Hantavirus glycoprotein GN in virion assembly and regulation of interferon response

Hantaviruses have a tri-segmented negative-stranded RNA genome. The S segment encodes the nucleocapsid protein (N), M segment two glycoproteins, Gn and Gc, and the L segment the RNA polymerase. Gn and Gc are co-translationally cleaved from a precursor and targeted to the cis-Golgi compartment. The Gn glycoprotein consists of an external domain, a transmembrane domain and a C-terminal cytoplasmic domain. In addition, the S segment of some hantaviruses, including Tula and Puumala virus, have an open reading frame (ORF) encoding a nonstructural potein NSs that can function as a weak interferon antagonist. The mechanisms of hantavirus-induced pathogenesis are not fully understood but it is known that both hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) and hantavirus (cardio) pulmonary syndrome (HCPS) share various features such as increased capillary permeability, thrombocytopenia and upregulation of TNF-. Several hantaviruses have been reported to induce programmed cell death (apoptosis), such as TULV-infected Vero E6 cells which is known to be defective in interferon signaling. Recently reports describing properties of the hantavirus Gn cytoplasmic tail (Gn-CT) have appeared. The Gn-CT of hantaviruses contains animmunoreceptor tyrosine-based activation motif (ITAM) which directs receptor signaling in immune and endothelial cells; and contain highly conserved classical zinc finger domains which may have a role in the interaction with N protein. More functions of Gn protein have been discovered, but much still remains unknown. Our aim was to study the functions of Gn protein from several aspects: synthesis, degradation and interaction with N protein. Gn protein was reported to inhibit interferon induction and amplication. For this reason, we also carried out projects studying the mechanisms of IFN induction and evasion by hantavirus. We first showed degradation and aggresome formation of the Gn-CT of the apathogenic TULV. It was reported earlier that the degradation of Gn-CT is related to the pathogenicity of hantavirus. We found that the Gn-CT of the apathogenic hantaviruses (TULV, Prospect Hill virus) was degraded through the ubiquitin-proteasome pathway, and TULV Gn-CT formed aggresomes upon treatment with proteasomal inhibitor. Thus the results suggest that degradation and aggregation of the Gn-CT may be a general property of most hantaviruses, unrelated to pathogenicity. Second, we investigated the interaction of TULV N protein and the TULV Gn-CT. The Gn protein is located on the Golgi membrane and its interaction with N protein has been thought to determine the cargo of the hantaviral ribonucleoprotein which is an important step in virus assembly, but direct evidence has not been reported. We found that TULV Gn-CT fused with GST tag expressed in bacteria can pull-down the N protein expressed in mammalian cells; a mutagenesis assay was carried out, in which we found that the zinc finger motif in Gn-CT and RNA-binding motif in N protein are indispensable for the interaction. For the study of mechanisms of IFN induction and evasion by Old World hantavirus, we found that Old World hantaviruses do not produce detectable amounts of dsRNA in infected cells and the 5 -termini of their genomic RNAs are monophosphorylated. DsRNA and tri-phosphorylated RNA are considered to be critical activators of innate immnity response by interacting with PRRs (pattern recognition receptors). We examined systematically the 5´-termini of hantavirus genomic RNAs and the dsRNA production by different species of hantaviruses. We found that no detectable dsRNA was produced in cells infected by the two groups of the old world hantaviruses: Seoul, Dobrava, Saaremaa, Puumala and Tula. We also found that the genomic RNAs of these Old World hantaviruses carry 5´-monophosphate and are unable to trigger interferon induction. The antiviral response is mainly mediated by alpha/beta interferon. Recently the glycoproteins of the pathogenic hantaviruses Sin Nombre and New York-1 viruses were reported to regulate cellular interferon. We found that Gn-CT can inhibit the induction of IFN activation through Toll-like receptor (TLR) and retinoic acid-inducible gene I-like RNA helicases (RLH) pathway and that the inhibition target lies at the level of TANK-binding kinase 1 (TBK-1)/ IKK epislon complex and myeloid differentiation primary response gene (88) (MyD88) / interferon regulatory factor 7 (IRF-7) complex.

Onnellisuuden taloustiede: Onnellisuus on suhteellista?

Tässä työssä käsitellään taloustieteellistä onnellisuustutkimusta keskittyen erityisesti onnellisuuden suhteellisuuden sekä onnellisuuden mittaamisen kysymyksiin. Taloustieteen onnellisuustutkimus on vielä melko nuorta, ja tutkimusala, kuten tämä työkin, nojaavat osittain myös muiden tieteenalojen tuloksiin. Työssä todetaan onnellisuuden olevan suurilta osin suhteellista, ja tällä on vaikutuksia niin taloustieteellisen hyödyn mallintamiselle kuin poliittiselle päätöksenteollekin. Suhteellisuuden elementti onnellisuudessa liittyy erityisesti tulojen vertailuun sekä positionaalisiin hyödykkeisiin. Onnellisuutta käsitellään mallintamisen yhteydessä tutkimusalan eräiden tärkeimpien nimien, Layardin (2003) sekä Blanchflowerin ja Oswaldin (2004) klassisen hyötyfunktion muunnoksilla, sillä onnellisuustaloustieteessä ei vielä ole esitetty kattavia matemaattisia malleja. Työ kokoaa yhteen useita onnellisuusaineistoja sisältäviä tutkimuksia, joista voidaan tehdä päätelmiä ihmisten onnellisuuden osatekijöistä. Näiden tutkimusten tuloksena voidaan arvioida, minkälaisia osa-alueita yhteiskunnan onnellisuusmittareiden tulisi sisältää. Samoin onnellisuustutkimus osoittaa, että esimerkiksi työttömyyden vaikutus onnellisuuteen on huomattavasti suurempi kuin työttömyyden vähentämän tulon vaikutus. Merkittäviä onnellisuustutkimuksen tuloksia liittyy myös Alesinan et al. (2004) laajasti tutkimaan tulonjaon ja onnellisuuden yhteyteen, sillä tulonjaon tasa-arvoisuus vaikuttaa eri maiden kansalaisiin keskimäärin eri tavoin. Tulonjaon epätasaisuus vähentää Euroopassa vähätuloisten onnellisuutta, kun taas Yhdysvalloissa parempituloisten onnellisuutta vähentää suurempi tuloepätasa-arvo, mitä voidaan pitää yllättävänä tuloksena Euroopan Yhdysvaltoja parempien sosiaalisen liikkuvuuden mahdollisuuksien valossa. Tuloepätasa-arvo vaikuttaa eri tavoin eri tuloryhmien sekä eri poliittisia ideologioita edustavien ryhmien edustajiin. Tämä pro gradu -työ selvittää myös miten onnellisuutta voidaan mitata ja ehdottaa tämän perusteella onnellisuusdatan käyttöä poliittisen päätöksenteon tukena. Tutkielmassa pohditaan myös, millaisia implikaatioita onnellisuustaloustiede antaa erityisesti valtion menojen vaikutukselle, vero- ja hyvinvointipolitiikalle sekä köyhyyden vastaiselle politiikalle. Erityisesti veropolitiikalle sekä köyhyyden vastaiselle politiikalle suhteellisuuden ja vertailun vaikutus onnellisuuteen ovat oleellisia, sillä kaikkien työn esittelemien tutkimusten ja aineistojen perusteella vertailu ja suhteellinen asema ovat onnellisuudelle tärkeitä.

Brändijohtamisen strategiset välineet: brändi-identiteetin ja brändimielikuvan vertaileva tutkimus

Tutkielman tavoitteet Tämän Pro gradu-tutkielman tavoitteena on selventää brändi-identiteetin ja brändimielikuvan suhdetta sekä osoittaa, että on hedelmällistä vertailla brändi-identiteettiä ja brändimielikuvaa. Tutkimusongelmana on, kuinka www-sivujen avulla voidaan johtaa johdonmukaista brändiä ja, mitä brändin johto hyötyy tarkasteltaessa brändi-identiteettiä ja brändimielikuvaa? Case-brändeinä toimivat tässä tutkimuksessa Vero Moda ja H&M. Tutkielman toteutus Tutkielman teoreettinen osa käsittelee brändiä, brändi-identiteettiä ja www-sivuja brändin johtamisen näkökulmasta. Brändimielikuvaa käsitellään kuluttajan näkökulmasta. Tutkielman käsitteellinen viitekehys esitellään teoriaosuuden lopussa. Empiirinen osuus on lähestymistavaltaan laadullinen. Aineisto koostuu jo olemassa olevasta luonnollisesta aineistosta ja kuluttajien haastatteluista. Haastattelut ovat luonteeltaan teemahaastatteluja. Valmiina oleva aineisto analysoidaan sisällönanalyysillä ja teemahaastattelut analysoidaan teemoittelun avulla. Tutkimustulokset Tutkimustulosten valossa voidaan osoittaa, että brändi-identiteetin ja bändimielikuvan vertailevasta tutkimuksesta on hyötyä brändijohtamiselle. Brändin johtamisen näkökulmasta brändi-identiteetin ja brändimielikuvan voidaan katsoa olevan vahvasti sidoksissa toisiinsa. Brändi-identiteetti heijastaa niitä mielikuvia, joita brändiin halutaan johdon kannalta liittää. Brändimielikuva taas syntyy vastaanottajan mielessä lähetettyjen signaalien pohjalta. Brändin johtamisen www-sivuilla voidaan katsoa olevan onnistunutta, jos kuluttajan brändimielikuva ja wwwsivujen brändi-identiteetin ns. tavoitemielikuva ovat mahdollisimman samanlaisia. Tärkeää on, että www-sivut ovat brändin näköisiä ja tukevat muita viestintäkanavia. Lisäksi www-sivujen voidaan katsoa toimivan ikään kuin käyntikortteina ja vaivattomina vaateliikkeinä. Molempien case-brändien www-sivujen brändi-identiteetit vastasivat ainakin osittain kuluttajien muodostamia brändimielikuvia.