The uncertain consequences of transferring bacterial strains between laboratories - rpoS instability as an example

Abstract Background Microbiological studies frequently involve exchanges of strains between laboratories and/or stock centers. The integrity of exchanged strains is vital for archival reasons and to ensure reproducible experimental results. For at least 50 years, one of the most common means of shipping bacteria was by inoculating bacterial samples in agar stabs. Long-term cultures in stabs exhibit genetic instabilities and one common instability is in rpoS. The sigma factor RpoS accumulates in response to several stresses and in the stationary phase. One consequence of RpoS accumulation is the competition with the vegetative sigma factor σ70. Under nutrient limiting conditions mutations in rpoS or in genes that regulate its expression tend to accumulate. Here, we investigate whether short-term storage and mailing of cultures in stabs results in genetic heterogeneity. Results We found that samples of the E. coli K-12 strain MC4100TF exchanged on three separate occasions by mail between our laboratories became heterogeneous. Reconstruction studies indicated that LB-stabs exhibited mutations previously found in GASP studies in stationary phase LB broth. At least 40% of reconstructed stocks and an equivalent proportion of actually mailed stock contained these mutations. Mutants with low RpoS levels emerged within 7 days of incubation in the stabs. Sequence analysis of ten of these segregants revealed that they harboured each of three different rpoS mutations. These mutants displayed the classical phenotypes of bacteria lacking rpoS. The genetic stability of MC4100TF was also tested in filter disks embedded in glycerol. Under these conditions, GASP mutants emerge only after a 3-week period. We also confirm that the intrinsic high RpoS level in MC4100TF is mainly due to the presence of an IS1 insertion in rssB. Conclusions Given that many E. coli strains contain high RpoS levels similar to MC4100TF, the integrity of such strains during transfers and storage is questionable. Variations in important collections may be due to storage-transfer related issues. These results raise important questions on the integrity of bacterial archives and transferred strains, explain variation like in the ECOR collection between laboratories and indicate a need for the development of better methods of strain transfer.

Violência sexual intrafamiliar contra crianças e adolescentes: entre a prevenção do crime e do dano

OBJETIVOS: compreender as representações sociais de membros do Poder Judiciário acerca da prevenção da violência sexual intrafamiliar contra crianças e adolescentes. MÉTODOS: pesquisa de abordagem qualitativa que teve como campo de estudo as 1ª e 2ª Varas dos Crimes contra a Criança e o Adolescente, no Tribunal de Justiça de Pernambuco, com participação de 17 sujeitos (juiz, assessor, técnicos e analistas judiciários). Observação participante, entrevistas semiestruturadas e grupo focal compreenderam as técnicas para coleta de dados, que foram analisados por meio da interpretação dos sentidos. RESULTADOS: a categoria "cultura penal" emergiu dos discursos, bem como suas subcategorias: "prevenção do crime" e "prevenção do dano". CONCLUSÕES: as representações dos sujeitos revelam uma dicotomia, caracterizando o conflito entre a tradição do Poder Judiciário e o direito novo, que abrange os princípios da proteção integral e da prioridade absoluta às crianças e dos adolescentes. O conceito de prevenção da violência sexual intrafamiliar contra crianças e adolescentes deve ser ampliado para além da mera prevenção do crime. A abordagem do problema por meio da prevenção requer que se incorpore ao Poder Judiciário uma cultura penal que abarque os princípios da proteção integral e da prioridade absoluta.

O ATO MÉDICO NO CRIME DE TORTURA

A presente pesquisa verificou se a legislação surgida após a Segunda Guerra Mundial foi apta a inibir o comportamento maleficente de médicos no auxílio em especializar, dissimular e acobertar a tortura. Foi demonstrado o envolvimento médico com experimentos em seres humanos durante a Segunda Guerra Mundial e corroborou-se que a maleficência médica ainda é usada nos dias de hoje na sociedade contemporânea, permitindo aos profissionais de saúde, desde o período da Guerra Fria, o envolvimento com a tortura e a consequente violação dos princípios da Bioética, especialmente, na conjuntura atualíssima da guerra norte-americana contra o terrorismo. Ao final foram propostas soluções, tendo em vista as noções de Bioética, as normas de Direito Internacional e os Direitos Humanos