Prevalence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in swine from Northeastern Brazil

A serologic survey was conducted among 130 swine slaughtered in the public slaughterhouse of the city of Patos, Paraíba State, Northeastern Brazil, to determine the prevalence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies, and to verify possible associations between sex of the animals and antibody prevalence. The sera were analyzed by indirect antibody tests, considering 1:64 (T. gondii) and 1:50 (N. caninum) dilutions as cut-off points. The prevalence of anti-T. gondii antibodies was 36.2% (47/130) (95% CI = 27.9 - 45.0%) with reciprocal titers ranging from 64 to 2,048, and of anti-N. caninum antibodies was 3.1% (4/130) (95% CI = 0.8 - 7.7%) with reciprocal titers ranging from 50 to 6,400. Three of the four N. caninum-positive samples were also positive for T. gondii antibodies. All Neospora and Toxoplasma IFAT-positive animals were also positive for confirmatory immunoblotting techniques using total and purified N. caninum and T. gondii tachyzoite antigens, i.e., p38 (NcSRS2) and p30 (TgSAG1). There was no association between sex of animals and prevalence of anti-T. gondii and anti-N. caninum antibodies. This is the first indication of N. caninum natural infection in pigs from Brazil.

Paralytic rabies in swine

Rabies transmitted by vampire bats was diagnosed in pigs with paralysis of the pelvic limbs. Diffuse nonsuppurative encephalomyelitis, affecting mainly the spinal cord, was observed histologically. Despite the various diagnosis of rabies in pigs this is the first report of clinical signs and pathology of rabies transmitted by vampire bats.

Evaluation of colostral immunity in swine with commercial anti-leptospira polyvalent whole-bacteria vaccine

The intensity and duration of passive immunity against swine leptospirosis were investigated by the microscopic agglutination test and in vitro leptospira growth inhibition. Twenty-one females at first parturition were divided into three groups: Group A (n = 08): received two doses with 30 days interval of the commercial anti-leptospira bacterin A. Group B (n = 06) received two doses with 30 days interval of the commercial anti-leptospira bacterin B and Group C (n = 07) was the control. In all groups the colostrums were collected. Blood collection of piglets was performed in four different ages. Agglutinin antibodies were equally detected in sera and colostrums for serovars Canicola, Grippotyphosa, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae and Pomona (Group A) and Canicola, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Pomona and Hardjo (Group 13). Mean neutralizing antibodies titers were low. Passive immunity was low duration. (C) 2007 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Influence of Caffeine and Chondroitin Sulfate on Swine Sperm Capacitation and In Vitro Embryo Production

Background: The establishment of an in vitro production (IVP) of embryo in swine allows the generation of embryos with the same quality as in vivo produced embryos with less costs and time. In order to achieve successful fertilization under normal circumstances in vivo, mammalian spermatozoa must first undergo capacitation and then acrosome reaction. The purpose of this study was compared the efficacious of IP/CFDA fluorescence and Coomassie Blue G (CB) staining to detect capacitated sperm cells in refrigerated and fresh semen. Morever, it was investigated the efficacious of caffeine and chondroitin sulphate to promote in vitro sperm capacitation and in vitro embryo produced (IVP) of swine embryos. Materials, Methods & Results: A sperm-rich fraction from ejaculate was obtained using the gloved-hand method and the gel-free fraction was separated using sterile gauze. The semen was diluted in BTS at a final concentration of 1.5 x 10(8) cells/mL. The sperm suspension was incubated for 2 h at 25 degrees C, refrigerated and maintained for 1 h at 15-18 degrees C (refrigerated group) or used immediately (fresh group). Sperm capacitation was assessed by IP/CFDA fluorescence and CB staining for both fresh and refrigerated semen. For PI/CFDA evaluation, a final solution containing 1.7 mM formaldehyde, 7.3 mM PI and 20 mM CFDA in 950 mu L saline was prepared. In the dark, 40 mu L PI/CFDA final solution was added to 10 mu L semen and after 8 min, slides were analyzed on epifluorescence microscopy. For CB evaluation, sperm cells were fixed in 4% paraformaldehyde for 10 min and centrifuged twice at 320 x g in ammonium acetate pH 9 for 8 min. A smear was made and stained with 2.75 mg/mL CB in solution containing 12.5% methanol, 25% glacial acetic acid and 62.5% water, for 2 min. The smear was washed in running water, air dried and sealed with Permount (R), diluted 2:1 in xilol to avoid staining oxidation. Our results showed that refrigeration did not affect sperm capacitation and comparing staining methods, the PI/CFDA combination was more efficient to detect capacitated sperm, when compared to CB staining. In experiment 2, we evaluated the effect of different incubation time (1 - 5 h) with chondroitin sulfate and caffeine on sperm capacitation. For in vitro fertilization, oocytes were obtained from slaughterhouse ovaries. Oocytes with a thick and intact cumulus oophurus layer and cytoplasm with homogenous granules were selected for in vitro maturation for 44 h. According to the results of experiment 2, it was used for in vitro fertilization refrigerated semen was capacitated with 50 mu g/mL chondroitin sulfate for 2 h or capacitated with 5 mu g/mL caffeine for 3 h. Six hours after insemination, cumulus oophorus cells were mechanically removed and oocytes were washed and incubated in microdrops of culture medium. Embryo development after fertilization with sperm capacitated with caffeine or chondroitin sulfate was evaluated on days 3, 5 and 7 of culture. No differences were observed in days 3 or 5 of in vitro culture. However, it was observed an increase on blastocyst rate on Day 7 of culture when caffeine was used as the capacitor agent. Discussion: Molecular basis of sperm capacitation is still poor understood. Sperm capacitation can occur in vitro spontaneously in defined media without addition of biological fluids. We observed that sperm capacitation increased as incubation period enlarged and it was observed using Coomassie blue G and PI/CFDA for fresh semen and for refrigerated semen. It can be concluded that the cooling of semen did not change their pattern of sperm capacitation and this is best assessed by IP/CFDA than by CB. In addition to the use of caffeine in sperm capacitation produces more blastocysts than the chondroitin sulfate after in vitro fertilization.

MicroRNA transcriptome profiles during swine skeletal muscle development

Background: MicroRNA (miR) are a class of small RNAs that regulate gene expression by inhibiting translation of protein encoding transcripts. To evaluate the role of miR in skeletal muscle of swine, global microRNA abundance was measured at specific developmental stages including proliferating satellite cells, three stages of fetal growth, day-old neonate, and the adult. Results: Twelve potential novel miR were detected that did not match previously reported sequences. In addition, a number of miR previously reported to be expressed in mammalian muscle were detected, having a variety of abundance patterns through muscle development. Muscle-specific miR-206 was nearly absent in proliferating satellite cells in culture, but was the highest abundant miR at other time points evaluated. In addition, miR-1 was moderately abundant throughout developmental stages with highest abundance in the adult. In contrast, miR-133 was moderately abundant in adult muscle and either not detectable or lowly abundant throughout fetal and neonate development. Changes in abundance of ubiquitously expressed miR were also observed. MiR-432 abundance was highest at the earliest stage of fetal development tested (60 day-old fetus) and decreased throughout development to the adult. Conversely, miR-24 and miR-27 exhibited greatest abundance in proliferating satellite cells and the adult, while abundance of miR-368, miR-376, and miR-423-5p was greatest in the neonate. Conclusion: These data present a complete set of transcriptome profiles to evaluate miR abundance at specific stages of skeletal muscle growth in swine. Identification of these miR provides an initial group of miR that may play a vital role in muscle development and growth.

Endoscopic features in a model of multivisceral xenotransplantation

Introduction: Xenotransplantation and multivisceral transplantation are advanced therapeutic methods that still require a scientific basis. There are no experimental models of multivisceral transplantation available, particularly not the monitoring by endoscopy. Here, we describe the endoscopic features in a model of multivisceral xenotransplantation. Methods: The distal esophagus, stomach, intestine, colon, liver, pancreas, and the kidneys with a common vascular pedicle were harvested from rabbits and implanted in swine (group I, n = 9) or in rabbits (group II, n = 4). Endoscopy was performed in the stomach, jejunum, and ascending colon at four consecutive time points (immediate after surgery and 10, 90, and 180 min after reperfusion). Lesions were macroscopically graded as mild, moderate, and severe. Biopsies were taken following sacrifice at 180 min after reperfusion. Results: In group I, the stomach, jejunum, and colon manifested a progression of lesions with predominance of mild lesions after 10 min, mild to moderate lesions after 90 min, and moderate to severe lesions after 180 min. In animals from group II, endoscopy showed normal features at all time points after reperfusion. Histopathologic analysis confirmed the diagnosis of hyperacute rejection in group I. Grafts from group II animals presented normal or mild ischemic/reperfusion injury. Conclusion: All animals subjected to multivisceral xenotransplantation showed a progression of endoscopic lesions with time after transplantation, while animals subjected to allotransplantation showed no aberrations in endoscopy. We conclude that endoscopy is a useful tool in the assessment of hyperacute rejection of a xenograft.

Comparison of agar gel immunodiffusion test, rapid slide agglutination test, microbiological culture and PCR for the diagnosis of canine brucellosis

The performance of the rapid slide agglutination test, with and without 2-mercaptoethanol (RSAT and 2ME-RSAT) and agar gel immunodiffusion test (AGID) was evaluated for the diagnosis of brucellosis in naturally infected dogs. The microbiological culture, PCR and clinical parameters were used as reference. A total of 167 dogs were clinically examined and tested by blood culture, culture of semen/vaginal swab and PCR in blood and semen/vaginal swab. According to the results observed the 167 dogs were divided into three groups: Brucella canis infected dogs (Group 1). B. canis non-infected dogs (Group 2) and dogs with suspected brucellosis (Group 3). The dogs were then tested by RSAT, 2ME-RSAT and AGID. Groups 1 and 2 were used to calculate the diagnostic sensitivity and specificity of the serological tests and the results observed in Group 3 were also discussed. The diagnostic sensitivity of RSAT, 2ME-RSAT and AGID was respectively 70.58%, 31.76%, and 52.94%. The diagnostic specificity of RSAT, 2ME-RSAT and AGID was respectively 83.34%, 100%, and 100%. In dogs with suspected brucellosis 15% were RSAT positive, none was 2ME-RSAT positive and 5% were AGID positive. Although the serological tests are the most commonly used methods for brucellosis diagnosis, a significant proportion of false-negative results were observed highlighting the importance of the direct methods of diagnosis, like blood culture and PCR to improve the diagnosis of canine brucellosis. (c) 2008 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Avaliação da técnica de arteriografia renal guiada por fluoroscopia em suínos

The fluoroscopy-guided renal arteriography was evaluated in order to be used as an auxiliary method in investigations and as a way to experimentally induce kidney diseases in swine. The technique was effective to obtain sharp images as well as to determine the area of renal irrigation. Despite its easiness, trained professionals are required to perform it.

Prevalência de anticorpos anti-Chlamydophila spp. em propriedades rurais com histórico de aborto bovino no estado do Paraná

Chlamydophila abortus é o agente etiológico do aborto epizoótico bovino, cujas manifestações clínicas mais freqüentes são aborto, nascimento de bezerros prematuros e de animais fracos, natimorto e repetição de cio em intervalos irregulares. O objetivo deste trabalho foi estimar a prevalência de anticorpos anti-Chlamydophila spp. em fêmeas bovinas de propriedades rurais com histórico de aborto, selecionadas dentro do delineamento amostral do Plano Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose no estado do Paraná. Foram testadas pela prova de fixação de complemento 3.102 amostras de soro de fêmeas bovinas (idade > 24 meses), provenientes de 373 propriedades. Ao total, 44 (1,42%) animais foram positivos com títulos > 32. A prevalência de focos foi de 8,82% (6,15%-12,17%). Animais confinados ou semi-confinados (OR=3.339, P=0.004), propriedade com menos de 35 matrizes (OR=3.339, P=0.017), presença de produtos do aborto na pastagem (OR=2.372, P=0.037) e aluguel de pasto (OR=3.398, P=0.006) foram considerados fatores de risco para Chlamydophila spp. A infecção por Chlamydophila spp. acometeu um número pequeno de animais, oriundos de propriedades com histórico de aborto. A importância deste agente como causa de aborto em bovinos no estado do Paraná, se existir, é muito pequena.

Modelagem matemática do controle de brucelose bovina por vacinação

As fêmeas bovinas, por sua importância na transmissão e na manutenção da brucelose, constituíram o alvo dos inquéritos do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e da Tuberculose Animal. Com base em informações obtidas em unidades federativas onde foram realizados inquéritos sorológicos e observadas prevalências de animais acima de 2%, elaborou-se um modelo para simular a dinâmica da brucelose em rebanhos bovinos formados exclusivamente por fêmeas, analisando o efeito de estratégias de vacinação. Para baixa cobertura vacinal, da ordem de 30%, o tempo para reduzir a prevalência a 2%, valor adotado como referência, pode ser longo, aproximando-se do dobro do tempo necessário para uma cobertura mais alta, de 90%. De acordo com o modelo, o tempo para reduzir a prevalência a 1% ou 2%, que permitam passar à fase de erradicação, pode chegar a uma década. Recomenda-se a intensificação do esforço para a vacinação de fêmeas, procurando atingir alta cobertura vacinal.

Situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado de Sergipe

Realizou-se um estudo para caracterizar a situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado de Sergipe. O Estado foi estratificado em dois circuitos produtores. Em cada circuito produtor foram amostradas aleatoriamente cerca de 300 propriedades e, dentro dessas foi escolhido de forma aleatória um número pré-estabelecido de animais, dos quais foi obtida uma amostra de sangue. No total foram amostrados 4.757 animais, provenientes de 590 propriedades. Em cada propriedade amostrada foi aplicado um questionário epidemiológico para verificar o tipo de exploração da propriedade e as práticas zootécnicas e sanitárias que poderiam estar associadas ao risco de infecção pela doença. O protocolo de testes utilizado foi o da triagem com o teste do antígeno acidificado tamponado e a confirmação dos positivos com o teste do 2-mercaptoetanol. O rebanho foi considerado positivo, se pelo menos um animal foi reagente às duas provas sorológicas. A prevalência de focos e a de animais foram: 12,6% [9,2-16,0%] e 3,4% [2,3-4,4%], respectivamente. As prevalências de focos e de animais infectados para os circuitos pecuários foram: circuito 1, 11,1% [7,9-15,0%] e 2,6% [1,6-3,5%]; circuito 2, 12,9% [9,1-17,6%] e 6,2% [3,0-9,5%]. Os fatores de risco (odds ratio, OR) associados à condição de foco foram: assistência veterinária (OR= 2,89 [1,15-7,23]), tamanho do rebanho ≥30 fêmeas adultas (OR= 1,88 [1,07-3,28]) e uso de inseminação artificial (OR= 1,92 [0,84-4,38]).

Situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado de Santa Catarina

Realizou-se um estudo para caracterizar a situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado de Santa Catarina. O Estado foi estratificado em cinco circuitos produtores. Em cada circuito produtor foram amostradas aleatoriamente cerca de 300 propriedades e, dentro dessas, foi escolhido, de forma aleatória, um número pré-estabelecido de animais, dos quais foi obtida uma amostra de sangue. No total foram amostrados 7801 animais, provenientes de 1586 propriedades. O protocolo de testes utilizado foi o da triagem com o teste do antígeno acidificado tamponado e o reteste dos positivos com o do 2-mercaptoetanol. O rebanho foi considerado positivo se pelo menos um animal foi reagente às duas provas sorológicas. As prevalências de focos e de animais infectados no Estado foram de 0,32% [0,10-0,69%] e 0,06% [0,0-0,17%], respectivamente. A prevalência de focos nos circuitos pecuários foram: circuito 1, 0,33% [0,0-0,99%]; circuito 2, 0,33% [0,0-1,0%]; circuito 3, 0,25% [0,0-0,75%]; circuito 4, 0,66% [0,08-1,84%] e circuito 5, 0,33% [0,0-1,0%].

Situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado de Rondônia

Realizou-se um estudo para caracterizar a situação epidemiológica da doença no Estado de Rondônia. O Estado foi estratificado em três circuitos produtores. Em cada circuito produtor foram amostradas aleatoriamente cerca de 300 propriedades e, dentro dessas, foi escolhido, de forma aleatória, um número pré-estabelecido de animais, dos quais foi obtida uma amostra de sangue. No total, foram amostrados 9.717 animais, provenientes de 927 propriedades. Em cada propriedade amostrada foi aplicado um questionário epidemiológico para verificar o tipo de exploração e as práticas zootécnicas e sanitárias que poderiam estar associadas ao risco de infecção pela doença. O protocolo de testes utilizado foi o da triagem com o teste do antígeno acidificado tamponado e o reteste dos positivos com o teste do 2-mercaptoetanol. O rebanho foi considerado positivo, se pelo menos um animal foi reagente às duas provas sorológicas. As prevalências de focos e de animais infectados do Estado foram de 35,2% [32,1-38,4%] e 6,2% [4,9-7,6%], respectivamente. Os resultados para os circuitos pecuários foram: circuito 1, 41,9% [36,3-47,6%] e 8,3% [5,9-10,8%]; circuito 2, 31,7% [26,5-37,2%] e 5,9% [4,3-7,6%]; circuito 3, 31,9% [26,7-37,4%] e 4,6% [2,5-6,6%]. Os fatores de risco (odds ratio, OR) associados à condição de foco foram: histórico de aborto (OR= 1,42 [1,04-1,95]) e exploração de corte (OR= 1,75 [1,30-2,38]).

Situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado do Paraná

Realizou-se um estudo para caracterizar a situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado do Paraná. O Estado foi estratificado em sete circuitos produtores ou regiões. Em cada circuito foram amostradas aleatoriamente cerca de 300 propriedades e, dentro dessas, foi escolhido de forma aleatória um número pré-estabelecido de animais, dos quais foi obtida uma amostra de sangue. No total, foram amostrados 14.857 animais, provenientes de 2.098 propriedades. Em cada propriedade amostrada foi aplicado um questionário epidemiológico para verificar o tipo de exploração e as práticas zootécnicas e sanitárias que poderiam estar associadas ao risco de infecção pela doença. O protocolo de testes utilizado foi o da triagem com o teste do antígeno acidificado tamponado e o reteste dos positivos com o teste do 2-mercaptoetanol. O rebanho foi considerado positivo se pelo menos um animal foi reagente às duas provas sorológicas. Para o Estado, os resultados de prevalências de focos e de animais infectados foram, respectivamente, de 4,0% [3,2-4,8%] e 1,7% [1,1-2,4%]. Para os circuitos, a prevalência de focos e a de animais foram, respectivamente: circuito 1, 14,7% [10,9-19,2%] e 2,8% [1,2-4,4%]; circuito 2, 8,8% [5,9-12,6%] e 2,4% [1,0-3,8%]; circuito 3, 3,4% [1,6-6,1%] e 0,85% [0,21-1,5%]; circuito 4, 2,3% [0,94-4,8%] e 0,83% [0,02-1,6%]; circuito 5, 2,3% [0,94-4,7%] e 1,6% [0,06-3,3%]; circuito 6, 0,3% [0-1,9%] e 0,09% [0-0,27%]; circuito 7, 1,0% [0,21-2,9%] e 2,2% [0-6,0%]. Os fatores de risco (odds ratio, OR) associados à condição de foco foram: compra de reprodutores (OR= 2,20 [1,42-3,40]) e prática de aluguel de pasto (OR= 2,45 [1,54-3,90]).

Situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado do Mato Grosso do Sul

Realizou-se um estudo para caracterizar a situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado de Mato Grosso do Sul. Foram definidos três estratos (regiões): Pantanal-corte, Planalto-corte e Planalto-leite, este último subdividido em Bolsão, Campo Grande e Dourados. Em cada estrato foram amostradas aleatoriamente propriedades e, dentro dessas, foi escolhido, de forma aleatória, um número pré-estabelecido de animais, dos quais foi obtida uma amostra de sangue. No total, foram amostrados 14.849 animais, provenientes de 1.004 propriedades. Em cada propriedade amostrada foi aplicado um questionário epidemiológico para verificar suas características e também para detectar transtornos reprodutivos que poderiam estar associados à infecção brucélica. O teste utilizado foi o do antígeno acidificado tamponado. O rebanho foi considerado positivo se pelo menos um animal foi reagente à prova sorológica. Para o Estado, a prevalência de focos foi de 41,5% [36,5-44,7%]. As prevalências de focos e de animais infectados por estrato foram, respectivamente, de: 59,0% [52,8-64,9%] e 12,6% [9,1-17,2%] para o estrato Pantanal-corte, e 40,6% [35,8-45,5%] e 4,5% [2,1-9,0%] para Planalto-corte. No estrato Planalto-leite, a prevalência de focos foi de 33,1% [28,4-38,1%]. Os fatores de risco (odds ratios, OR) associados à condição de foco foram: ter ≥500 vacas (OR = 2,46 [1,81-3,34]), ocorrência de bezerros fracos (OR = 1,20 [0,87-1,65]) e uso da inseminação artificial (OR = 0,71 [0,50-1,01]).