disorders

Neuron-glia interaction is involved in physiological function of neurons, however, recent evidences have suggested glial cells as participants in neurotoxic and neurotrophic mechanisms of neurodegenerative/neuroregenerative processes. Laser microdissection offers a unique opportunity to study molecular regulation in specific immunolabeled cell types. However, an adequate protocol to allow morphological and molecular analysis of rodent spinal cord astrocyte, microglia and motoneurons remains a big challenge. In this paper we present a quick method to immunolabel those cells in flash frozen sections to be used in molecular biology analyses after laser microdissection and pressure catapulting.

COMBINATION OFGENERAL AND SPECIFICWARM-UPS IMPROVES LEG-PRESS ONE REPETITION MAXIMUM COMPARED WITH SPECIFIC WARM-UP IN TRAINED INDIVIDUALS

Abad, CCC, Prado, ML, Ugrinowitsch, C, Tricoli, V, and Barroso, R. Combination of general and specific warm-ups improves leg-press one repetition maximum compared with specific warm-up in trained individuals. J Strength Cond Res 25(8): 2242-2245, 2011-Accurate assessment of muscular strength is critical for exercise prescription and functional evaluation. The warm-up protocol may affect the precision of the 1 repetition maximum (1RM) test. Testing guidelines recommend performing both general and specific warm-ups before strength tests. The general warm-up intends to raise muscle temperature, whereas the specific warm-up aims to increase neuromuscular activation. Although there is scientific evidence for performing the specific warm-up, the effects of general warm-up on strength tests are still unclear. The purpose of this study was to investigate whether the combination of a general with a specific warm-up (G + SWU) protocol would improve leg press 1RM values compared with a specific warm-up (SWU) protocol. Thirteen participants were tested for leg-press 1RM under 2 warm-up conditions. In the first condition, participants performed the SWU only, which was composed of 1 set of 8 repetitions at approximately 50% of the estimated 1RM followed by another set of 3 repetitions at 70% of the estimated 1RM. In the second condition (G + SWU), participants performed the 1RM test after a 20-minute general warm-up on a stationary bicycle at 60% of HRmax and the same specific warm-up as in the SWU. Values of 1RM in SWU and in G + SWU were compared by a paired t-test, and significance level was set at p <= 0.05. Strength values were on average 8.4% (p = 0.002) higher in the G + SWU compared with the SWU. These results suggest that the G + SWU induced temperature-dependent neuromuscular adjustments that increased muscle force production capacity. Therefore, these results support the recommendations of the testing guidelines to perform a moderate intensity general warm-up in addition to the specific warm-up before maximum strength assessments.

Depot-specific modulation of adipokine levels in rat adipose tissue by diet-induced obesity: The effect of aerobic training and energy restriction

The present study examined the effects of aerobic training and energy restriction on adipokines levels in mesenteric (MEAT) and retroperitoneal (RPAT) white adipose tissue from obese rats. Male Wistar rats were fed with standard laboratory diet (Control group) or high fat diet (HFD). After 15 weeks, HFD rats were randomly assigned to the following groups: rats submitted to HFD, which were sedentary (sedentary HFD, n = 8) or trained (trained HFD, n = 8); or submitted to energy-restriction (ER), which were sedentary (sedentary ER, n = 8) or trained (trained ER, n = 8). Trained rats ran on a treadmill at 55% VO(2max) for 60 min/day, 5 days/week, for 10 weeks. ER rats were submitted to a reduction of 20% daily caloric ingestion compared to the Control group. ER and aerobic training decreased body weight, MEAT and RPAT absolute weight, and fat mass. IL-6, IL-10 and TNF-alpha levels were decreased and adiponectin did not change in RPAT in response to ER protocol. On the other hand, ER and the aerobic training protocol decreased IL-6, TNF-alpha and adiponectin levels in MEAT. Absolute MEAT weight showed a positive correlation with IL-6 (r = 0.464), INF-alpha (r = 0.508); and adiponectin (r = 0.342). These results suggest a tissue-specific heterogeneous response in adipokines level. The combination of the protocols (aerobic training and energy restriction) did not induce an enhanced effect. Published by Elsevier Ltd.

Terapêutica interdisciplinar para fratura cominutiva de côndilo por projétil de arma de fogo: enfoque miofuncional

TEMA: ferimentos causados por projéteis de arma de fogo apresentam alta incidência na região da cabeça e face. A articulação temporomandibular pode estar envolvida, além de estruturas anatômicas importantes como o nervo facial, necessitando de equipe multidisciplinar para efetuar tratamento adequado. PROCEDIMENTOS: apresentação de caso clínico de fratura condilar cominutiva causada por projétil de arma de fogo tratado de forma não-cirúrgica associado à terapia miofuncional orofacial. Paciente encaminhado para avaliação e procedimentos fonoaudiológicos após conduta da equipe de cirurgia bucomaxilofacial, sem remoção do projétil, alojado superficialmente, próximo da origem do músculo esternocleidomastóideo à direita, com fratura condilar cominutiva e lesão do nervo facial. Foram aspectos observados em avaliação: mordida aberta anterior, importante redução da amplitude dos movimentos mandibulares com desvios para o lado acometido, ausência de lateralidade contralateral, dor muscular, paralisia e parestesia em terço médio e superior da hemiface direita. Realizadas sessões de terapia miofuncional seguindo protocolo específico para traumas de face constando de: drenagem de edema; manipulações na musculatura levantadora da mandíbula ipsilateral; ampliação e correção dos movimentos mandibulares; procedimentos específicos referentes à paralisia facial e reorganização funcional direcionada. RESULTADOS: após oito semanas de terapia os resultados obtidos mostram restabelecimento de amplitude e da simetria dos movimentos mandibulares, reorganização da mastigação, adequação da deglutição e fala, remissão da sintomatologia dolorosa e remissão da paralisia do terço médio. CONCLUSÃO: o tratamento conservador da fratura por meio da terapia miofuncional orofacial resultou na reabilitação funcional da mandíbula e face dirigindo os movimentos e estimulando a adequação das funções estomatognáticas.

Infectious endocarditis caused by Nocardia sp.: histological morphology as a guide for the specific diagnosis

Nocardia is a rare opportunistic agent, which may affect immunocompromised individuals causing lung infections and exceptionally infective endocarditis (IE). There are few reports of IE caused by Nocardia sp., usually involving biological prostheses but rarely in natural valves. Its accurate microbiological identification may be hampered by the similarity with Rhodococcus equi and Corynebacterium spp. Here we report a case of native mitral valve IE caused by this agent in which the clinical absence of response to vancomycin and the suggestion of Nocardia sp. by histology pointed to the misdiagnosis of Corynebacterium spp. in blood cultures. The histological morphology can advise on the need for expansion of cultivation time and use of extra microbiological procedures that lead to the differential diagnosis with Corynebacterium spp. and other agents, which is essential to establish timely specific treatment, especially in immunocompromised patients.

Use of chromosome microdissection in fish molecular cytogenetics

Chromosome microdissection is a technique in which whole chromosomes or chromosomal segments are dissected under an inverted microscope yielding chromosome-specific sequences. Several protocol modifications introduced during the past 15 years reduced the number of chromosomes required for most applications. This is of particular interest to fish molecular cytogenetics, since most species present highly uniform karyotypes which make impossible the collection of multiple copies of the same chromosome. Probes developed in this manner can be used to investigate chromosome homologies in closely related species. Here we describe a protocol recently used in the gymnotiform species group Eigenmannia and review the major steps involved in the generation of these markers focusing on protocol modifications aiming to reduce the number of required chromosomes.

Medidas murinométricas e eficiência alimentar em ratos provenientes de ninhadas reduzidas na lactação e submetidos ou não ao exercício de natação

INTRODUÇÃO: Excesso de alimentação no início da vida pode modificar persistentemente consumo e peso corporal. Adoção de exercício físico é uma estratégia útil para evitar excessivo ganho de peso. OBJETIVO: Avaliar o crescimento corporal e a eficiência alimentar em ratos provenientes de ninhada reduzida no aleitamento. MÉTODOS: Ao terceiro dia de vida, ninhadas foram formadas com quatro (GN4) ou 10 animais (GN10), (n = 25). Ao desmame, ratos machos Wistar permaneceram em gaiolas individuais, e, aos 60 (± 2) dias foram subdivididos em sedentários (SED) e exercitados (NAT), formando quatro grupos: GN4SED, GN10SED, GN4-NAT e GN10NAT. Avaliou-se o peso, ganho de peso e taxa específica de ganho de peso, gordura epididimal, índices de massa corporal e Lee, consumo e eficiência alimentar, glicemia e lactemia. RESULTADOS: Aos 21 dias, o GN4 apresentava peso corporal 52% acima do GN10 (P = 0,001). Contudo, aos 30 e 60 dias os pesos não diferiram. Ao final do período, GN10NAT demonstrou menor peso (356,82 ± 23,04) que GN10SED (409,28 ± 17,30). Mas GN4NAT possuía maior peso (417,85 ± 37,91) que GN4SED (413,69 ± 57,45) e GN10NAT. O GN4 exibiu elevada taxa de ganho de peso na lactação, mas, redução da mesma pós-desmame. Independente do tamanho da ninhada, a taxa de ganho de peso reduz com o aumento da idade. Ao final do período, glicemia, gordura epididimal total e relativa, e os índices de Lee e IMC não diferiram entre os grupos. Os valores de lactato antes e após o exercício condizem com esforço de intensidade moderada. Na periadolescência, GN4 apresentou menor ingestão de alimentos, mas sem diferenças na vida adulta. CONCLUSÃO: A redução da ninhada no aleitamento não alterou o peso corporal ou ingestão alimentar persistentemente. Entretanto, o protocolo de natação foi eficaz em reduzir o ganho de peso em animais controles, mas não naqueles de ninhada reduzida.

Hans W. Loewald: a importância da realidade na constituição do sujeito e na clínica psicanalítica

Enfatiza-se a importância da realidade e da experiência atual na constituição do sujeito, por meio da apresentação das ideias de Hans W. Loewald e do exame de sua concepção original de realidade. A natureza relacional das pulsões, a ideia do novo objeto na relação analítica, a noção de invenção da realidade, o conceito de sublimação e a forma de compreender o simbolismo estão entre as formulações mais importantes de Loewald acerca do papel do ambiente na constituição do sujeito. Suas formulações também permitem a compreensão da inserção do sujeito na realidade social contemporânea.

Ônibus 174 - imagimagens da humilhação social

Este artigo procura debater a psicologia social no cinema através de um conceito específico: a humilhação social como problema político. Para tanto foi tomado como objeto de análise o filme Ônibus 174, documentário realizado pelo cineasta José Padilha em 2002. Os comentários elaborados aqui visam compreender as estratégias narrativas utilizadas pelo diretor, que incluem aspectos estéticos e a participação do público, que transformam sua obra em um objeto de estudo da humilhação social que ocorre no âmbito da esfera pública, onde a ação define as relações sociais entre os indivíduos.

Biotin-avidin sandwich elisa with specific human isotypes IgG1 and IgG4 for Culicidae mosquito blood meal identification from an epizootic yellow fever area in Brazil

With a view toward investigating the feeding behavior of Culicidae mosquitoes from an area of epizootic yellow fever transmission in the municipalities of Garruchos and Santo Antônio das Missões, Rio Grande do Sul State, Brazil, specimens were collected by aspiration from September 2005 to April 2007. The engorged females were submitted to blood meal identification by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). A total of 142 blood-engorged samples were examined for human or monkey blood through species-specific IgG. Additional tests for specificity utilizing isotypes IgG1 and IgG4 of human monoclonal antibodies showed that only anti-human IgG1 was effective in recognizing blood meals of human origin. The results indicated a significant difference (p = 0.027) in detection patterns in samples of Haemagogus leucocelaenus recorded from human blood meals at Santo Antônio das Missões, which suggests some degree of exposure, since it was an area where epizootic outbreaks have been reported.

Respostas cardiovasculares ao teste ergométrico em indivíduos com claudicação intermitente

Estudos sugerem que pacientes com claudicação intermitente (CI) apresentam respostas hemodinâmicas alteradas durante o teste ergométrico. Contudo, o impacto da severidade da doença nessas respostas ainda não está claro. Em vista disso, o presente estudo analisou o impacto da severidade dos sintomas de CI nas respostas cardiovasculares ao teste de esforço, em indivíduos com doença arterial obstrutiva periférica. Participaram do estudo 47 sujeitos com CI. Foi realizado teste ergométrico em esteira, utilizando protocolo específico para essa população. A amostra foi dividida em três grupos de acordo com a distância obtida no teste de esforço em: 1º tercil, caminhavam entre 210 e 420 metros; 2º tercil, caminhavam entre 450 e 700 metros; e 3º tercil, caminhavam entre 740 e 1060 metros. A pressão arterial sistólica (PAS) e diastólica (PAD), a frequência cardíaca (FC) e o duplo produto (DP) foram obtidos em repouso, no primeiro estágio e no pico de esforço. Nos três tercis, a PAS e a PAD aumentaram significantemente ao longo do teste ergométrico. Nos três tercis, a FC e o DP aumentaram significantemente ao longo do teste e as respostas no 1º tercil foram mais acentuadas que nos demais tercis. Todavia, no pico de esforço, a FC e o DP não houve diferença entre os tercis. Concluíu-se que a severidade da CI não influenciou as respostas da pressão arterial durante o teste ergométrico progressivo, ao passo que maiores valores de FC e DP foram observados em indivíduos com CI mais severa em uma carga submáxima.

Protocol for DNA extraction of Cryptosporidium spp. oocysts in fecal samples

Molecular characterization of Cryptosporidium spp.oocysts in clinical samples is useful for public health since it allows the study of sources of contamination as well as the transmission in different geographical regions. Although widely used in developed countries, in Brazil it is restricted to academic studies, mostly using commercial kits for the extraction of genomic DNA, or in collaboration with external reference centers, rendering the method expensive and limited. The study proposes the application of the modifications recently introduced in the method improving feasibility with lower cost. This method was efficient for clinical samples preserved at -20 °C for up to six years and the low number of oocysts may be overcomed by repetitions of extraction.

Evaluation of a recombinant p24 antigen for the detection of Feline Immunodeficiency Virus-specific antibodies

Feline Immunodeficiency Virus is a worldwide infection and is considered a significant pathogen. The diagnosis of FIV infections is mainly based on commercially available rapid tests that are highly expensive in Brazil, hence it is rarely performed in the country. Furthermore, lentiviruses grow slowly and poorly in tissue cultures, making the production of viral antigen by classic means and thus the establishment of FIV immunodiagnosis impracticable. In order to deal with this, recombinant DNA techniques were adopted to produce the protein p24, a viral capsid antigen. The protein's reactivity evaluation analyzed by Western blot indicated that this recombinant antigen can be a useful tool for the immunodiagnostic of FIV infections.