6 resultados para |Zebrafish
em Repositório Institucional da Universidade Federal do Rio Grande - FURG
Resumo:
No plantio do arroz parte de um corpo dgua (rio, lago, lagoa) desviado para a irrigao da plantao, e, posteriormente, a gua utilizada nas lavouras devolvida ao rio/lago/lagoa de origem. Assim, seja por lixiviao ou por qualquer outro fator, a gua entra em contato com os agrotxicos que, anteriormente, foram utilizados na plantao, podendo causar danos qualidade do recurso hdrico e fauna lacustre, devido exposio a estes poluentes. O presente trabalho teve por objetivo verificar a citotoxicidade de agrotxicos (herbicida e inseticida), utilizados na rizicultura no estado do Rio Grande do Sul, em clulas hepticas da linhagem ZF-L. A partir da anlise de funcionalidade de trs alvos celulares diferentes, integridade da membrana celular, estabilidade lisossomal e atividade mitocondrial frente exposio ao Roundup Transorb , ao Furadan 350 SC e associao destes produtos. Foi analisada ainda, a capacidade de defesa das clulas, expostas aos poluentes escolhidos, no que diz respeito atividade de protenas extrusoras de xenobiticos, assim como expresso de tais protenas. A partir dos resultados obtidos foi verificado efeito citotxico de ambos os agrotxicos, bem como a mistura destes para todos os alvos verificados, apresentando ainda efeito inibitrio atividade de extruso de xenobiticos pelas glicoprotenas P (P-gps). Apenas quando expostas ao inseticida e mistura as clulas apresentaram um aumento na expresso de glicoprotenas (P-gp). Verificou-se a existncia de correlao negativa entre a citotoxicidade apresentada, principalmente na atividade mitocondrial e na integridade lisossomo e a atividade das P-gps. Em concluso, percebeu-se que as concentraes abaixo do permitido pela legislao brasileira, para os princpios ativos dos agrotxicos testados, mostraram-se txicas para todos os alvos de citotoxicidade testados neste estudo, com exceo da mitocndria, sugerindo que esta toxicidade apresentada pode ser devido aos surfactantes presentes nas formulaes comerciais.
Resumo:
Contaminantes orgnicos, como os hidrocarbonetos policclicos aromticos (HPAs), podem atingir corpos da gua e possuem potencial para causar efeitos txicos em organismos. A exposio aos HPAs causa induo nos nveis de citocromo P450 1A (CYP1A) em peixes, e portanto, utilizado como um biomarcador de contaminao ambiental. O guar Phalloceros caudimaculatus ocorre naturalmente em ambientes aquticos dulccolas e mixohalinos na Amrica do Sul. O presente estudo identificou a sequncia nucleotdica do transcrito CYP1A de P. caudimaculatus, que codifica uma protena com 521 aminocidos, e que apresenta 91% e 70% de identidade com CYP1A de killifish e paulistinha, respectivamente. A partir desta sequncia foi possvel realizar a avaliao dos nveis de mRNA de CYP1A deste peixe por RTq-PCR. Foi realizada uma caracterizao de sua induo rgo- e tempo-dependente frente a exposio ao HPA beta-naftoflavona (BNF) e ao elutriato preparado a partir de sedimento de dois corpos da gua possivelmente contaminados com HPAs. Foi constatado um aumento significativo nos nveis de mRNA de CYP1A em fgado, brnquia, intestino, crebro, nadadeira anal de macho adultos e em alevinos na primeira hora de exposio a 1 M de BNF, em relao ao grupo controle. O rim e as nadadeiras caudal e dorsal apresentaram induo de CYP1A aps duas horas de exposio ao BNF. As maiores indues nos peixes dos grupos expostos ao BNF em relao ao controle foram de 176 no rim e 122 vezes no crebro, observadas respectivamente aps 8 e 48 horas de exposio. Os nveis de mRNA de CYP1A nos rgos e tecidos de alevino, mantiveramse induzidos pela exposio ao BNF at o final das 96 horas de exposio. A exposio dos peixes ao elutriato produzido a partir dos sedimentos coletados em dois locais potencialmente contaminados causou induo do CYP1A no fgado de 22 e 122 vezes em relao ao controle. Os resultados demonstram que a induo de CYP1A em Phalloceros caudimaculatus ocorre em tempos curtos de exposio, alm da variao de acordo com o tempo de exposio e com o rgo analisado. Alm disso, foi demonstrado que tecidos externos tambm podem ser utilizados para tais anlises e que o elutriato feito a partir de sedimento de locais que recebem descargas de contaminantes podem causar induo de CYP1A nos organismos.
Resumo:
O desenvolvimento de organismos transgnicos para o hormnio do crescimento (GH) tem sido considerado uma importante alternativa para o aumento nas taxas de crescimento animal. Entretanto, os efeitos do excesso do GH no se limitam aos processos do crescimento. Sistemas fisiolgicos como o sistema imunolgico, j demonstraram ser prejudicados pelo desbalano dos nveis do GH. Tendo em vista a importncia da gerao de organismos transgnicos para o GH no mbito da aquicultura, esforos se fazem necessrios na elaborao de estratgias com o intuito de reduzir ou compensar os efeitos adicionais do excesso de GH. Nos hipotetizamos que a gerao de peixes duplo transgnicos os quais superexpressem GH e GHR apenas no msculo esqueltico, poderia ser uma possvel alternativa para compensar os efeitos prejudiciais ocasionados pelo excesso de GH sobre os sistemas fisiolgicos mantendo, ao mesmo tempo, as altas taxas de crescimento. Afim de testar esta hiptese, ns avaliamos a morfometria de rgos imunes, como o timo, o rim ceflico e o bao; os contedos de clulas T CD3+ e CD4+ no timo e no rim anterior e a expresso de genes relacionados imunidade. Contrariando as expectativas iniciais, os resultados revelaram que a superexpresso do GHR no msculo esqueltico no capaz de diminuir os efeitos danosos causados pelo GH no tamanho do timo e rim anterior e no contedo de clulas T CD3+ e CD4+ nestes rgos. Inesperadamente, zebrafish transgnicos somente para o GHR revelaram prejuzos nos aspectos imunes similares aos observados aos transgnicos para GH. De forma geral, estes resultados indicam que a dupla transgenia para o GH/GHR no capaz de atenuar os efeitos negativos causados pelo excess de GH sobre o sistema imunolgico de zebrafish transgnicos. Alm disso, a transgenia para genes componentes do eixo somatotrfico pode ainda reforar os danos as funes imunes em transgnicos, no recuperando os danos causados pelo excesso de GH.
Resumo:
Agroqumicos so amplamente utilizados na atividade agrcola com o objetivo de aumentar a produo e melhorar a qualidade dos alimentos, no entanto podem vir a gerar danos ao meio ambiente e a organismos no-alvo. Dentre esses pesticidas encontra-se o herbicida glifosato, o qual vem sendo mais utilizado mundialmente. Seu mecanismo de ao se d atravs da inibio da enzima 5-enolpiruvilshikimato-3- fosfatosintase, intermediria da sntese de aminocidos aromticos essenciais em plantas. Pouco se sabe sobre os efeitos da substncia glifosato em animais, pois os estudos realizados visam principalmente os efeitos da formulao comercial, a qual contm surfactantes e outras substncias inertes. Tendo isso em vista, esse estudo avaliou o efeito do glifosato no telesteo Danio rerio considerando parmetros de estresse oxidativo, atividade e expresso da acetilcolinesterase e parmetros reprodutivos. Foram feitas exposies a 5 mg/L e 10 mg/L de glifosato, mais um grupo controle por 24 e 96 horas, somente com peixes machos. Para anlise bioqumica foram retirados crebro, brnquias e msculo; para anlise molecular, crebro e msculo; e para anlise na qualidade espermtica dos peixes, os testculos. Quanto s anlises bioqumicas houve um aumento na capacidade antioxidante contra radicais peroxil nas brnquias na concentrao de 5 mg/L aps 24 horas de exposio; uma reduo na peroxidao lipdica no crebro na maior concentrao (10 mg/L) aps 24h e um aumento da mesma em msculo, tambm em 10 mg/L, aps 96 horas. No foi observada alterao na gerao de espcies reativas de oxignio decorrente da exposio ao glifosato, assim como na atividade da enzima acetilcolinesterase; j na expresso gnica desta enzima houve uma diminuio no crebro aps 24 horas de exposio e um aumento no crebro e no msculo aps 96 horas. Quanto qualidade espermtica dos peixes, houve uma reduo na motilidade e perodo de motilidade dos espermatozides nas concentraes de 5 mg/L e 10 mg/L em ambos tempos de exposio; na concentrao de 10 mg/L ainda houve uma reduo da funcionalidade mitocondrial, integridade de membrana do espermatozide e integridade de DNA aps 24 e 96 horas. Sendo assim, o glifosato se mostrou capaz de alterar o balano oxidativo dos tecidos do peixe Danio rerio bem como alterar significativamente a expresso gnica da enzima acetilcolinesterase. Alm disso, nossos resultados demonstram que o glifosato pode interferir na reproduo deste animal, atravs da reduo de sua qualidade espermtica.
Resumo:
As Microcistinas so heptapeptdios cclicos produzidos como metablitos secundrios por diferentes espcies de cianobactrias, sendo relevantes pelo seu potencial hepatotxico. Peixes apresentam estratgias bioqumicas para detoxificar contaminantes ambientais, incluindo a ativao de enzimas de fase II de biotransformao, que incluem as isoformas de glutationa S-transferase (GST). As GST catalizam a conjugao de glutationa reduzida (GSH) com uma variedade de xenobiticos, incluindo as microcistinas. O presente estudo avaliou os nveis transcricionais de quinze isoformas de GST a fim de identificar isoformas possivelmente envolvidas na detoxificao de contaminantes ambientais como a microcistina-LR (MC-LR) em Danio rerio. A tcnica de PCR em tempo real (RT-qPCR) foi utilizada para avaliao dos nveis transcricionais, permitindo anlise das GST em diferentes rgos, abundncia e a ativao/represso das isoformas de GST pela exposio MC-LR. Foram avaliados os possveis efeitos causados em brnquia e fgado aps exposio por 24 hs s concentraes de 5 g.L-1 e 50 g.L-1 de MC-LR. Baseado nos scores de estabilidade para oito genes normalizadores, foram selecionados glicose-6-fosfato desidrogenase (g6pdh), -actina1 e beta-2-microglobulina (b2m); b2m, alfa-tubulina 1 (tuba) e - actin1; e tuba, b2m e g6pdh, para normalizao dos nveis trancricionais de GST para distribuio rgo-especfica, abundncia e efeito da MC-LR em brnquia e fgado, respectivamente. A avaliao transcricional da distribuio rgo-especfica revelou nveis significativos de gstal e gstk1.1 no fgado; gstp1 e gstp2 em brnquia; mgst3a, gstr1, gstm2, gstm33, gstp1, gstp2 e gstk1.1 no intestino; gstm2, gstm3 e gstal no olho e gstt1a e gsta2.1 no crebro. Considerando os nveis de transcritos para um dado rgo, gstk1.1, gstal, gstp1 e gstt2 foram mais abundantes nos rgos de detoxificao, tais como o fgado, brnquias e intestino, enquanto gstt1a e gsta2.1 foram mais abundantes no rim. Em brnquia, gsta2.1 e gstt1b foram reprimidas por 5 g.L-1 de MC-LR e mgst1.1 foi reprimida em 50 g.L-1 de MC-LR. No fgado, as isoformas gst2.2 e gstp2 foram reprimidas em ambas as concentraes, gstal foi reprimida em 5 g.L-1, e gstt1a e gstk1.1 foram reprimidas em 50 g.L-1 de MC-LR. As isoformas gstal, gstr1, gstp1, mgst3a, gstm1, gstm2 e gstm3 no foram alteradas pela exposio a MC-LR. Os resultados obtidos fornecem informaes para a escolha de isoformas especficas de GST possivelmente envolvidas na detoxificao/toxicidade de MC-LR, a serem melhores caracterizadas ao nvel protico e tambm contribui para a escolha de genes normalizadores a serem utilizados em outros estudos da mesma natureza
Resumo:
Os nanomateriais apresentam uma escala na qual ao menos uma das dimenses varia entre 1 e 100 nm e possuem propriedades qumicas, fsicas ou biolgicas dependentes da nanoestrutura e que lhes confere caractersticas funcionais de interesse para fins comerciais ou aplicaes na rea mdica. Dentre os nanomateriais mais estudados e utilizados, destacam-se os de carbono, que incluem os fulerenos e os nanotubos de carbono (NT). Uma potencial utilizao dos nanomateriais de carbono na rea biomdica, j que estes podem interagir com os sistemas biolgicos em nvel molecular e supramolecular com alto grau de especificidade. Em contrapartida, importante considerar que os nanotubos de carbono podem exercer efeitos txicos, tendo como possvel mecanismo o estresse oxidativo. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi investigar a ao dos nanotubos de carbono de parede nica funcionalizados com polietilenoglicol (SWNT-PEG) em Danio rerio zebrafish (Teleostei, Cyprinidae). Avaliaram-se parmetros bioqumicos, histolgicos, comportamentais e de biodistribuio para entender como esse material se comporta in vitro e in vivo. Foi observado que o tipo de funcionalizao determinante para a ao desse material em meio biolgico. No experimento in vitro o SWNT-PEG no mostrou efeito pr-oxidante nas avaliaes de peroxidao lipdica, capacidade antioxidante total, contedo de GSH e atividade de GCL. Na exposio intraperitoneal em zebrafish constatou-se a agregao e gerao de processo inflamatrio, o que sugere que a cadeia de PEG utilizada para a funcionalizao dos NT possui um tamanho inadequado e/ou uma funcionalizao ineficiente para manter a estabilidade do material em meio biolgico e evitar uma resposta inflamatria por parte do organismo exposto. Possivelmente devido a esta caracterstica do nanomaterial, nas anlises de biodistribuio, atravs de espectroscopia Raman, no se observou distribuio de SWNT-PEG no sistema nervoso central de zebrafish. No entanto, atravs da anlise histolgica foi observado processo inflamatrio no tecido nervoso central, bem como alteraes comportamentais avaliadas na tarefa de campo aberto.
