贾第虫的“双等核”及其保持等同机制的研究

贾第虫是一类寄生于肠道的单细胞原生动物，也被认为是目前已知的最原始的真核细胞。它的一个十分奇特和令人感兴趣的特点是：具有在形态和大小上都很相似的左右对称的两个细胞核。已有一些证据表明贾第虫的这样的两个核在其它一些方面也都很相似甚至完全相同，如两核的DNA含量相等，两核都含有rDNA和至少一套染色体，并且在DNA复制、转录和核分裂等功能活动方面也基本都是同步的。但是，这两个核在基因的组成方面是否完全一致，甚至两核之间的对应基因（等位基因）的序列是否完全相同呢？若是，贾第虫为什么需要这样两个完全“等价”的细胞核（“双等核”）？这两个核又是如何长期保持一致而不会因两个核内发生不同的基因变异而产生差异呢？此外，目前普遍认为贾第虫至少是四倍体，即每个核至少为二倍体。那么同一个核内的等位基因是否序列也一致？保持其一致的机制又是什么？这些问题不仅饶有趣味，而且对于揭示贾第虫特殊的遗传机制乃至真核细胞基因组倍性的起源进化等问题具有重要意义。 本文首先对其两个核内是否有相同的基因组成进行了检验。我们选择了三个执行不同功能蛋白的基因为代表以检验贾第虫的两个细胞核是否都含有这些基因。这三个基因分别是：DNA拓扑异构酶II基因（topII）, 核仁蛋白KRR1基因（krr1）和目前贾第虫中报道的极少数含有内含子的基因之一的铁硫蛋白基因（fes）。利用荧光原位杂交(FISH)技术在两个核中进行了定位分析。结果表明这几个代表性的基因在贾第虫的两个细胞核中都同时存在。这提示着贾第虫的两核中具有相同的基因组成，也表明贾第虫的这两个核可能在功能方面也是“等价”的。 其次，我们对其两个核中的等位基因是否具有一致的序列进行了检验，并对其两核之间以及同一核内的等位基因保持一致的机制进行了研究。选择前人文献报道的存在多态位点（即这些位点可能是易变位点）的两个基因：fen1和pdi为研究对象，在自己建立的一个贾第虫克隆培养系上进行单细胞PCR和测序的跟踪分析。跟踪分析了18个月（约分裂1600代）后，检测到如下结果：尽管在fen1基因上尚未发现位点变异的规律，但在pdi基因上发现存在几个位点会间歇出现套峰。据此我们推测套峰的出现可能是由于其中一个等位基因发生了突变，而后套峰消失则可能是突变被恢复。这种等位基因的修复机制很可能是基因转换（gene conversion）。进而我们在贾第虫基因组中找到了参与基因转换的很多酶基因的同源基因，RT-PCR的结果也表明这些基因在贾第虫中是活跃转录的。这进一步提示了贾第虫中发生基因转换的可能性。因此以上结果不仅表明贾第虫的两核之间和同一核内的等位基因的序列都是一致的，同时还说明基因转换可能是同一核内等位基因保持一致的机制。至于两个核之间保持等位基因序列一致的机制，我们采用了两种染核的方法对大量的贾第虫细胞进行了观察，以期能从中找到两核保持等同的证据。结果发现在大量细胞群体中存在一定比例的单核细胞和一侧含有两个核的细胞。据此我们推测：贾第虫可能通过发生一侧细胞核的丢失或萎缩，然后由另外一侧的核进行复制，经过核的重排恢复正常的左右核的状态。这可能就是贾第虫消除两核基因出现的差异，保持两核之间等位基因一致乃至两个核完全等同的机制。

贾第虫中的基因转换研究

蓝氏贾第鞭毛虫（简称贾第虫）是一种低等的单细胞原生动物，因在全世界引起肠道疾病，并被认为是目前已知的最原始的真核细胞而备受关注。它具有两个左右对称的细胞核，在形态和大小上都很相似，至少都为二倍体。长期以来一直都未有其进行减数分裂或有性生殖的报道，因此被认为是无性繁殖的。目前仅发现其存在有丝分裂过程，而且滋养体的两个细胞核在复制分离等遗传活动方面保持各自独立的状态，分别将子代核传递到子代细胞中。综合以上情形，随着长期传代培养，贾第虫两个细胞核之间及单个核内等位基因之间应该会逐渐积累较大的差异（allelic sequence heterozygosity，ASH）。但事实是贾第虫具有极低的等位基因差异，是什么原因和机制所导致的呢？本文对此进行了如下两方面的研究。其一，采用单细胞PCR技术对fenI和pdi两个基因进行了长期的跟踪观察。研究结果表明，除了极少数的位点突变（在测序结果中表现为“套峰”）外，每次的测序结果几乎完全一致，这说明贾第虫两核间和一核内的等位基因是高度一致的，其等位基因差异性非常低。对套峰位置进行统计后我们发现，pdi基因中数个位点间歇性的出现套峰，暗示了突变发生而后又被修复的过程，这提示贾第虫中肯定存在一种生物学机制，能够修复等位基因的突变，我们推测这种机制很可能是基因转换（gene conversion）。其二，本文对基因转换的基本情况进行了系统的调查。根据已有的理论模型，总结出基因转换过程的主要步骤，以及与各步骤相关的基因；之后，利用同源搜索的方法，在贾第虫基因组中搜索上述基因的同源物。调查结果表明，基因转换过程的主要步骤对应的基因在贾第虫中都存在同源物，这提示在贾第虫中确实存在发生基因转换的可能性。然后，对上述在贾第虫基因组中找到的同源基因进行了荧光原位杂交（FISH）实验和RT-PCR实验。FISH定位实验结果显示，这些基因在两个细胞核中都有杂交信号，表明这些基因在两个细胞核中都存在。 RT-PCR实验结果进一步表明，这些基因在贾第虫中都是活跃转录的。根据以上结果，本文认为贾第虫中确实存在一个维持其极低的等位基因差异的机制，该机制极可能是基因转换。

Effect of polydispersity on the self-assembly structure of diblock copolymers under various confined states: A Monte Carlo study

We studied the self-assembly of polydisperse diblock copolymers under various confined states by Monte Carlo simulation. When the copolymers were confined within two parallel walls, it was found that the ordered strip structures appeared alternately with the increase in wall width. Moreover, the wall width at which the ordered structure appeared tended to increase with an increase in the polydispersity index (PDI). On the other hand, the simulation results showed that the copolymers were likely to form ordered concentric strip structures when they were confined within a circle wall.

Well-defined higher-molecular-weight polyacrylonitrile via RAFT technique in the presence of disulfide compounds as a source of chain transfer agent

Well-defined polyacrylonitrile with a higher number-average molecular weight (R.) up to 200,000 and a lower polydispersity index (PDI, 1.7-2.0) was firstly obtained via reversible addition-fragmentation chain transfer (RAFT) process. This was achieved by selecting a stable, easy way to prepare disulfide compound intermediates including bis(thiobenzoyl) disulfide (BTBDS) and bis(thiophenylacetoyl) disulfide (BTPADS) to react with azobis(isobutyronitrile) to directly synthesize RAFT agents in situ.

Synthesis and Characterization of Short-chain Branched Polyethylene

Two kinds of ethylene copolymers with controllable structures were synthesized and the molecular parameters were characterized by FTIR, GPC, H-1 NMR and C-13 NMR systematically. Effects of molecular and the content of branched short chains on the crystalline properties of the resultant ethylene copolymers were investigated by DSC, respectively. First, polybutadienes with M-w ranging from 20000 to 110000, low polydispersity index(PDI = 1.1) and almost the same content of vinyl (molar fraction about 7%) were synthesized by anionic polymerization. After hydrogenation, the melting point and crystallinity of the obtained model ethylene/1-butene copolymers decreased with the increase in M-w of the copolymers.

Fe(acac)_3-Al(i-Bu)_3对马来酸酐与茴香脑共聚的催化性能

研究了Fe(acac) 3 Al(i Bu) 3 (acac =乙酰丙酮 )催化体系对马来酸酐 (MA)与茴香脑 (ANE)共聚反应的催化性能 .动力学研究结果表明 ,MA与ANE共聚对单体的浓度呈一级反应 ,其表观活化能为 31 0kJ/mol.用IR和13 CNMR研究了共聚物的结构 ,结果表明聚合物是交替的 ,其中酸酐的含量为 4 5 6 % .用GPC测定了聚合物的分子量及其分布 ,结果表明分子量的分布较窄 ,PDI =1 19～ 1 4 2 .用DTA研究了聚合物的热力学性质 ,其分解温度为 5 0 1 1℃.

高科技领域工作人员价值观的文化差异研究

In the processes of Chinese economic and political reforms, it has many problems in the international corporations because of the difference of cultures. This research try to compare the Chinese managers and other conntries' through the investigation of 435 managers and employee from 9 units in Beijing. We used Hofstede's "Value Survey Module" (1980), Compared to Cultures in power distance, uncertainly avoidance, individualism-collectivism, masculinity. We also compared the employee's attitude with three patterns. The conclusions are: 1. There is not significant level difference in three patterns. 2. At PDI、UAI、IDV、MAS the fonr dimensions, our invested results approach Hofsteds's invested results. This is high at PDI, but middle at UAI、IDV、MAS.