Infecção de mycobacterium bovis em células fagocíticas: estratégia aplicada ao diagnóstico da tuberculose bovina

Neste trabalho foram estudadas as interacções entre Mycobacterium bovis e células hospedeiras, na perspectiva de aplicar os conhecimentos resultantes desse estudo ao melhoramento do diagnóstico da tuberculose bovina. Foi estudada a dinâmica da infecção de células fagocíticas com estirpes de M. bovis, com ênfase para a invasão e multiplicação intracelular das micobactérias. Avaliações efectuadas por citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e contagem de colónias demonstraram que as micobactérias invadiram e replicaram em todos os modelos celulares, sendo que as células epiteliais de pulmão de bovino foram as mais permissivas ao seu crescimento. Foi nas células macrofágicas J774 e THP-1 que se verificaram as maiores concentrações micobacterianas, pelo que foram utilizadas para a detecção e identificação de M. bovis por um método molecular. A optimização da extracção de DNA, por um processo mecânico, e o desenvolvimento do método de PCR-RFLP baseado no gene gyrB, com controlo interno, permitiram a identificação de M. bovis. A sensibilidade deste método foi de 100% quando aplicado a estirpes isoladas e apenas de 40% quando utilizado directamente em amostras de macerados de tecidos de bovinos com tuberculose. Uma pré-incubação (3 dias) das amostras nas culturas celulares contribuiu para melhorar significativamente a sensibilidade (77%) do PCR-RFLP gyrB. A cultura celular, como matriz a ser utilizada para aumentar a quantidade de M. bovis presente em amostras biológicas, revela-se um método promissor para o diagnóstico laboratorial rápido, específico e sensível da tuberculose bovina. ### - Summary - Interactions between Mycobacterium bovis and host cells were studied with the purpose to apply the outcome knowledge in the improvement of bovine tuberculosis diagnosis. The dynamic of infection of four cell models with three strains of M. bovis was evaluated, with emphasis given to the invasion and intracellular multiplication of mycobacteria. Assessments by flow cytometry, fluorescence microscopy and colony counting showed that every cell models permitted the replication of mycobacteria, although bovine lung epithelial cells had been the most permissive one. The highest mycobacteria) load was found, however, in J774 and THP-1 macrophages, and hence these cells were used for the optimization of a molecular method for detection and identification of M. bovis. The optimisation of a DNA extraction step, by a mechanical process, and the development of PCR-RFLP based on gyrB gene, with an internal control, allowed the identification of M. bovis. The sensitivity of this method was 100% when applied to isolated strains and only 40% when directly used on samples of macerated of tissues from cattle with tuberculosis. Assays in which a pre-incubation step (three days) of biological samples in cell cultures was introduced significantly improved the sensitivity (77%) of the gyrB PCR-RFLP. Cell cultures as a support for growth and rapid isolation of M. bovis is a promising method for the specific, sensitive and rapid laboratorial diagnosis of bovine tuberculosis.

A educação no processo de interação entre o enfermeiro e a pessoa idosa/família na comunidade

Objetivo: Compreender a educação no processo de interação entre o enfermeiro e a pessoa idosa e família no domicílio. Estudo de natureza qualitativa, enquadrado nos principais pressupostos do Interacionismo Simbólico e da Grounded Theory, em quatro freguesias do Agrupamento de Centros de Saúde do Ave III, com um total de inscritos de 80285 e destes 9,81% eram pessoas idosas com idades iguais ou superiores a 65 anos. Na colheita dos dados recorremos: (i) à observação não participante das práticas de enfermagem às pessoas idosas e família no domicílio;(ii) 12 entrevistas às enfermeiras observadas e 4 entrevistas em grupo (pessoa idosa e família). Emergiram as categorias: organização estrutural dos cuidados no domicílio; avaliação em contexto e intervenção terapêutica em contexto. A categoria central foi a “Construção da relação no contexto do domicílio” pelo facto da relação da enfermeira com o idoso e a família ser central em todo o processo de cuidados. Os conhecimentos fornecidos pela teoria substantiva “Cuidar no Domicílio – um Processo de Interação” fundamentada nos dados e na sua análise, fornecem contributos válidos para a prática de enfermagem nesta área específica do cuidar a pessoa idosa e família no domicílio e no contexto em que foi desenvolvido o estudo; ABSTRACT: Education in the Interaction Process between nurse and Elderly person/family in the community Objective: Understanding education in the interaction process between nurse and elderly and their relatives at home. Qualitative study, framed on Symbolic Interactionism and Grounded Theory main assumptions, counting with 802825 members of four parishes of Agrupamento de Centros de Saúde do Ave III, which 9, 81% were elderly and had 65 or more years old. Data collection instruments used: (i) non-participant observation of nursing practices with elderly and families at home, (ii) interviews of 12 nurses practices observed and 4 group interviews (family and elderly person). Categories emerged: structural organization of home care; assessment and therapeutic intervention in context. The core category emerged was "Construction of the relationship in the context of the household" once the relationship between nurse, elderly and family seem be central to the whole process of care. The knowledge provided by substantive theory "Caring at Home - An Interaction Process" founded on data analysis provided valuable contributions to nursing practice in this specific area of care, elderly care and their relatives at home, in which context study was developed.