Redox biology of myeloid leukaemias

Internal tandem duplication of FMS-like receptor tyrosine kinase (FLT3-ITD) has been associated with an aggressive AML phenotype. FLT3-ITD expressing cell lines have been shown to generate increased levels of reactive oxygen species (ROS) and DNA double strand breaks (dsbs). However, the molecular basis of how FLT3-ITD-driven ROS leads to the aggressive form of AML is not clearly understood. Herein, we observe that the majority of H2O2 in FLT3-ITD-expressing MV4-11 cells colocalises to the endoplasmic reticulum (ER). Furthermore, ER localisation of ROS in MV4-11 cells corresponds to the localisation of p22phox, a small membrane-bound subunit of NOX complex. Furthermore, we show that 32D cells, a myeloblast-like cell line transfected with FLT3-ITD, possess higher steady protein levels of p22phox than their wild type FLT3 (FLT3-WT)-expressing counterparts. Moreover, the inhibition of FLT3-ITD, using various FLT3 tyrosine kinase inhibitors, uniformly results in a posttranslational downregulation of p22phox. We also show that depletion of NOX2 and NOX4 and p22phox, but not NOX1 proteins causes a reduction in endogenous H2O2 levels. We show that genomic instability induced by FLT3-ITD leads to an increase in nuclear levels of H2O2. The presence of H2O2 in the nucleus is largely reduced by inhibition of FLT3-ITD or NOX. Furthermore, similar results are also observed following siRNA knockdowns of p22phox or NOX4. We demonstrate that 32D cells transfected with FLT3-ITD have a higher level of DNA damage than 32D cells transfected with FLT3-WT. Additionally, inhibition of FLT3-ITD, p22phox and NOX knockdowns decrease the number of DNA dsbs. In summary, this study presents a novel mechanism of genomic instability generation in FLT3-ITD-expressing AML cells, whereby FLT3-ITD activates NOX complexes by stabilising p22phox. This in turn leads to elevated generation of ROS and DNA damage in these cells.

Mockumentary as postnationalism: national identity in 'A Day Without a Mexican' by Sergio Arau

The turn to neoliberalism in the 1990s proved decisive for Mexico, as the NAFTA project embraced by the Salinas administration entailed a re-definition of national identity, defined since the revolution as mestizo, Catholic and especially as the Other to the United States. And just as cinema was in those days a crucial discourse for this particular construction of the identity, it was in the 1990s equally instrumental to its redefinition, which largely focused on the role of migrants to the US, presented even as supplementary in the Derridean sense. In 1992, as part of these efforts, Sergio Arau directed a mockumentary which in 2004 became a feature film, ‘A Day Without a Mexican’. As would befit more the seriousness of a documentary than the excess and parody of mockumentary, the stated aim in both was to advance a social agenda, arguing the case for immigrant labour and for Mexican presence in the US more generally. The film charts what would happen in California were all Latino immigrants to suddenly disappear, arguing chaos would ensue. Given the link between cinema and modernity and the relevance of cinema for the nation as an alternative public sphere, this chapter looks at the implications of choosing mockumentary, taken by many to be a paradigmatic postmodern and hybrid form, to discuss the hybridisation of national identity in a transnational film, in the present age of globalisation.

Komputerowe gry edukacyjne dla dzieci z trudnościami w czytaniu – doświadczenia polskie i irlandzkie.

W latach 2011-13 przeprowadziliśmy projekt badawczy, którego celem była ocena skuteczności komputerowych gier edukacyjnych jako narzędzia do treningu tempa czytania w pracy z dziećmi wolno czytającymi. W projekcie napotkaliśmy szereg nieprzewidzianych trudności; niniejszy artykuł stanowi refleksję nad nimi z perspektywy praktycznych możliwości i ograniczeń korzystania z komputerowych gier edukacyjnych w terapii pedagogicznej. Powolne czytanie rozumiemy jako trudność w automatyzacji procesu dekodowania. Zakładamy, że natura treningu komputerowego może służyć zaprojektowaniu skutecznego narzędzia do poprawy automatyzacji dekodowania. W tekście opisujemy przebieg trzykrotnej próby wdrożenia treningu tempa czytania dla dzieci z klas 3-6 na podstawie edukacyjnej gry komputerowej GraphoGame-Fluent. Okazało się, że zebrane w rezultacie dane były niewystarczające do odpowiedzi na postawione przez nas pytania dotyczące efektywności treningu i jego poszczególnych parametrów (tj. rodzaj trenowanego materiału – sylaba / wyraz, frekwencja w języku pisanym). W związku z powyższym, przedstawiamy krytyczne uwagi na temat trudności stojących przed badaczem (a także terapeutą) chcącym stosować edukacyjne gry komputerowe w terapii. Trudności mogą dotyczyć etapu wyboru gry (czy jest odpowiednia do problemu ucznia, skuteczna i motywująca), technicznych trudności ze sprzętem (dostępność komputerów i akcesoriów) oraz organizacji treningu (ograniczenia wynikające ze sztywnego stosowania systemu klasowo-lekcyjnego). Opis trudności w prowadzeniu badań w polskich szkołach zestawiamy z opisem takiego samego badania prowadzonego przez nas w szkołach w Irlandii.

Przygotowanie i podział na sylaby korpusu tekstów dla dzieci.

Artykuł dotyczy korpusu tekstów dla dzieci, który został utworzony na potrzeby projektu Graphogame-Fluent*, poświęconego ocenie skuteczności komputerowych gier edukacyjnych w terapii trudności w czytaniu (Szczerbiński et al. 2012). W artykule poruszono zagadnienia związane z przygotowaniem korpusu, przy czym najwięcej uwagi poświęcono podziałowi korpusu na sylaby (Śledziński 2010). W publikacji przedstawiono kilka istotnych pojęć lingwistycznych – definicje: sylaby, sonorności i skali sonorności. Na podstawie dostępnych definicji nie da się przeprowadzić jednoznacznego podziału na sylaby. Problem ten w szczególności dotyczy języka polskiego – ze względu na występujące licznie wieloelementowe grupy spółgłoskowe o strukturze niespotykanej w innych językach. Na potrzeby praktyczne można jednak zastosować określone procedury i rozwiązania umowne. W artykule zaproponowano dwuetapową procedurę sylabizacji. Pierwszy etap obejmuje wyznaczenie kategorii zbitek spółgłoskowych oraz ustalenie dla tych kategorii wstępnego podziału opartego na zasadzie sonorności (jeżeli jest to możliwe). Etap drugi związany jest z ustaleniem umownych szczegółowych reguł podziału dla konkretnych zbitek spółgłoskowych przy uwzględnieniu wskazówek, które również zostały omówione w artykule.

A small molecule activator of p300/CBP histone acetyltransferase promotes survival and neurite growth in a cellular model of Parkinson’s disease

Parkinson’s disease (PD) is a progressive neurodegenerative disease characterised by motor and non-motor symptoms, resulting from the degeneration of nigrostriatal dopaminergic neurons and peripheral autonomic neurons. Given the limited success of neurotrophic factors in clinical trials, there is a need to identify new small molecule drugs and drug targets to develop novel therapeutic strategies to protect all neurons that degenerate in PD. Epigenetic dysregulation has been implicated in neurodegenerative disorders, while targeting histone acetylation is a promising therapeutic avenue for PD. We and others have demonstrated that histone deacetylase inhibitors have neurotrophic effects in experimental models of PD. Activators of histone acetyltransferases (HAT) provide an alternative approach for the selective activation of gene expression, however little is known about the potential of HAT activators as drug therapies for PD. To explore this potential, the present study investigated the neurotrophic effects of CTPB (N-(4-chloro-3-trifluoromethyl-phenyl)-2-ethoxy-6-pentadecyl-benzamide), which is a potent small molecule activator of the histone acetyltransferase p300/CBP, in the SH-SY5Y neuronal cell line. We report that CTPB promoted the survival and neurite growth of the SH-SY5Y cells, and also protected these cells from cell death induced by the neurotoxin 6-hydroxydopamine. This study is the first to investigate the phenotypic effects of the HAT activator CTPB, and to demonstrate that p300/CBP HAT activation has neurotrophic effects in a cellular model of PD.