Characterization of the glial scar tissue in a murine model of spinal cord compression, with focus on hyaluronan

Spinal cord injury (SCI) is a devastating neurological disorder that affects thousands of people each year. Although in recent decades significant progress has been made in relation to understanding the molecular and cellular events underlying the nervous damage, spinal cord injury is still a highly disabling condition for which there is no curative therapy. People affected by spinal cord injuries manifested dysfunction or loss, temporary or permanent, of motor, sensory and / or autonomic functions depending on the spinal lesion damaged. Currently, the incidence rate of this type of injury is approximately 15-40 cases per million people worldwide. At the origin of these lesions are: road accidents, falls, interpersonal violence and the practice of sports. In this work we placed the hypothesis that HA is one of the component of the scar tissue formed after a compressive SCI, that it is likely synthetised by the perilesional glial cells and that it might support the permeation of the glial scar during the late phase of SCI. Nowadays, much focus is drawn on the recovery of CNS function, made impossible after SCI due to the high content of sulfated proteoglycans in the extracellular matrix. Counterbalancing the ratio between these proteoglycans and hyaluronic acid could be one of the experimental therapy to re-permeate the glial scar tissue formed after SCI, making possible axonal regrowth and functional recovery. Therefore, we established a model of spinal cord compression in mice and studied the glial scar tissue, particularly through the characterization of the expression of enzymes related to the metabolism of HA and the subsequent concentration thereof at different distances of the lesion epicenter. Our results show that the lesion induced in mice shows results similar to those produced in human lesions, in terms of histologic similarities and behavioral results. but these animals demonstrate an impressive spontaneous reorganization mechanism of the spinal cord tissue that occurs after injury and allows for partial recovery of the functions of the CNS. As regards the study of the glial scar, changes were recorded at the level of mRNA expression of enzymes metabolizing HA i.e., after injury there was a decreased expression of HA synthases 1-2 (HAS 1-2) and an increase of the expression HAS3 synthase mRNA, as well as the enzymes responsible for the HA catabolism, HYAL 1-2. But the amount of HA measured through the ELISA test was found unchanged after injury, it is not possible to explain this fact only with the change of expression of enzymes. At two weeks and in response to SCI, we found synthesized HA by reactive astrocytes and probably by others like microglial cells as it was advanced by the HA/GFAP+ and HA/IBA1+ cells co-location.

Validade e fiabilidade do protocolo de avaliação da qualidade vocal da Universidade de Aveiro

O presente estudo teve como principal objetivo rever a versão original do Protocolo de Avaliação da Qualidade Vocal da Universidade de Aveiro (PAQVUA), criar o respetivo manual, comprovar a validade de conteúdo do PAQVUA assim como a sua fiabilidade inter e intra avaliador. Para rever a versão original do PAQVUA, foi efetuada uma revisão narrativa da literatura, com o objetivo de encontrar informação que revelasse a pertinência, da versão original do protocolo, para assim se efetuarem as alterações necessárias. Para analisar a validade de conteúdo recorreu-se a um painel de peritos, num total de seis, especialistas na área da voz que avaliaram as provas do PAQVUA, folha de registo e manual. Os peritos avaliaram todos os componentes do PAQVUA através do preenchimento de um questionário com o objetivo de se comprovar a relevância, clareza e precisão de cada uma das provas de avaliação e também o conteúdo do seu manual. Para além disso pretendeu-se também comprovar a fiabilidade inter e intra avaliador do PAQVUA. Para isso, o mesmo protocolo foi aplicado duas vezes por duas avaliadoras diferentes e também foi aplicado em dois momentos temporais diferentes por uma só avaliadora. A amostra teve um total de doze participantes. Para analisar estatisticamente os resultados da validade de conteúdo utilizou-se o método gráfico Bland e Altman modificado e o Coeficiente de Correlação Intraclasses (CCI). Para a fiabilidade inter e intra avaliador recorreu-se ao Coeficiente de Correlação de Spearman (ρ) e ao Kappa de Cohen (k). Relativamente aos resultados obtidos com o método Bland e Altman modificado, verificou-se a existência de concordância entre os peritos através da análise dos gráficos, sendo que a maioria dos pontos se encontrou dentro dos limites esperados de concordância. Quanto aos valores do CCI (entre 0.379 e 0.479), estes revelaram uma correlação regular. No que concerne à fiabilidade inter avaliador, os resultados de correlação e concordância apresentaram-se relevantes, com valores de ρ (de Spearman) superiores a 0.700 e valores de k (de Cohen) superiores a 0.600, na maioria dos casos. O mesmo foi constatado para a fiabilidade intra avaliador. Desta forma pode concluir-se que a nova versão do PAQVUA apresenta validade de conteúdo sendo tal comprovado pelo método de Bland-Altman modificado e pelos valores do CCI. Quanto à fiabilidade inter e intra avaliador, pode afirmar-se que o PAQVUA é fiável, porém como a amostra em estudo é pequena, o que a torna pouco representativa, esta conclusão carece de fundamento com base num estudo mais alargado. Apesar da limitação referida, acredita-se que este protocolo é uma mais-valia para o estudo da patologia vocal em ambiente clínico, assim como para a investigação científica nesta área, pois através do PAQVUA podem-se recolher diversas informações relacionadas com a voz, úteis para uma intervenção terapêutica baseada em evidências científicas.