酸性抗菌肽及其基因和在制药中的应用

本发明涉及一种酸性抗菌肽及其基因和在制药中的应用，属于生物医学领域。酸性抗菌肽，是中国两栖类动物大蹼铃蟾基因编码的一种单链多肽，分子量2021.4，等电点4.8，多肽氨基酸全序列一级结构为：Ile Leu Gly Pro Val LeuGly Leu Val Ser Asp Thr Leu Asp Asp Val Leu Gly Ile Leu-AMIDATION。编码酸性抗菌肽的基因由632个核苷酸组成，其中编码成熟酸性抗菌肽为第418-477位核苷酸。人工化学合成的酸性抗菌肽具有显著的抑制细菌生长的作用，可以作为制备抗微生物感染疾病药物的应用。

饱食因子及其制备方法和其基因

本发明涉及一种饱食因子及其制备方法和其基因，属于生物医学领域。该饱食因子为从中国两栖类动物大蹼铃蟾(Bombina maxima)皮肤分泌物中分离得到的由28个氨基酸组成的一种单链多肽，分子量3229.57，等电点7.7，多肽氨基酸全序列一级结构为：Asp Met Tyr Glu Ile Lys Gln Tyr Lys The Ala HisGly Arg Pro Pro Ile Cys Ala Pro Gly Glu Gln Cys Pro Ile Trp Val-AMIDATION。制备方法是收集大蹼铃蟾皮肤分泌物，离心去除沉淀、冷冻干燥后，经凝胶过滤、离子交换柱层析、高压液相反相柱层析分离纯化后即得到。编码饱食因子的基因由1041个核苷酸组成，其中编码成熟饱食因子为第835-918位核苷酸。具有抑制进食，增强缓激肽生物效应的作用，作为制备肥胖症治疗药物，心血管系统疾病治疗药物的应用。

Cloning of bradykinin precursor cDNAs from skin of Bombina maxima reveals novel bombinakinin M antagonists and a bradykinin potential peptide

Bombinakinin M (DLPKINRKGP-bradykinin) is a bradykinin-related peptide purified from skin secretions of the frog Bombina maxima. As previously reported, its biosynthesis is characterized by a tandem repeats with various copy numbers of the peptide and sometimes co-expressed with other structure-function distinguishable peptides. At present study, two novel cDNAs encoding bombinakinin M and its variants were cloned from a cDNA library from the skin of the frog. The encoded two precursor proteins are common in that each contains three repeats of a novel 16-amino acid peptide unit and one copy of kinestatin at their N- and C-terminal parts, respectively. They differ in that the first precursor contains two copies of bombinakinin M and the second one contains one copy of a novel bombinakinin M variant. Bombinakinin M was found to elicit concentration-dependent contractile effects on guinea pig ileum, with an EC50 value of 4 nM that is four times higher than that of bradykinin (1 nM). Interestingly, the synthetic peptide (DYTIRTRLH-amide), as deduced from the 16-amino acid peptide repeats in the newly cloned cDNAs, possessed weak inhibitory activity on the contractile effects of bombinakinin M, but not on that of bradykinin. Furthermore, the newly identified bombinakinin M variant (DLSKMSFLHG-Ile(1)-bradykinin), did not show contractile activity on guinea pig ileum, but showed potentiation effect on the myotropic activity of bradykinin. In a molar raito of 1:58, it augmented the activity of bradykinin up to two-fold. (C) 2004 Elsevier B.V. All rights reserved.

无指盘臭蛙抗菌肽及其应用

本发明涉及一种无指盘臭蛙抗菌肽及其应用，属于生物医学领域。无指盘臭蛙抗菌肽是从两栖类无指盘臭蛙分泌液中分离得到的一种环状多肽，分子量为 1705.3道尔顿，等电点为9.39，多肽全序列一级结构为：Leu Lys Gly Cys Trp The Lys Ser Ile Pro Pro Lys Pro Cys Phe(LKGCWTKSIPPKPCF)，第四位和第十四位的的半胱氨酸形成分子内二硫键。其制备方法是：乙醚刺激无指盘臭蛙收集的分泌液离心去除沉淀，冷冻干燥后经凝胶过滤柱层析和反相高压液相色谱后分离纯化后得到。本发明的无指盘臭蛙抗菌肽具有对细菌、真菌、病毒有强烈活性抑制作用，及无溶血活性的优点，可作为制备治疗病原微生物感染疾病药物的应用。

棕点湍蛙胰岛素释放促进肽和在制药中的应用

本发明涉及棕点湍蛙胰岛素释放促进肽和在制药中的应用，属于生物医学技术领域。本发明通过常规的生物化学手段，从棕点湍蛙皮肤分泌液中分离纯化得到胰岛素释放促进肽并测定其序列，按照所得的序列合成该多肽。棕点湍蛙胰岛素释放促进肽是一种单链多肽，分子量1627.04道尔顿，等电点8.75，多肽一级结构全序列为：Phe-Leu-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-Leu-Leu-Ser-Gly-Leu-Ser-Gly-Leu- Leu(FLPIVGKLLSGLSGLL-NH2)。本发明具有很好的促进胰岛素释放的作用，同时还具有无溶血活性、无血浆凝固活性等优点，可作为制备治疗糖尿病药物的应用。

一种新型环状小肽BA及其应用

本发明涉及一种新型环状小肽BA及其应用，属于生物医学技术领域。本发明的环状小肽BA，分子量1259.56道尔顿，等电点4.44，具有一定的丝氨酸蛋白酶抑制剂活性，无酶活性。其全序列为：Cys Trp Thr Lys Ser Ile Pro Pro Lys Pro Cys(CWTKSIPPKPC)，第1位半胱氨酸和第11位的半胱氨酸形成分子内二硫键。该环状小肽BA作为药物设计模版及作为制备治疗肿瘤药物的应用。以环状小肽BA作为模版，在其氨基端和羰基端分别进行不同氨基酸的增加，得到具有抗菌活性或丝氨酸蛋白酶抑制剂活性的环状小肽BA1和环状小肽BA2，并作为制备治疗肿瘤、胃炎、胰腺炎药物的应用。本发明还具有序列简单、合成方便等优点。

无指盘臭蛙蛙皮肽及其基因和在制药中的应用

本发明涉及一种无指盘臭蛙蛙皮肽及其基因和在制药中的应用，属于生物医学领域。该活性多肽是中国两栖类动物无指盘臭蛙基因编码的一种单链多肽，分子量3355.95道尔顿，等电点10.14，多肽全序列一级结构为： Gly Leu Gly Gly Ala Lys Lys Asn Phe Ile Ile Ala Ala Asn Lys Thr Ala Pro Gln Ser Val Lys Lys Thr Phe Ser Cys Lys Leu Tyr Asn Gly。编码无指盘臭蛙蛙皮肽的基因由 731个核苷酸组成，其中编码成熟无指盘臭蛙蛙皮肽为第520-616位核苷酸。人工合成的无指盘臭蛙蛙皮肽具有显著的抑制细菌和真菌生长的作用，可以作为制备病原微生物感染疾病的治疗药物被应用。本发明的无指盘臭蛙蛙皮肽具有结构简单、人工合成方便、抗菌谱系广的有益特点。

无指盘臭蛙皮肤活性肽及其基因和在制药中的应用

本发明涉及一种无指盘臭蛙皮肤活性肽及及其基因和在制药中的应用，属于生物医学领域。无指盘臭蛙皮肤活性肽是无指盘臭蛙皮肤活性肽基因编码的一种单链多肽，分子量3015.63道尔顿，等电点10.3，多肽全序列一级结构为： Ala Thr Ala Leu Gly Leu Ser Ser Arg Gly Leu Leu Pro Ile Gly Phe Met Phe Lys Asp Thr Ile Arg Cys Arg Lys Tyr(ATALGLSSRGLLPIGFMFKDTIRCRKY)。编码无指盘臭蛙皮肤活性肽的基因由312个核苷酸组成，其中编码成熟无指盘臭蛙皮肤活性肽为第141-222位核苷酸。人工合成的无指盘臭蛙皮肤活性肽具有很强的抑制细菌和真菌生长的作用，可以作为制备病原微生物感染疾病的治疗药物被应用。无指盘臭蛙皮肤活性肽具有结构简单、人工合成方便、抗菌谱系广、抗菌活性强的特点。

无指盘臭蛙免疫调节肽、其基因和变异体及其在制药中的应用

本发明涉及无指盘臭蛙免疫调节肽、基因和变异体及其在制药中的应用，属生物医学技术领域。无指盘臭蛙免疫调节肽是一种环状多肽，分子量1791.12道尔顿，等电点 9.84，无指盘臭蛙免疫调节肽的全序列为：Thr Ser Arg Cys Tyr Ile Gly Tyr Arg Arg Lys Val Val Cys Ser(TSRCYIGYRRKVVCS)，其第4位的半胱氨酸和第14位的半胱氨酸形成分子内二硫键。编码的基因由307个核苷酸组成，其中编码成熟部分的为第 141-186位核苷酸。无指盘臭蛙免疫调节肽原始序列中第4个氨基酸发生替代所产生的变异体，人工合成的无指盘臭蛙免疫调节肽及其变异体具有强烈的免疫调节活性和肿瘤抑制活性，作为制备免疫调节、肿瘤治疗和化疗药物的应用。本发明还具有序列简单、合成方便等优点。

无指盘臭蛙抗微生物多肽及其基因和在制药上的应用

本发明涉及一种无指盘臭蛙抗微生物多肽及其基因和在制药上的应用，属于生物医学领域。无指盘臭蛙抗微生物多肽是无指盘臭蛙抗微生物多肽基因编码的一种单链多肽，分子量为4248.27道尔顿，等电点为11.47，多肽全序列一级结构为：Gly Leu Phe Thr Leu Ile Lys Gly Ala Ala Lys Leu Ile Gly Lys Thr Val Pro Lys Lys Gln Ala Arg Leu Gly Met Asn Leu Trp Leu Val Lys Leu Pro Thr Asn Val Lys Thr (GLFTLIKGAAKLIGKTVPKKQARLGMNLWLVKLPTNVKT)。编码无指盘臭蛙抗微生物多肽的基因由343个核苷酸组成，其中编码成熟无指盘臭蛙抗微生物多肽为第123-240位核苷酸。人工合成的无指盘臭蛙抗微生物多肽具有很强的抑制细菌和真菌生长的作用，可以作为制备病原微生物感染疾病的治疗药物被应用。本发明的无指盘臭蛙抗微生物多肽具有抗菌谱系广、抗菌活性强的特点。

无指盘臭蛙分泌肽及其基因和在制药中的应用

本发明涉及一种无指盘臭蛙分泌肽及其基因和在制药中的应用，属于生物医学领域。该活性多肽是从中国两栖类动物无指盘臭蛙基因编码的一种环状多肽，分子量1587.98道尔顿，等电点9.7，多肽全序列一级结构为： Phe Met Pro Ile Leu Ser Cys Ser Arg Phe Lys Arg Cys，其第七位半胱氨酸和第十三位半胱氨酸相成分子内二硫键。编码无指盘臭蛙分泌肽的基因由300个核苷酸组成，其中编码成熟无指盘臭蛙分泌肽为第138-177位核苷酸。人工合成的无指盘臭蛙分泌肽具有显著的抑制细菌和真菌生长的作用，可以作为制备病原微生物感染疾病的治疗药物被应用。本发明的无指盘臭蛙分泌肽具有结构简单、人工合成方便、抗菌谱系广的有益特点。

无指盘臭蛙臭蛙肽及其基因和在制药中的应用

本发明涉及一种无指盘臭蛙臭蛙肽及其基因和在制药中的应用，属于生物医学领域。无指盘臭蛙臭蛙肽是无指盘臭蛙臭蛙肽基因编码的一种单链多肽，分子量1814.11道尔顿，等电点8.08，多肽全序列一级结构为： Gly Cys Ser Arg Trp Ile Ile Gly Ile His Gly Gln Ile Cys Arg Asp。(GCSRWIIGIHGQICRD)。编码无指盘臭蛙臭蛙肽的基因由312个核苷酸组成，其中编码成熟无指盘臭蛙臭蛙肽为第141-189位核苷酸。人工合成的无指盘臭蛙臭蛙肽具有很强的抑制细菌和真菌生长的作用，可以作为制备病原微生物感染疾病的治疗药物被应用。本发明的无指盘臭蛙臭蛙肽具有结构简单、人工合成方便、抗菌谱系广、抗菌活性强的特点。

湖南烙铁头蛇毒中一个新的舒缓激肤增强肤( TmF)

通过70%冷甲醇抽提、Sephadex C i-15分子筛和反相高效液相色谱G8层析，从湖南产烙铁头蛇毒(Trineresurus muqua nwtus)冻干粉中纯化得到一个新的舒缓激肤增强肤(BPP)，命名为TmF。该小肤的氨基酸序列为p(irr (iy Arg Pro, Leti (iy Pro, Pro, Ile- Pro, Pro ( pau表示焦谷氨酸)。序列结果分析表明，TmF和已经分离得到的BPPs有很高的序列同源性。MSI- MS 测定其分子量为1 .1107 kD o TmF的生物学活性和药理学活性检测的结果表明，它增强舒缓激肤(BK)(1 mg/L)诱导的离体豚 鼠回肠纵行肌收缩的活性为(1 .13士0 .3)单位(mg/ L) ; TmF (5 .0 x 10- 0 mg/ kg)可以增强约(14士2) mmHg的由BK(5 . Ox 10-' mg/ kg)诱导的舒张压下降;在抑制剂试验中，不同剂量的TmF和5x1。一zmg的血管紧张素转化酶保温30 min，结果表明大约 2.0x10一3mg的TmF表现出对ACE水解活性的半数抑制率(IQo )。

Characterization of a new bradykinin-potentiating peptide (TmF) from Trimeresurus mucrosquamatus

A novel bradykinin-potentiating peptide (BPP), designated as TmF, has been purified to homogeneity from the venom of Trimeresurus mucrosquamatus by 70% cold methanol extraction, Sephadex G-15 gel filtration and reverse-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC). The amino acid sequence of TmF was determined to be pGlu-Gly-Arg-Pro-Leu-Gly-Pro-Pro-Ile-Pro-Pro (pGlu denotes pyroglutamic acid), which shared high homology with other BPPs. The molecular mass of TmF was 1.1107 kD as determinated by electrospray ionization-mass spectrometry (ESI-MS), which was in accordance with the calculated value of 1.1106 kD. The potentiating "unit" of TmF to bradykinin-induced (BK-induced) contraction on the guinea-pig ileum in vitro was (1.13 +/- 0.3) unit (mg/L), and TmF (5.0 x 10(-4) mg/kg) increased the pressure-lowering-effect of bradykinin (5.0 x 10(-5) mg/kg) with approximate descent value of (14 +/- 2) mmHg. In addition, TmF inhibited the conversion of angiotensin I to angiotensin 11, 2 x 10(-3) mg of TmF caused 50% inhibition (IC50) of angiotensin-converting enzyme (ACE) hydrolyzing activity to bradykinin.