金黄色葡萄球菌肠毒素C2的结构特征与生物学功能研究

通过PCR技术对Staphylococcal enterotoxin C2(SEC2)的氨基端和羧基端部位进行删除突变。研究结果显示删除羧基端77个氨基酸对SEC2超抗原和致热活性没有显著影响，但更进一步的删除导致SEC2活性显著降低。而少量氨基端残基删除则可导致SEC2超抗原活性显著降低，说明SEC2超抗原活性主要集中于其氨基端部位。以上研究结果也表明SEC2分子的完整性并不是其超抗原活性所必需的。 对二硫环及Zn结合位点配位组氨酸残基在SEC2分子中的生物学功能进行研究。以定点突变技术构建SEC2二硫环突变蛋白，从而干扰二硫键的形成。研究结果表明干扰二硫环形成对SEC2的超抗原、催吐和致热等活性均有显著影响，说明二硫环在维持SEC2生物学活性方面具有重要作用。此外，针对Zn结合位点配位组氨酸残基的研究结果显示突变118位和122位组氨酸后对SEC2的超抗原活性没有有显著影响，而47位组氨酸的突变导致SEC2分子的超抗原活性显著降低。动物实验结果显示分别突变118位和122位组氨酸残基后均导致SEC2分子催吐及热源活性显著降低，而47位组氨酸突变仍具有较高的催吐和致热活性。说明Zn结合位点配位组氨酸残基在SEC2的催吐、致热和超抗原活性中扮演了重要的作用，并进一步揭示肠毒素诱导的超抗原和致热活性之间没有明显的相关性。 以Leu及Glu分别替代20和22位氨基酸残基后SEC2超抗原活性有显著提高，并将具有减毒作用的组氨酸位点突变引入上述活性增强的SEC2突变，从而构建减毒突变蛋白。结果显示引入118和122位组氨酸双突变后突变蛋白保留了与SEC2相当的超抗原和抗肿瘤活性，但与SEC2相比致热活性有显著下降，为减毒SEC2超抗原药物的开发提供了可能性。 为探索金黄色葡萄球菌的体内基因突变方法，本研究对金黄色葡萄球菌基因组中的α-溶血毒素基因进行敲除。首先构建同源重组质粒pMHL-α，经金黄色葡萄球菌RN4220修饰后再通过原生质体转入金黄色葡萄球菌SM-01。含重组质粒pMHL-α的金黄色葡萄球菌SM-01在42℃诱导条件下培养多代，最终筛选出α-溶血毒素基因缺失菌株。经序列分析和血平板溶血实验结果证实最终获得产SEB金黄色葡萄球菌α-HL缺失菌株。为构建产减毒肠毒素的金黄色葡萄球菌基因工程菌株提供了一定的理论基础和方法。

重离子辐射哺乳动物细胞敏感性的分子机理

研究了用传能线密度125.5keV/μm的12C6+辐照小鼠黑色素瘤、中国仓鼠肺、人的宫颈癌、人的肝癌细胞的敏感性以及DNA双链断裂和DNA双链断裂片段分布,结果表明细胞敏感性与DNA双链断裂之间没有一致的关系,提出了细胞辐射敏感性的一种可能的分子机理,即DNA序列敏感性位点协同DNA双链断裂互补性机理.由此解释了4种细胞系的不同敏感性问题.

产SEB金黄色葡萄球菌α-溶血毒素基因缺失菌株的构建

构建产肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)的金黄色葡萄球菌α-溶血毒素(α-hemolysin,α-HL)缺失菌株。首先构建用于α-HL基因敲除的同源重组质粒pMHL-α,经金黄色葡萄球菌RN4220修饰后再通过原生质体转入金黄色葡萄球菌SM-01。含重组质粒pMHL-α的金黄色葡萄球菌SM-01在42℃诱导条件下培养多代,最终筛选出α-溶血毒素基因缺失菌株。经序列分析和血平板溶血实验结果证明最终获得产SEB金黄色葡萄球菌α-HL缺失菌株。为野生型金黄色葡萄球菌的体内遗传操作及构建产超抗原药物金黄色葡萄球菌基因工程菌株提供了一定的理论基础和方法。

长效复混肥的农田效应

长效玉米专用肥 (免追旺 )在吉林省 7个县 (市 )进行田间试验。结果表明 ,其 1kg养分增收玉米 4 1kg,养分回报率比常规一次性施肥提高 19.8% ,比多施 2 0 %的 15 15 15复混肥提高 2 3.1% ;分别增收 4 85元 / hm2和 2 6 8元 / hm2 。

土-岩界面重金属行为的研究进展

随着多环境介质问题研究的深入,重金属在跨介质迁移时产生的界面效应问题倍受人们关注。土－岩界面因其特有的微环境结构和特性,使重金属在该界面的行为过程既部分地表现出与在两侧的环境介质运移过程的动力学特征及机制,又有其独特的特性。有关研究表明自然因素及人为活动等引起的环境参数的变化对土－岩界面的重金属行为有显著影响。今后土－岩界面的重金属行为研究应在目前研究状况的基础上立足于为土壤污染的修复提供技术支撑。

乌苏里江国家森林公园生态旅游适宜度评价

论文根据生态旅游的理念,提出生态旅游适宜度评价的概念和原则,并以乌苏里江国家森林公园为例,在确定公园生态旅游适宜度的评价因子的基础上,利用层次分析法对各因子的权重进行赋值,并运用GIS技术,对公园的生态旅游适宜度进行了计算,经分类统计,最适宜开展生态旅游的面积为1814.76hm2(7.9%)、中等适宜的面积为623.44hm2(2.7%)、一般适宜的面积为12209hm2(53.05%)。文章最后针对不同适宜程度对公园开发提出了建议。

内蒙古呼伦贝尔市饮茶型氟铝联合中毒研究

目的探讨饮茶型氟中毒是否为砖茶型氟铝联合中毒。方法对饮茶型氟中毒病区进行饮水、砖茶、奶茶、主食、副食及牧民发、血、尿氟铝水平检测,对饮茶型氟中毒病区儿童和成人进行临床检查和拍摄X线片,同时对成人进行血液生物化学检查,以饮水型病区及非病区居民为对照组。结果呼伦贝尔市饮茶型病区饮水、主食、副食氟铝水平均在正常范围,砖茶氟铝水平分别为(541.3±48.8)、(4351±724)mg/kg,奶茶氟铝水平分别为(3.83±0.73)、(4.28±1.56)mg/L。饮水型病区饮水氟铝水平分别为(3.68±1.05)、(0.45±0.25)mg/L。饮茶型病区牧民氟总摄入量96.15%、铝总摄入量89.60%来源于砖茶。儿童氟斑牙检出率饮茶型病区为25.24%,饮水型病区为63.17%,饮茶型病区非常显著低于饮水型病区(P<0.01);成人氟中毒检出率饮茶型病区为42.61%,饮水型病区为28.83%,饮茶型病区显著高于饮水型病区(P<0.01)。结论呼伦贝尔市饮茶型氟中毒发病机理较为复杂,可能是砖茶型氟铝联合中毒。

文冠果壳苷对侧脑室注射Aβ_(1-42)致小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的研究文冠果壳苷对侧脑室注射β肽淀粉样蛋白1-4(2Aβ1-42)小鼠学习记忆障碍的改善作用,并初步探讨了其作用机制。方法通过避暗和水迷宫实验检测了小鼠的学习记忆能力;使用分光光度计检测小鼠大脑组织中乙酰胆碱酯酶(AchE)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性的变化。结果小鼠侧脑室注射凝聚态Aβ1-42显著降低了小鼠被动回避学习记忆能力及空间学习记忆能力(P<0.01),并且小鼠大脑AchE和ChAT活性显著降低(P均<0.05);而文冠果壳苷能够显著减少避暗错误次数,延长潜伏期(分别P<0.05、P<0.01);剂量依赖性地缩短水迷宫实验中小鼠到达安全台的游泳时间(分别P<0.05、P<0.01),不同程度地抑制Aβ1-42模型小鼠的AchE和ChAT活性的降低(P<0.05和<0.01)。结论文冠果壳苷对侧脑室注射Aβ1-42小鼠学习记忆障碍具有显著的改善作用,其作用机制可能与保护中枢胆碱能神经细胞,改善中枢胆碱能神经系统功能等有关。