The effects of CpG-C oligodeoxynucleotides on innate immune responses in Eriocheir sinensis (H. Milne-Edwards, 1853)

CpG oligodeoxynucleotides (ODNs) can stimulate the immune system, and therefore are widely used as a therapeutic vaccination and immune adjuvant in human. In the present study, CpG-C, a combination of A- and B-class ODN, was injected into Chinese mitten crab Eriocheir sinensis at three doses (0.1, 1 and 10 mu g crab-1), and the reactive oxygen species (ROS) levels, activities of total intracellular phenoloxidase (PO) and lysozyme-like activities, the mRNA transcripts of EsproPO, EsCrustin and EsALF were assayed to evaluate its modulating effects on the immune system of crab. The ROS levels in all treated and control groups were significantly increased from 6 to 24 h, except that ROS in 0.1 mu g CpG-C-treated crabs was comparable to that of the blank at 6 h. The PO activity was significantly enhanced and EsproPO transcripts were down-regulated (P < 0.01) at 6 h after the injection of 0.1 mu g CpG-C, with no significant changes in the other dosage treatments. The lysozyme-like activities and EsCrustin transcripts in the CpG-C-treatment groups were significantly higher than those of controls. The mRNA expression of EsALF remained almost constant in all the groups during the treatment. These results collectively suggested that CpG-C could activate the immune responses of E. sinensis, and might be used as a novel immunostimulant for disease control in crabs.

The effects of CpG-C oligodeoxynucleotides on innate immune responses in Eriocheir sinensis (H. Milne-Edwards, 1853)

CpG oligodeoxynucleotides (ODNs) can stimulate the immune system, and therefore are widely used as a therapeutic vaccination and immune adjuvant in human. In the present study, CpG-C, a combination of A- and B-class ODN, was injected into Chinese mitten crab Eriocheir sinensis at three doses (0.1, 1 and 10 mu g crab-1), and the reactive oxygen species (ROS) levels, activities of total intracellular phenoloxidase (PO) and lysozyme-like activities, the mRNA transcripts of EsproPO, EsCrustin and EsALF were assayed to evaluate its modulating effects on the immune system of crab. The ROS levels in all treated and control groups were significantly increased from 6 to 24 h, except that ROS in 0.1 mu g CpG-C-treated crabs was comparable to that of the blank at 6 h. The PO activity was significantly enhanced and EsproPO transcripts were down-regulated (P < 0.01) at 6 h after the injection of 0.1 mu g CpG-C, with no significant changes in the other dosage treatments. The lysozyme-like activities and EsCrustin transcripts in the CpG-C-treatment groups were significantly higher than those of controls. The mRNA expression of EsALF remained almost constant in all the groups during the treatment. These results collectively suggested that CpG-C could activate the immune responses of E. sinensis, and might be used as a novel immunostimulant for disease control in crabs.

单晶易滑移阶段位错结构形成的动力学分析

提出了偶极子的保守攀移机制，并建立了一个新的单滑移位错动力学模型，应用该模型揭示了单晶硬化Ⅰ阶段(易滑移阶段)一种平面列阵结构------地毯(carpets)结构的形成，与实验吻合。

Variational Approach to the Thomas-Fermi Equation

By the semi-inverse method, a variational principle is obtained for the Thomas-Fermi equation, then the Ritz method is applied to solve an analytical solution, which is a much simpler and more efficient method.

中国簇毛黄耆亚属的分类修订和系统位置初探

摘要 "簇毛黄耆亚属隶属于豆科黄耆属，主要分布在青藏高原和横断山区，大多数种类都是狭域分布的。由于缺乏野外工作，标本不够丰富，模式标本不易收集齐全等原因，相当一部分种类的划分尚不能令人满意，应予以修订。除此之外，这个亚属的范围及其系统位置也存在一定的争议，还有待于深入的研究。本文对我国簇毛黄耆亚属的种类进行了分类修订，通过形态学和分子系统学两方面的研究，重新界定了该亚属的范围，并对其系统位置进行了探讨。 1. 分类修订 通过查阅文献，标本室研究与野外观察相结合，对簇毛黄耆亚属形态性状的变异式进行了分析，特别调查了性状在居群中的变异幅度。发现茎和花的长短以及果实的形态等是可靠的分类性状。另外，茎和小叶的被毛状况，小叶和小苞片的形状以及花的颜色等对于亚属下种类的划分也有重要的意义。 本文将7种植物从簇毛黄耆亚属中分出，9种处理为异名，确认中国簇毛黄耆亚属植物有23种。多尼尔黄耆是中国分布新记录种，亚东黄耆和单花黄耆都是该种的异名。狭叶黄耆、芒齿黄耆和丽江黄耆是弯齿黄耆的异名，这些种类中存在的分类困难得到了澄清。本文给出了每一个种的形态描述和标本信息以及亚属内的分种检索表。 2. 微形态学 观察了簇毛黄耆亚属植物花柱的发育过程，发现通常使用的术语“柱头具毛”没有准确地描述其中一部分簇毛黄耆的特征。这些植物的毛只是长在花柱的顶端，柱头是光滑无毛的。除毛被直立且向上指外，其它与花粉刷（pollen brush）相关的特征，在这些植物中也出现。所以，这些簇毛黄耆的花柱及其毛被也应该叫做花粉刷。在山羊豆族中，花粉刷正是区分鱼鳔槐亚族的关键特征。因此，这一构造支持将一部分簇毛黄耆从黄耆属（黄耆亚族）中分出，作为一个属放入鱼鳔槐亚族当中。 3. 叶表皮研究 在光学显微镜下观察了代表簇毛黄耆亚属4个组的11种植物的叶表皮。发现所观察种类都具有两种气孔类型，以无规则型为主，放射状细胞型数量很少。 表皮细胞根据细胞轮廊和垂周壁的情况，可以分为三种类型：一是表皮细胞不规则形，垂周壁波状纹或深波状纹，代表为扁荚组植物;二是表皮细胞为多边形，狭长形为主，垂周壁平直，略有浅波状纹，袋果组植物属于这种类型;三是表皮细胞为多边形，垂周壁平直，属于这种类型的有膨果组和背扁组植物。表皮细胞形状对于亚属范围的确定以及亚属下组的划分有一定的意义。 4. 分子系统学 测定了簇毛黄耆亚属植物的ITS序列，并从Genbank中下载了48个种的ITS序列，包括了黄耆属及其临近12个属的代表。以锦鸡儿属（Caragana）为外类群，进行简约性分析，构建簇毛黄耆亚属与其临近类群的系统发育树状图。结果显示，扁荚组与亚属其余类群在系统树上处于不同的分支，亲缘关系较远，表明包括扁荚组的簇毛黄耆亚属不是一个单系类群;膨果组，背扁组和袋果组的代表作为一个单系类群能得到ITS序列的支持，但它们与鱼鳔槐亚族关系更近。这种分支方式能够得到形态证据的支持，说明一部分簇毛黄耆的确与鱼鳔槐亚族有更近的关系，这些种类的分类位置值得重新考虑。"

甘草属（Glycyrrhiza L.)的系统学研究——兼论与假甘草属（Glycyrrhizopsis Bosis.&Bal.)的关系

甘草属（Glycyrrhiza L.）隶属于豆科山羊豆族甘草亚族，各大洲均有分布。本文对甘草属进行了全面的系统学研究，重点分析了各形态相关性状的变异式样及变异范围，首次发现甘草属的龙骨瓣不合生、分离，中国植物志四十二卷记载龙骨瓣合生，则有误;认为荚果形态和叶片性状是较为可靠的分种依据，小叶数目、花序疏、密以及小花大小等性状对于属下种类的划分也具有重要的分类学意义。首次在扫描电镜下观察了13种甘草属植物花粉粒的微形态特征，发现甘草属植物花粉为球形或近球形、三孔沟、萌发沟通常比较宽、沟边缘不整齐、沟膜较明显、表面通常具有疣状、瘤状或颗粒状突起;外壁纹饰以小孔穴状纹饰为主，还有皱纹状纹饰。花粉的形状、大小、外壁纹饰在种间存在变异，反映了一定的种间关系，对目前的属下分类系统提供了一些证据。对种子形态观察表明，该属植物的种皮表面纹饰特征比较相近，除圆果甘草(G. squamulosa)表面纹饰为圆丘状突起外，其余种类均以各种条纹状或回纹状突起为主。从种皮表面纹饰特征所反映的种间关系来看，有些与传统的分类结果一致，有些则不一致，无规律可寻，对于进行甘草属分类和种间系统演化关系研究不具有更高价值。对甘草属植物进行了分子系统学研究，测定5种甘草属植物的ITS序列，并从Genebank中下载21种的ITS序列，包括了2种甘草属植物及山羊豆族内其它10个属的代表。以紫藤为外类群，进行简约性分析，构建甘草属及其临近类群的系统发育树状图，结果显示，所研究的甘草属植物聚为一支，而山羊豆族内的其余类群在系统树上聚为另一支，表明甘草属与山羊豆族内其余类群的关系相对稍远;甘草属植物作为一个单系类群得到了100％的支持。在包括了山羊豆族、车轴草族、蚕豆族、鹰嘴豆族、岩黄芪族和灰叶族植物的系统发育树状图上，甘草属植物与山羊豆族的其余类群则处于不同的分枝上，进一步表明它们亲缘关系较远，包括甘草属的山羊豆族不是一个单系类群，甘草属的分类位置还需进一步研究。 作者在研究了4000余份腊叶标本及进行了大量野外考察的基础上，结合孢粉学、种子形态及分子生物学的证据，首次采用综合手段对世界甘草属植物进行全面的分类学修订。确认甘草属含3个组、13个种、1个变种，其中处理一新组合;对17个名称进行了归并;重新界定了广布种乌拉甘草（G.uralensis）和欧亚甘草（G.glabra）的变异范围，澄清了上述两种长期存在的名实混乱;考证了属的正确模式及一些种的合法学名，发现被命名为胀果甘草（G. inflata）的类群其正确名称应是G. paucifoliolata，建议将长期使用的胀果甘草作为保留名。确立假甘草属Glycyrrhizopsis Boiss. & bal.的独立地位，并确认该属具有2种1变种，处理新组合一个。本文对每一个种进行了详细的形态描述，并附分布资料及地理分布图，还给出了分组、分种检索表。

青蒿的遗传转化及青蒿素生物合成的调控

利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)1601，1000，1500，15834，A4，均成功地转化了中药青蒿(Artemisia annua L.)并且建立了pRi1601，pRi15834，pRiA4诱导的发根培养。pRi1601，pRi15834的发根诱导率比其它质粒高。太老或太幼的叶片不利子发根的诱导;发根主要从叶脉的伤口处萌发;带顶芽或带侧芽的叶片容易诱导根，但不一定是发根。光照有利于发根的诱导和发根的生长。以每个发根的“绝对生长速率”(Gtowth Ratio，GR)和绝对“侧根”数量(Number of Side Roots，NSR），通过大量的发根系的筛选，建立了8个发根系，1601-L-1, 1601-L-2, 1601-L-3, 1601-L-4, 15834-L-1, 1601-P-I, 16 01-P-2，15834-L-2。Southern分子检测表明，160l-1-1，1801-L-2, 1601-L-3，1601-L-4，1601-P-1，1601-P-2均为转化子。8个建立的发根系之间无论生长或者QHS的合成存在明显的差异。比较光／暗(16/8hrs)，25℃条件下培养的16 01-L-1，1601-L-2，1601-L-3，1601-L-4，1601-P-l，和1601-P-2，其中16 01-L-3的生长最快，160l-L-1的生长最慢;但是，1601-L-1的QHS的含量最高（可达1. 048%），1601-1-3的QHS的含量最低。160Z-L-3，15834 -L-1和2583:1-L-2的生长速率相差不大。用盛有l000mLMS液体培养基的3000mL的锥形瓶扩大培养1601-L -3，15834-L-1和15834-L-2，转速为ll0rlpm，培养过程中发根容易形成发根球（Hairy Root Balis，HRB），HRB的形成严重影响发根的生长和QHs的合成，HpLC分析表明扩大培养发根中QHS的含量比较低。 改变MS基本培养基中的无机离子的浓度，研究不同无机离子对发根生长和QHS的合成的影响。 l、KN03为18.79×10-3M时有利于1601- L-1生长，为14. 84×10-3M时有利于QHS的合成。NH-4N0-3浓度在10.93-12. 49×10—3M范围内有利于1601-L-1生长，在0-20.62×10-3M范围内对QHS的合成影响不大，大于20. 62×lO-3M不利QHS的合成。培养基中NH-4+／N0-3-比值为0. 37-0. 4-0.52:1时有利于发根的生长，比值为0.52 - 0.58:1时有利于QHS的合成。 2、H-2P0-4-浓度为2.498×10-3M时有利于发根的生长在0-2. 498×l0-3M范围内，随着浓度的提高，促进发根的生长。培养基中的H2P4 -的浓度在0-1.249×lO-3M的范围内，随着浓度的提高，促进QHS的合成，为1.249×10-3M时QHS的含量最高。 3、培养基中最适16 01-L-1生长的Ca-2+浓度为0.198- 0.766×10-3M，大于或小于该浓度范围，显著地抑制发根的生长。但是，在0-3.695×10-3M范围内，随着培养基中Ca-2+浓度提高，促进QHS的合成，最适Ca-2+浓度为3.695×l0-3M。 4、培养基中不加Mg-2+时，完全抑制发根生长，在0. 142×10-3M-7.506×l0-3M浓度范围内，对发根生长影响没有明显的差别。但是，HPLC和UV分析发根中QHS含量，培养基中不加Mg-2+时，发根中QHS含量最高。 5、培养基中的Fe-2+浓度在0. 25 -1．0×10-3M范围内，同时有利于16 01- L-1的生长和QHS的形成。 6、培养基中最适合予16 01- L-3生长的KI浓度为2.5ppm，大于或小予该浓度均显著地抑制发根的生长，培养基中加入KI明显地降低发根中的QHS的含量。 7、H2BO3对l601-L-l生长影响不大，HPLC分析QHS的含量，培养基中的H3BO3浓度为100ppm和400ppm，QHS的含量分别为1.69mg/g和1.80mg/g(DW)。 8、Cu-2+对1601-L-3的生长影响显著，最适合1601-L-3生长的Cu-2+浓度为1.00ppm，在0 -1.00ppm的浓度范围内，随着培养基中的Cu+浓度的提高，发根的生物量不断增加。培养基中QHS合成的最适Cu2+浓度为0.05ppm，大于或小于该浓度均显著地抑制发根中QHS的合成。 比较光培养和暗培养对发根生长的影响，结果表明光照明显地促进1601-L-l的生长，暗培养明显不利于发根的生长。最适合于发根生长的温度为25℃，大于35℃显著地抑制发根的生长，影响发根的根尖细胞的正常分裂。 改变培养基中的蔗糖浓度和在发根培养的不同时期给培养基中添加蔗糖，试验结果表明蔗糖作为碳源对1601-L-3和1601-L-1的生长具有显著的影响。 (1)培养基中缺少蔗糖显著地抑制发根的生长。 (2)发根培养的前5天时间内，蔗糖浓度为30- 60glL昀培养基最有利于发根的生长，50glL的培养基中的发根生长最快，培养基中的蔗糖浓度大于60g/L小于30g／L时，发根的生物量增加较少。 (3)发根培养至第15天时，蔗糖浓度为60g/L的培养基最有利予发根的生物量的增加。发根培养至30天时，蔗糖浓度为60-90g/L的培养基，发根的生物量的增加相差不大，但是为蔗糖浓度为30-40g/L的培养基中的发根生物量一倍。 (4)发根培养过程中，分别于第5和15天给蔗糖浓度为30g/L的培养基中添加一次或二次蔗糖，使培养基中的蔗糖终浓度相当于60g/L或90g/L，培养至30天时，添加蔗糖的培养基中的发根的干重生物量相当于不添加蔗糖培养基中的发根生物量一倍，相当于初始蔗糖浓度为60g/L和90g/L培养基中发根的生物量。 (5)随着培养基中蔗糖浓度的提高，发根干重/鲜重比显著增加。培养基中的蔗糖的消耗量与发根生物量的增加呈正相关，蔗糖消耗越多，发根生物量的增加越大。 比较pH值对发根生长和QHS合成的影响表明，灭菌前pH值在5.O-6.5范围内的培养基适合予1601-L-1的生长，小于5.O不利于发根的生长，pH5.8有利于1601-1-1生长和QHS的生物合成。发根收获时培养基中的pH值一般为4.5-5.2. pH7.O抑制发根的生长，pHl0.O对发根具有强烈的致死作用。发根在培养过程中，对培养基中的pH值具有显著的调节作用，发根能在很短的时间内(24- 48hrs)使pl:l值为5.8、6.4、7.0培养基降低到pH4. 5-5.2，pH为5.8的培养基有利于QHS合成。 比较不同基本培养基对发根生长和QHS合成的影响，试验结果表明N6、DCR、Litvay培养基有利于1601-L-1的生长，WS、White、B5培养基不利于发根的生长。DCR培养基中的QHS含量最高。 根据三水平试验选用三水平正交表来安排试验的原则，选用三水平正交表L7(3-)，研究多因子效应对发根生长和QHS合成的影响，试验结果表明，Mg2+，Fe2+，Mn-2+，NH4NO3，KN03 ,KI,Ca-2+为发根生长的主要因子，NH4N03，KNOs，Mg2+，Ca2+，肌醇为QHS合成的主要因子。 通过TLC分析发根中QHS和其它化学成分，同时比较发根和无菌苗及野生植株的化学成分，发根和无菌苗均能合成包括QHS在内的野生青蒿叶片中的大部分非挥发性的化台 物。 研究青蒿植株在发育过程中QHS的含量的变化以及发根、无菌苗和野生青蒿中QHS的合成，HP分析结果表明，l、不同的单株青蒿之间的QHS量相差很大。2、同一植株幼 叶的QHS含量比老叶的QHS含量高。3、不同单株青蒿之间达到最高QHS含量的时间不一样，开花期或开花之前。4、无菌苗（带根）或者不带根丛生芽均能合成QHS，但是带根的无菌蕾的QHS量比丛生芽中的QIS的含量高。5、不同发根农杆菌转化的发根系1601-L-1和15834-L-1都能合成ＱＨＳ。

治疗艾滋病的药物组合物,其制备方法及其用途

本发明提供一种治疗艾滋病的药物组合物，其中含有治疗艾滋病有效量的式(I)化合物联苯环辛二烯类木脂素(+)-戈米辛 K3[(+)-gomisin K3]及可药用载体和/或赋形剂。该药物组合物通过抑制逆转录酶和蛋白酶活性的作用机制，从而达到抑制HIV-1病毒的增殖。本发明同时给出了该药物组合物的制备方法，及其在制备逆转录酶抑制剂药物和在制备抗艾滋病药物中的应用。

Evolutionary status of Entamoeba

In addition to its medical importance as parasitic pathogen, Entamoeba has aroused people's interest in its evolutionary status for a long time. Lacking mitochondrion and other intracellular organelles common to typical eukaryotes, Entamoeba and several other amitochondrial protozoans have been recognized as ancient pre-mitochondriate eukaryotes and named "archezoa", the most primitive extant eukaryotes. It was suggested that they might be living fossils that remained in a primitive stage of evolution before acquisition of organelles, lying close to the transition between prokaryotes and eukaryotes. However, recent studies revealed that Entamoeba contained an organelle, "crypton" or "mitosome", which was regarded as specialized or reductive mitochondrion. Relative molecular phylogenetic analyses also indicated the existence or the probable existence of mitochondrion in Entamoeba. Our phylogenetic analysis based on DNA topoisomerase II strongly suggested its divergence after some mitchondriate eukaryotes. Here, all these recent researches are reviewed and the evolutionary status of Entamoeba is discussed.

中国神农架国家森林公园苔藓中的缓步动物

记述了采自湖北省西部神农架国家森林公园苔藓中的缓步动物12种,包括:日本棘影熊虫Echiniscus japonicus Morikawa,1951;双粒棘影熊虫Echiniscus bigranulatus Richters,1907中国新纪录种;华美假棘影熊虫Pseudechiniscus facettalis Petersen,1951;于猪假棘影熊虫Pseudechiniscus suillus(Ehrenberg,1853);迟缓小斑熊虫Milnesium tardigradum(Doyère,

中国美丽尖额溞(甲壳纲:双甲目)的新资料

<正> 美丽尖额溞(Alona pulchella King,1853)是广泛分布于澳大利亚区、埃塞俄比亚区以及新热带区的一种枝角类。据中国动物志淡水枝角类卷的记载,在我国只分布于广东、福建、北京、陕西及西藏,而且并不常见,雄性特征也不明。1989年6月中、下旬,在武汉市的中国科学院水生生物研究所一只曾用于培养本市东湖的水草而后閒弃室外的小水缸中,出现了美丽尖额溞的种群,而且有雌雄两性以及带卵鞍的个体,这在过去的文献中从未报道过。

Expressional induction of Paralichthys olivaceus cathepsin B gene in response to virus, poly I:C and lipopolysaccharide

Cathepsin B is a lysosomal cysteine protease of the papain-like enzyme family with multiple biological functions. In this study, Paralichthys olivaceus cathepsin B (PoCatB) cDNA was isolated from flounder embryonic cells (FEC) treated with UV-inactivated grass carp hemorrhage virus (GCHV) and subsequently identified as a vitally induced gene. The full length cDNA of PoCatB is 1801 bp encoding 330-amino acids. The deduced protein has high homology to all known cathepsin B proteins, containing an N-terminal signal peptide, cysteine protease active sites, the occluding loop segment and a glycosylation site, all of which are conserved in the cathepsin B family. PoCatB transcription of FEC cells could be induced by turbot (Scophthalmus maximus) rhabdovirus (SMRV), UV-inactivated SMRV, UV-inactivated GCHV, poly I:C or lipopolysaccharide (LPS), and SMRV or poly I:C was revealed to be most effective among the five inducers. In normal flounder, PoCatB mRNA was detectable in all examined tissues. Moreover, SMRV infection could result in significant upregulation of PoCatB mRNA, predominantly in spleen, head kidney, posterior kidney, intestine, gill and muscle with 18.2,10.9, 24.7,12, 31.5 and 18 fold increases at 72 h post-infection respectively. These results provided the first evidence for the transcriptional induction of cathepsin B in fish by virus and LPS, indicating existence of a novel function in viral defense. (C) 2008 Elsevier Ltd. All rights reserved.