Effects of let-7 microRNA on Cell Growth and Differentiation of Papillary Thyroid Cancer

Papillary thyroid carcinoma (PTC) is the most common endocrine malignancy and RET/PTC rearrangements represent key genetic events frequently associated to this cancer, enhancing proliferation and dedifferentiation by activation of the RET/PTC-RAS-BRAF-mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway. Recently, let-7 microRNA was found to reduce RAS levels in lung cancer, acting as a tumor suppressor gene. Here, we report that RET/PTC3 oncogenic activation in PCCL3 rat thyroid cells markedly reduces let-7f expression. Moreover, stable transfection of let-7 microRNA in TPC-1 cells, which harbor RET/PTC1 rearrangement, inhibits MAPK activation. As a result, let-7f was capable of reducing TPC-1 cell growth, and this might be explained, at least in part, by decreased messenger RNA (mRNA) expression of cell cycle stimulators such as MYC and CCND1 (cyclin D1) and increased P21 cell cycle inhibitor mRNA. In addition, let-7 enhanced transcriptional expression of molecular markers of thyroid differentiation such as TITF1 and TG. Thus, reduced expression of let-7f might be an essential molecular event in RET/PTC malignant transformation. Moreover, let-7f effects on thyroid growth and differentiation might attenuate neoplastic process of RET/PTC papillary thyroid oncogenesis through impairment of MAPK signaling pathway activation. This is the first functional demonstration of an association of let-7 with thyroid cancer cell growth and differentiation.

Early Changes in Gene Expression Induced by Tobacco Smoke: Evidence for the Importance of Estrogen within Lung Tissue

Lung cancer is the leading cause of cancer deaths in the United States, surpassing breast cancer as the primary cause of cancer-related mortality in women. The goal of the present study was to identify early molecular changes in the lung induced by exposure to tobacco smoke and thus identify potential targets for chemoprevention. Female A/J mice were exposed to either tobacco smoke or HEPA-filtered air via a whole-body exposure chamber (6 h/d, 5 d/wk for 3, 8, and 20 weeks). Gene expression profiles of lung tissue from control and smoke-exposed animals were established using a 15K cDNA microarray. Cytochrome P450 1b1, a phase I enzyme involved in both the metabolism of xenobiotics and the 4-hydroxylation of 17 beta-estradiol (E(2)), was modulated to the greatest extent following smoke exposure. A panel of 10 genes were found to be differentially expressed in control and smoke-exposed lung tissues at 3, 8, and 20 weeks (P < 0.001). The interaction network of these differentially expressed genes revealed new pathways modulated by short-term smoke exposure, including estrogen metabolism. In addition, E(2) was detected within murine lung tissue by gas chromatography-coupled mass spectrometry and immunohistochemistry. Identification of the early molecular events that contribute to lung tumor formation is anticipated to lead to the development of promising targeted chemopreventive therapies. In conclusion, the presence of E2 within lung tissue when combined with the modulation of cytochrome P450 1b1 and other estrogen metabolism genes by tobacco smoke provides novel insight into a possible role for estrogens in lung cancer. Cancer Prev Res; 3(6); 707-17. (C) 2010 AACR.

Fatores associados à realização dos exames de rastreamento para o câncer de próstata: um estudo de base populacional

O objetivo deste estudo foi analisar a prevalência da realização dos exames de rastreamento para o câncer de próstata em homens com 50 anos ou mais de idade, segundo variáveis socioeconômicas, demográficas, de comportamentos relacionados à saúde e presença de morbidade. O estudo foi do tipo transversal, de base populacional, e as análises estatísticas consideraram o delineamento da amostra. Os fatores associados à não realização dos exames de rastreamento do câncer de próstata, foram: ter de idade menor que 70 anos, ter escolaridade de até 8 anos, renda familiar per capita menor que 0,5 salário mínimo, não ter diabetes, ter limitação visual e não ter ido ao dentista no último ano. O SUS foi responsável pela realização de 41% dos exames de rastreamento do câncer de próstata referidos. Este estudo apontou que apesar da controvérsia sobre e efetividade do toque retal e da dosagem do Antígeno Específico Prostático (PSA) para a detecção do câncer de próstata, parcela significativa da população masculina vem realizando estes exames para os quais existem significativas desigualdades socioeconômicas quanto ao acesso.

Fatores associados a não realização da mamografia e do exame clínico das mamas: um estudo de base populacional em Campinas, São Paulo, Brasil

O objetivo deste estudo é analisar a prevalência da não realização do exame clínico das mamas e da mamografia segundo variáveis sócio-econômicas, demográficas e de comportamentos relacionados à saúde, em mulheres com 40 anos ou mais, residentes na cidade de Campinas, São Paulo, Brasil. O estudo foi do tipo transversal, de base populacional em uma amostra de 290 mulheres. Os fatores associados à não realização da mamografia, encontrados na análise multivariada, foram: ter 70 anos ou mais, ser de raça/cor negra e pertencer ao segmento de menor renda familiar per capita; e para a não realização do exame clínico das mamas foram: não ter companheiro e pertencer ao segmento de menor renda familiar per capita. O SUS foi responsável pela realização de 28,8% das mamografias e 38,2% dos exames clínicos das mamas. Verificou-se que a não realização dos exames preventivos para o câncer de mama está associada à existência de desigualdade racial e social, apontando para a necessidade de implementação de estratégias para a ampliação da cobertura das práticas preventivas para o câncer de mama, especialmente para os segmentos sociais mais vulneráveis.

Práticas preventivas de detecção de câncer em mulheres: comparação das estimativas dos inquéritos de saúde (ISA - Capital) e vigilância de fatores de risco e proteção para doenças crônicas por inquérito telefônico (VIGITEL - São Paulo)

OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi comparar estimativas obtidas em inquéritos domiciliar e telefônico, da realização dos exames de Papanicolaou e mamografia em mulheres residentes no município de São Paulo em 2008, segundo características sociodemográficas, bem como dimensionar as diferenças observadas. MÉTODOS: Foram utilizados os dados do ISA - Capital 2008, inquérito domiciliar realizado no município de São Paulo pela Universidade de São Paulo (USP), Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) e Secretaria de Estado da Saúde com apoio da Secretaria Municipal de Saúde de São Paulo, e do VIGITEL - São Paulo, inquérito telefônico realizado pelo Ministério da Saúde para Vigilância de Fatores de Risco e Proteção para Doenças Crônicas. Estimativas da realização do exame de Papanicolaou e mamografia na vida, bem como a realização no último ano foram comparadas segundo o tipo de inquérito (domiciliar/telefone) por meio de regressão de Poisson ajustada por idade e escolaridade. RESULTADOS: Não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre as estimativas obtidas pelo VIGITEL e ISA - Capital para as prevalências de realização de mamografia no último ano. No entanto, para as estimativas globais de realização do exame de Papanicolaou alguma vez na vida e no último ano e da mamografia na vida, foi possível verificar diferenças estatisticamente significantes, com prevalências de cobertura superiores entre as entrevistadas pelo inquérito telefônico. CONCLUSÃO: Os resultados sinalizam a tendência de superestimação de alguns indicadores de cobertura de mamografia e de exame de Papanicolaou nos dados de pesquisa via telefone, apontando a necessidade de novos estudos que também contribuam para o melhor entendimento das diferenças observadas com o uso de diferentes modalidades de inquéritos.

Rastreamento anterior para câncer de colo uterino em mulheres com alterações citológicas ou histológicas

OBJETIVO: Analisar a história de rastreamento citológico anterior em mulheres que apresentaram alterações citológicas e confirmação histológica para câncer cervical. MÉTODOS: Estudo transversal com 5.485 mulheres (15-65 anos) que se submeteram a rastreamento para o câncer cervical entre fevereiro de 2002 a março de 2003, em São Paulo e Campinas, SP. Aplicou-se questionário comportamental e foi feita a coleta da citologia oncológica convencional ou em base líquida. Para as participantes com alterações citológicas indicou-se colposcopia e, nos casos anormais, procedeu-se à biópsia cervical. Para investigar a associação entre as variáveis qualitativas e o resultado da citologia, utilizou-se o teste de qui-quadrado de Pearson com nível de significância de 5%. RESULTADOS: Dentre os resultados citológicos, 354 (6,4%) foram anormais, detectando-se 41 lesões intra-epitelial escamosa de alto grau e três carcinomas; em 92,6% revelaram-se normais. De 289 colposcopias realizadas, 145 (50,2%) apresentaram alterações. Dentre as biópsias cervicais foram encontrados 14 casos de neoplasia intra-epitelial cervical grau 3 e quatro carcinomas. Referiram ter realizado exame citológico prévio: 100% das mulheres com citologia compatível com carcinoma, 97,6% das que apresentaram lesões intra-epiteliais de alto grau, 100% daquelas com confirmação histológica de carcinoma cervical, e 92,9% das mulheres com neoplasia intra-epitelial cervical grau 3. A realização de citologia anterior em período inferior a três anos foi referida, respectivamente, por 86,5% e 92,8% dessas participantes com alterações citológicas e histológicas. CONCLUSÕES: Entre as mulheres que apresentaram confirmação histológica de neoplasia intra-epitelial cervical grau 3 ou carcinoma e aquelas que não apresentaram alterações histológicas não houve diferença estatisticamente significante do número de exames citológicos realizados, bem como o tempo do último exame citológico anterior.

Tabagismo e câncer no Brasil: evidências e perspectivas

Neste artigo analisa-se a tendência temporal da prevalência do tabagismo no Brasil, bem como as assimetrias da prevalência de acordo com as regiões do país, a idade, o gênero e o nível socioeconômico da população. Desde o estabelecimento da relação entre tabagismo e câncer de pulmão há 60 anos, o número de tumores malignos com evidências de associação causal com o tabagismo ascendeu a vinte. O declínio da prevalência do tabagismo na população brasileira tem sido constante desde o final da década de 80. Até 2003, foi mais intenso entre os homens. A partir daquele ano, a queda tornou-se mais pronunciada entre as mulheres. As mais altas prevalências de tabagismo encontram-se no Sudeste e Sul, as duas regiões com maiores incidências de neoplasias estritamente relacionadas ao tabaco (cavidade oral, esôfago e pulmão). A exposição ambiental à fumaça do tabaco também foi examinada considerando-se os efeitos para os adultos não fumantes, que apresentam maior risco de tumores de pulmão, laringe e faringe, e entre crianças de pais fumantes, suscetíveis ao risco de hepatoblastoma e leucemia linfocítica aguda. Apesar do incontestável sucesso da política de controle do tabagismo no país, as ações de prevenção devem considerar que as parcelas da população com piores condições socioeconômicas e com baixo nível educacional são as que apresentam taxas mais altas de prevalência de tabagismo. Dentro destes segmentos populacionais os adolescentes representam uma prioridade

Prevalência do HPV em mulheres rastreadas para o câncer cervical

OBJETIVO: Analisar a prevalência da infecção genital por papilomavírus humano (HPV) de alto risco por faixa etária e fatores associados. MÉTODOS: Estudo transversal com amostra de 2.300 mulheres (15-65 anos) que buscaram rastreamento para o câncer cervical entre fevereiro de 2002 e março de 2003 em São Paulo e Campinas, estado de São Paulo. Aplicou-se questionário epidemiológico e realizou-se coleta cervical para citologia oncológica e teste de captura híbrida II. As análises estatísticas empregadas foram teste de qui-quadrado de Pearson e análise multivariada pelo método forward likelihood ratio. RESULTADOS: A prevalência total da infecção genital por HPV de alto risco foi de 17,8%, distribuída nas faixas etárias: 27,1% (<25 anos), 21,3% (25-34 anos), 12,1% (35-44 anos), 12,0% (45-54 anos) e de 13,9% (55-65 anos). Participantes com maior número de parceiros sexuais durante a vida apresentaram maior freqüência da infecção. Relacionamento estável, idade de 35 a 44 anos e ex-fumantes foram associados à proteção da infecção. A infecção genital por HPV de alto risco ocorreu em 14,3% das citologias normais, em 77,8% das lesões escamosas de alto grau e nos dois (100%) casos de carcinoma. CONCLUSÕES: A prevalência da infecção genital por HPV de alto risco na amostra estudada foi alta. Houve predomínio de casos abaixo dos 25 anos e tendência a um novo aumento após os 55 anos, com maior freqüência naqueles com maior número de parceiros sexuais durante a vida

Prognostic index expression of cyclin-D1, cerbB-2 and VEGF: metastases vs corresponding primary cancers and metastatic vs non-metastatic adenocarcinomas

The prognostic relevance of different molecular markers in lung cancer is a crucial issue still worth investigating, and the specimens collected and analyzed represent a valuable source of material. Cyclin-D1, c-erbB-2 and vascular endothelial growth factor (VEGF) have shown to be promising as prognosticators in human cancer. In this study, we sought to examine the importance of Cyclin-D1, c-erbB-2 and VEGF, and to study the quantitative relationship among these factors and disease progression in metastases vs corresponding primary cancer, and metastatic vs non metastatic cancers. Material and Methods: We used immunohistochemistry and morphometric analysis to evaluate the amount of tumour staining for Cyclin-D1, c-erbB-2 and VEGF in 52 patients with surgically excised ademocarcinoma of the lung, and the outcome for our study was survival time until death from hematogenic metastases. Results: Metastasis presented lower c-erbB-2 expression than corresponding primary cancers (p=0.02). Cyclin-D1 and VEGF expression were also lower in metastases than in corresponding primary cancers, but this difference did not achieve statistical significance. Non-metastatic cancers also presented significantly lower Cyclin-D1 and c-erbB-2 expression than metastatic cancers (p<0.01 and p<0.01, respectively). Equally significant was the difference between higher c-erbB-2 expression by metastatic cancers compared to non-metastatic cancers (p=0.02). Considering survival in Kaplan-Maier analysis, Cyclin-D1 (p=0.04), c-erbB-2 (p=0.04) and VEGF (p<0.01) were important predictors of survival in metastatic cancers.

Expression of Monocarboxylate Transporters 1, 2, and 4 in Human Tumours and Their Association with CD147 and CD44

Monocarboxylate transporters (MCTs) are important cellular pH regulators in cancer cells; however, the value of MCT expression in cancer is still poorly understood. In the present study, we analysed MCT1, MCT2, and MCT4 protein expression in breast, colon, lung, and ovary neoplasms, as well as CD147 and CD44. MCT expression frequency was high and heterogeneous among the different tumours. Comparing with normal tissues, there was an increase in MCT1 and MCT4 expressions in breast carcinoma and a decrease in MCT4 plasma membrane expression in lung cancer. There were associations between CD147 and MCT1 expressions in ovarian cancer as well as between CD147 and MCT4 in both breast and lung cancers. CD44 was only associated with MCT1 plasma membrane expression in lung cancer. An important number of MCT1 positive cases are negative for both chaperones, suggesting that MCT plasma membrane expression in tumours may depend on a yet nonidentified regulatory protein.

Prognostic value of TP53 Pro47Ser and Arg72Pro single nucleotide polymorphisms and the susceptibility to gliomas in individuals from Southeast Brazil

The TP53 tumor suppressor gene codifies a protein responsible for preventing cells with genetic damage from growing and dividing by blocking cell growth or apoptosis pathways. A common single nucleotide polymorphism (SNP) in TP53 codon 72 (Arg72Pro) induces a 15-fold decrease of apoptosis-inducing ability and has been associated with susceptibility to human cancers. Recently, another TP53 SNP at codon 47 (Pro47Ser) was reported to have a low apoptosis-inducing ability; however, there are no association studies between this SNP and cancer. Aiming to study the role of TP53 Pro47Ser and Arg72Pro on glioma susceptibility and oncologic prognosis of patients, we investigated the genotype distribution of these SNPs in 94 gliomas (81 astrocytomas, 8 ependymomas and 5 oligodendrogliomas) and in 100 healthy subjects by the polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism approach. Chi-square and Fisher exact test comparisons for genotype distributions and allele frequencies did not reveal any significant difference between patients and control groups. Overall and disease-free survivals were calculated by the Kaplan-Meier method, and the log-rank test was used for comparisons, but no significant statistical difference was observed between the two groups. Our data suggest that TP53 Pro47Ser and Arg72Pro SNPs are not involved either in susceptibility to developing gliomas or in patient survival, at least in the Brazilian population.

GSTP1 Ile105Val polymorphism in astrocytomas and glioblastomas

Glutathione S-transferases (GSTs) constitute a superfamily of ubiquitous multifunctional enzymes that are involved in the cellular detoxification of a large number of endogenous and exogenous chemical agents that have electrophilic functional groups. People who have deficiencies in this family of genes are at increased risk of developing some types of tumors. We examined GSTP1 Ile105Val polymorphism using PCR-RFLP in 80 astrocytoma and glioblastoma samples. Patients who had the Val allele of the GSTP1 Ile105Val polymorphism had an increased risk of tumor development (odds ratio = 8.60; 95% confidence interval = 4.74-17.87; P < 0.001). Overall survival of patients did not differ significantly. We suggest that GSTP1 Ile105Val polymorphisms are involved in susceptibility to developing astrocytomas and glioblastomas.

Selection of suitable housekeeping genes for expression analysis in glioblastoma using quantitative RT-PCR

Background: Considering the broad variation in the expression of housekeeping genes among tissues and experimental situations, studies using quantitative RT-PCR require strict definition of adequate endogenous controls. For glioblastoma, the most common type of tumor in the central nervous system, there was no previous report regarding this issue. Results: Here we show that amongst seven frequently used housekeeping genes TBP and HPRT1 are adequate references for glioblastoma gene expression analysis. Evaluation of the expression levels of 12 target genes utilizing different endogenous controls revealed that the normalization method applied might introduce errors in the estimation of relative quantities. Genes presenting expression levels which do not significantly differ between tumor and normal tissues can be considered either increased or decreased if unsuitable reference genes are applied. Most importantly, genes showing significant differences in expression levels between tumor and normal tissues can be missed. We also demonstrated that the Holliday Junction Recognizing Protein, a novel DNA repair protein over expressed in lung cancer, is extremely over-expressed in glioblastoma, with a median change of about 134 fold. Conclusion: Altogether, our data show the relevance of previous validation of candidate control genes for each experimental model and indicate TBP plus HPRT1 as suitable references for studies on glioblastoma gene expression.

Epigenetic Silencing of CRABP2 and MX1 in Head and Neck Tumors

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a heterogeneous disease affecting the epithelium of the oral cavity, pharynx and larynx. Conditions of most patients are diagnosed at late stages of the disease, and no sensitive and specific predictors of aggressive behavior have been identified yet. Therefore, early detection and prognostic biomarkers are highly desirable for a more rational management of the disease. Hypermethylation of CpG islands is one of the most important epigenetic mechanisms that leads to gene silencing in tumors and has been extensively used for the identification of biomarkers. In this study, we combined rapid subtractive hybridization and microarray analysis in a hierarchical manner to select genes that are putatively reactivated by the demethylating agent 5-aza-2'-deoxycytidine (5Aza-dC) in HNSCC cell lines (FaDu, UM-SCC-14A, UM-SCC-17A, UM-SCC-38A). This combined analysis identified 78 genes, 35 of which were reactivated in at least 2 cell lines and harbored a CpG island at their 5' region. Reactivation of 3 of these 35 genes (CRABP2, MX1, and SLC15A3) was confirmed by quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR; fold change, >= 3). Bisulfite sequencing of their CpG islands revealed that they are indeed differentially methylated in the HNSCC cell lines. Using methylation-specific PCR, we detected a higher frequency of CRABP2 (58.1% for region 1) and MX1 (46.3%) hypermethylation in primary HNSCC when compared with lymphocytes from healthy individuals. Finally, absence of the CRABP2 protein was associated with decreased disease-free survival rates, supporting a potential use of CRABP2 expression as a prognostic biomarker for HNSCC patients.

A Genome-Wide Association Study of Upper Aerodigestive Tract Cancers Conducted within the INHANCE Consortium

Genome-wide association studies (GWAS) have been successful in identifying common genetic variation involved in susceptibility to etiologically complex disease. We conducted a GWAS to identify common genetic variation involved in susceptibility to upper aero-digestive tract (UADT) cancers. Genome-wide genotyping was carried out using the Illumina HumanHap300 beadchips in 2,091 UADT cancer cases and 3,513 controls from two large European multi-centre UADT cancer studies, as well as 4,821 generic controls. The 19 top-ranked variants were investigated further in an additional 6,514 UADT cancer cases and 7,892 controls of European descent from an additional 13 UADT cancer studies participating in the INHANCE consortium. Five common variants presented evidence for significant association in the combined analysis (p <= 5 x 10(-7)). Two novel variants were identified, a 4q21 variant (rs1494961, p = 1 x 10(-8)) located near DNA repair related genes HEL308 and FAM175A (or Abraxas) and a 12q24 variant (rs4767364, p = 2 x 10(-8)) located in an extended linkage disequilibrium region that contains multiple genes including the aldehyde dehydrogenase 2 (ALDH2) gene. Three remaining variants are located in the ADH gene cluster and were identified previously in a candidate gene study involving some of these samples. The association between these three variants and UADT cancers was independently replicated in 5,092 UADT cancer cases and 6,794 controls non-overlapping samples presented here (rs1573496-ADH7, p = 5 x 10(-8); rs1229984-ADH1B, p = 7 x 10(-9); and rs698-ADH1C, p = 0.02). These results implicate two variants at 4q21 and 12q24 and further highlight three ADH variants in UADT cancer susceptibility.