1 resultado para Sagüi comum selvagem - Estratégias reprodutivas

em ARCA - Repositório Institucional da FIOCRUZ


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A leishmaniose visceral (LV) uma doena infecto-parasitria causada por protozorios do gnero Leishmania. O trabalho teve como objetivo avaliar estratégias para o aprimoramento do diagnstico molecular na LV, que compreenderam a avaliao da eficincia de diferentes mtodos de extrao de DNA em amostras de urina; a anlise do uso da Reao em Cadeia da Polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) como ferramenta para a deteco do DNA de Leishmania infantum na referida amostra; e a padronizao de uma reao duplex qPCR para a deteco simultnea do DNA de L. infantum e do gene G3PD (controle endgeno). Depois da escolha do protocolo de extrao de DNA mais apropriado, e aps a otimizao e a anlise de reprodutibilidade, uma qPCR em urina foi padronizada. Em paralelo, aps o desenho e a sntese de sondas TaqMan compatveis com os sistemas LINF 1B e G3PD1, aps otimizao e anlise de reprodutibilidade, uma duplex qPCR em sangue tambm foi padronizada. Para avaliao dos protocolos desenvolvidos foram utilizadas tcnicas de estatstica descritiva. Para anlise comparativa com tcnicas clssicas de diagnstico da LV utilizou-se Teste Qui Quadrado de independncia ou Teste Exato de Fisher (p<0,05 e p<0,01, respectivamente). Como resultados, aps otimizao, o limite de deteco alcanado pela qPCR em urina utilizando o protocolo de extrao selecionado (kit comercial) foi de 5 fg/microlitros de amostra 0,034 parasitos) A duplex qPCR em sangue alcanou um limite de deteco de 2x102 fg/microlitros de amostra 1,4 (ou ~ 1,4 parasito), aps a otimizao. A partir dos dados estatsticos obtidos, pde-se analisar alta concordncia percentual entre a qPCR e urina e o conjunto de critrios diagnsticos (sorologia rK39 + qPCR em sangue), bem como entre a duplex qPCR em sangue e a qPCR em sangue, para os Grupos 01 (pacientes com suspeita de LV) e 02 (pacientes HIV positivos co-infectados ou no). Como um conjunto de critrios, os dois novos ensaios obtiveram excelentes concordncias com o conjunto de tcnicas clssicas: 88,89 por cento e 94,74 por cento para os Grupos 01 e 02, respectivamente. No houve diferenas estatsticas significativas entre os testes. Pde-se concluir que ambos os ensaios mostraram bom potencial para a incorporao, aps validao, ao diagnstico da LV; em conjunto ou individualmente (quando necessrio), trazendo mais conforto, praticidade, confiabilidade e rapidez ao diagnstico definitivo da patologia