2 resultados para Penicillim chrysogenum. Experimental design. CMCase. Avicelase. Xylanase. FPase
em Repositório Institucional da Universidade Federal do Rio Grande - FURG
Resumo:
Xilanases so enzimas que catalisam a hidrlise das xilanas e tm sido em grande parte, obtidas a partir de bolores e bactrias. No entanto poucos estudos tm sido relatados sobre a produo destas enzimas por leveduras. O presente trabalho teve como objetivo isolar leveduras de diferentes fontes vegetais visando produo de xilanases, alm de maximizar sua produo, estudar o uso de diferentes fontes de nitrognio e cultivar as leveduras em meios contendo coprodutos agroindustriais. As amostras de alimentos e resduos foram enriquecidas em caldo extrato de malte e levedura e isoladas em gar Nutriente Wallerstein, as leveduras isoladas foram, a seguir, avaliadas quanto capacidade de degradar xilana presente no meio e produzir halos de hidrlise, os quais foram visualizados atravs do uso do corante vermelho congo. Os micro-organismos selecionados como potenciais produtores de xilanase foram crescidos em meio complexo lquido e as atividades enzimticas de endoxilanase, -xilosidase, carboximetilcelulase, celulase total, pH e concentrao de biomassa foram avaliadas ao longo de 96 h de cultivo. Dentre as leveduras isoladas, sete foram selecionadas, e a 18Y foi a que apresentou a maior atividade de endo- xilanase (2,7 U.mL-1 ), sendo esta isolada de chicria e identificada como Cryptococcus laurentii. Esta estirpe apresentou capacidade de produzir xilanase com baixos nveis de celulase, sendo assim selecionada neste trabalho. A maximizao de endo-xilanase foi avaliada fazendo uso de planejamento experimental onde primeiramente foi realizado um planejamento fracionrio 2 6-2 para verificar os efeitos do pH inicial e as concentraes de xilana, peptona, (NH4)2SO4, extrato de levedura e KH2PO4 sobre a atividade enzimtica. Aps selecionar as variveis xilana, peptona, pH e extrato de levedura foi realizado um delineamento composto central rotacional (24 ) onde todos os cultivos foram mantidos a 30C, 150 rpm durante 96 h sendo retiradas alquotas para determinao das atividades, pH e biomassa. A produo mxima foi de 6,9 U.mL-1 usando 10,0 g.L-1 de extrato de levedura, 10,0 g.L-1 de peptona, 10,0 g.L-1 de xilana, 1,0 g.L-1 de (NH4)2SO4 em pH 6,5 o que permitiu um incremento de mais de 250% sobre a atividade. Posteriormente foram realizados ensaios avaliando diferentes fontes e concentraes de nitrognio orgnico e inorgnico. A presena de NH4NO3 e (NH)SO usados na concentrao de 3% proporcionaram as maiores atividades de endo-xilanase (6,2 e 6,0 U.mL-1 respectivamente). O sulfato de amnio foi selecionado e fixado em 1 g.L-1 e logo aps um planejamento completo 22 foi realizado onde as variveis xilana e extrato de levedura foram estudadas e as demais fixadas. As condies timas estabelecidas para a produo da enzima foram: concentrao de xilana de 18,6 g.L-1 , concentrao de extrato de levedura de 10 g.L-1 atingindo 14 U.mL-1 . Aps a maximizao enzimtica estudou-se o crescimento de Pichia pastoris NRRL Y-1603 e Cryptococcus laurentti em cinco substratos agroindustriais visando a possibilidade estes substratos substiturem a xilana em cultivos para a produo de endo-xilanase. Os ensaios foram realizados utilizando os subtratos pr-tratados com NaOH 4% e no tratados. Para insero dos mesmos aos meios de cultivo, estes foram modos e adicionados na concentrao de 2%. O pr-tratamento para todos as fontes de hemicelulose foi eficiente e promoveu aumento nas atividades produzidas. Cryptococcus laurentti apresentou maior atividade enzimtica (8,7 U.mL-1 ) em farelo de arroz desengordurado e pr- tratado enquanto que a levedura Pichia pastoris NRRL Y-1603 apresentou sua melhor condio para produo de endo-xilanase quando cultivada em meio contendo casca de aveia e o farelo de arroz pr-tratados, alcanando atividades mximas de 7,6 e 7,5 U.mL-1 .
Resumo:
O presente trabalho avaliou, na etapa experimental, um processo simultneo de catlise e fermentao lctica visando obter um iogurte com potenciais caractersticas nutracuticas e, na sua etapa terica, estabeleceu uma interlocuo entre a vivncia experimentalista e a teoria da cintica enzimtica, no que se refere converso da lactose e sntese de galactooligossacardeos (GOS). Na abordagem experimental, para um substrato especfico, avaliouse biocatlise conduzida simultaneamente fermentao, defasando a adio da enzima em relao ao incio do processo fermentativo. A fermentao foi realizada a partir de cultura lctica liofilizada comercial contendo dois micro-organismos probiticos, Bifidobacterium animalis e Lactobacillus acidophilus, associados aos micro-organismos caractersticos do iogurte, Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus. Foi utilizado um preparado enzimtico contendo -galactosidases obtidas de duas origens distintas: Kluyveromyces lactis e Aspergillus niger. Foram avaliados os efeitos da concentrao da enzima e do tempo de adio da enzima em um planejamento experimental 2 2 . As respostas foram s concentraes, ao final do processo, de lactose, de GOS, de glicose e de galactose e a hidrlise dos galactooligossacardeos ao longo do tempo. No que se refere abordagem terica, o presente trabalho considerou modelos matemticos de hidrlise de dissacardeos e converso da lactose, em que a inibio foi representada a partir do incremento da concentrao dos produtos da reao. No que se refere converso da lactose e sntese de GOS, o presente trabalho buscou estabelecer um modelo matemtico em que a inibio ocorreu por efeito do incremento das concentraes de glicose e de galactose, comparando-o com os modelos conhecidos na literatura. Verificou-se que o desempenho do modelo obtido no presente trabalho foi robusto em relao s premissas estabelecidas. Na comparao com resultados experimentais de converso enzimtica, o modelo mostrou-se capaz de minimizar o erro e de ajustar-se aos dados experimentais.
