2 resultados para N-type Ca2 Channel
em Université de Montréal
Resumo:
Les canaux calciques de type L CaV1.2 sont principalement responsables de lentree des ions calcium pendant la phase plateau du potentiel daction des cardiomyocytes ventriculaires. Cet influx calcique est requis pour initier la contraction du muscle cardiaque. Le canal CaV1.2 est un complexe oligomerique qui est compose de la sous-unite principale CaV1 et des sous-unites auxiliaires CaV et CaV21. CaV joue un role determinant dans ladressage membranaire de la sous-unite CaV1. CaV21 stabilise letat ouvert du canal mais le mecanisme moleculaire responsable de cette modulation na pas ete encore identifie. Nous avons recemment montre que cette modulation requiert une expression membranaire significative de CaV21 (Bourdin et al. 2015). CaV21 est une glycoproteine qui possede 16 sites potentiels de glycosylation de type N. Nous avons donc evalue le role de la glycosylation de type-N dans ladressage membranaire et la stabilite de CaV21. Nous avons dabord confirme que la proteine CaV21 recombinante, telle la proteine endogene, est significativement glycosylee puisque le traitement a la PNGase F se traduit par une diminution de 50 kDa de sa masse moleculaire, ce qui est compatible avec la presence de 16 sites Asn. Il sest avere par ailleurs que la mutation simultanee de 6/16 sites (6xNQ) est suffisante pour 1) reduire significativement la densite de surface de! CaV21 telle que mesuree par cytometrie en flux et par imagerie confocale 2) accelerer les cinetiques de degradation telle questimee apres arret de la synthese proteique et 3) diminuer la modulation fonctionnelle des courants generes par CaV1.2 telle quevaluee par la methode du patch-clamp . Les effets les plus importants ont toutefois ete obtenus avec les mutants N663Q, et les doubles mutants N348Q/N468Q, N348Q/N812Q, N468Q/N812Q. Ensemble, ces resultats montrent que Asn663 et a un moindre degre Asn348, Asn468 et Asn812 contribuent a la biogenese et la stabilite de CaV21 et confirment que la glycosylation de type N de CaV21 est necessaire a la fonction du canal calcique cardiaque de type L.
Resumo:
Linsuffisance cardiaque (IC) est associe un taux de mortalit et dhospitalisations lev causant un fardeau conomique important. Les deux causes majeures de dcs de lIC sont les arythmies ventriculaires ltales et les sidrations myocardiques. Il est maintenant reconnu que langiotensine II (ANGII) est l'un des principaux mdiateurs de lIC. Ses effets dltres dcoulent de lactivation du rcepteur de type 1 de lANGII (AT1) et entranent le dveloppement dhypertrophie. Toutefois, son rle dans la gense darythmies demeure incompris. De ce fait, l'tude des mcanismes lectriques et contractiles sous-jacents aux effets pathologiques de lANGII savre essentielle afin de mieux comprendre et soigner cette pathologie. Il est souvent peru que les femmes sont protges envers les maladies cardiovasculaires. Cependant, le nombre total de femmes dcdant dIC est plus grand que le nombre dhommes. galement, limpact des facteurs de risque diffre entre chaque sexe. Ces diffrences existent, mais les mcanismes sous-jacents sont encore peu connus. De plus, les femmes reoivent frquemment un diagnostic ou un traitement inappropri en raison dun manque dinformation sur les diffrences entre les sexes dans la manifestation dune pathologie. Ce manque de donnes peut dcouler du fait que les sujets de sexe fminin sont souvent sous-reprsents dans les essais cliniques ou la recherche fondamentale ce qui a grandement limit lavancement de nos connaissances sur ~50 % de la population. Ainsi, il semble plus que ncessaire dapprofondir notre comprhension des diffrences entre les sexes, notamment dans la progression de lIC. Lutilisation dun modle de souris transgnique surexprimant le rcepteur AT1 (souris AT1R) a permis dtudier les changements lectriques, structurels et contractiles avant et aprs le dveloppement dhypertrophie. Premirement, chez les souris AT1R mles, un ralentissement de la conduction ventriculaire a t observ indpendamment de lhypertrophie. Ce rsultat tait expliqu par une rduction de la densit du courant Na+, mais pas de lexpression du canal. Ensuite, le rle des protines kinases C (PKC) dans la rgulation du canal Na+ par lANGII a t explor. Les vidences ont suggr que la PKC tait responsable de la modulation de la diminution du courant Na+ chez les souris AT1R mles et dans les cardiomyocytes humains drivs de cellules souches induites pluripotentes (hiPSC-CM) en rponse un traitement chronique lANGII. Ensuite, les diffrences entre les sexes ont t compares chez la souris AT1R. Une plus grande mortalit a t constate chez les femelles AT1R suggrant quelles sont plus sensibles la surexpression de AT1R. Le remodelage lectrique ventriculaire a donc t compar entre les souris AT1R des deux sexes. Les courants ioniques taient altrs de faon similaire entre les sexes excluant ainsi leur implication dans la mortalit plus leve chez les femelles. Ensuite, lhomostasie calcique et la fonction cardiaque ont t tudies. Il a t dmontr que les femelles dveloppaient une hypertrophie et une dilatation ventriculaire plus svre que les mles. De plus, les femelles AT1R avaient de petits transitoires calciques, une extrusion du Ca2+ plus lente ainsi quune augmentation de la frquence des tincelles Ca2+ pouvant participer des troubles contractiles et la venue de post-dpolarisations prcoces. En conclusion, lANGII est implique dans le remodelage lectrique, structurel et calcique associ l'mergence de lIC. De surcrot, ces altrations affectent plus svrement les femelles soulignant la prsence de diffrences entre les sexes dans le dveloppement de lIC.
