Rapporto tecnico sulla ottimizzazione del processo di biosintesi di una Green Fluorescent Protein ricombinante estratta da A. sulcata

L’espressione di geni eterologhi in Escherichia coli rappresenta uno dei metodi più veloci, semplici ed economici per la produzione di ampie quantità di proteine target. Tuttavia, meccanismi di folding e le modifiche post traduzionali inducono a volte un non corretto ripiegamento delle proteine nella conformazione nativa, con successiva aggregazione in quelli che vengono definiti corpi di inclusione. Nel nostro caso, l’attenzione è stata focalizzata su una Green Fluorescent Protein (GFP) di 228 aa estratta da Anemonia sulcata, contenente un fluoroforo composto da tre amminoacidi Gln63, Tyr64, Gly65 all'interno di una struttura a barile. Il corretto folding della proteina era correlato strettamente alla funzionalità del fluoroforo. Il nostro obiettivo è stato quello, quindi, di ottimizzare il processo di biosintesi della GFP espressa in E. coli, ovviando alla formazione di corpi di inclusione contenenti la proteina (non funzionale), definendo e standardizzando inoltre, le condizioni che consentivano di produrre la più alta percentuale di GFP correttamente ripiegata (in condizioni non denaturanti) e quindi funzionale.

Recurrent varicose veins of the legs. Analysis of a social problem

The present study was aimed at assessing the experience of a single referral center with recurrent varicose veins of the legs (RVL) over the period 1993-2008. Among a total of 846 procedures for Leg Varices (LV), 74 procedures were for RVL (8.7%). The causes of recurrence were classified as classic: insufficient crossectomy (13); incompetent perforating veins (13); reticular phlebectasia (22); small saphenous vein insufficiency (9); accessory saphenous veins (4); and particular: post-hemodynamic treatment (5); incomplete stripping (1); Sapheno-Femoral Junction (SFJ) vascularization (5); post-thermal ablation (2). For the “classic” RVL the treatment consisted essentially of completing the previous treatment, both if the problem was linked to an insufficient earlier treatment and if it was due to a later onset. The most common cause in our series was reticular phlebectasia; when the simple sclerosing injections are not sufficient, this was treated by phlebectomy according to Mueller. The “particular” cases classified as 1, 2 and 4 were also treated by completing the traditional stripping procedure (+ crossectomy if this had not been done previously), considered to be the gold standard. In the presence of a SFJ neo-vascularization, with or without cavernoma, approximately 5 cm of femoral vein were explored, the afferent vessels ligated and, if cavernoma was present, it was removed. Although inguinal neo-angiogenesis is a possible mechanism, some doubt can be raised as to its importance as a primary factor in causing recurrent varicose veins, rather than their being due to a preexisting vein left in situ because it was ignored, regarded as insignificant, or poorly evident. In conclusion, we stress that LV is a progressive disease, so the treatment is unlikely to be confined to a single procedure. It is important to plan adequate monitoring during follow-up, and to be ready to reoperate when new problems present that, if left, could lead the patient to doubt the validity and efficacy of the original treatment.

ProgettoCNR Energy+: metodo di calcolo semplificato per la scomposizione della radiazione solare globale e la stima della produzione da fotovoltaico

Scopo del presente lavoro è la presentazione del codice di calcolo semplificato adoperato nella sezione “Simulatore fotovoltaico” presente sul portale www.energia.cnr.it del progetto CNR ENERGY+. Utilizzando i valori reali di radiazione solare misurati dalle stazioni meteorologiche installate presso alcune sedi del CNR il codice, con appropriati algoritmi, generala scomposizione della radiazione sul piano orizzontale e su superfici inclinate e variamente orientate, in modo da pervenire alla potenza prodotta da un ipotetico impianto fotovoltaico posto sullo stesso sito di ubicazione della stazione.