十三种硝基苯类化合物对大型蚤(Daphnia magna Straus)急性毒性试验

本文应用静水试验研究了十三种硝基苯类有机物对大型蚤（D、M）的急性毒性。初步证明了硝基苯类有机物因其取代基团的不同（-Cl_、-OH_、-OH_、-NO_2）或取代基团的位置不同（邻、间、对）而表现出对大型蚤的不同毒性,且从分子结构上分析了毒性差异的机理。试验结果表明,对二硝基苯的毒性最大,其24hLC50为0.98±0.03ppm。

低pH值对大型溞（Daphnia magna Straus）存活、生长和生殖的影响

在静置换水条件下，研究了低ｐＨ值对大型存活、生长和生殖的影响。结果表明，在２５±１℃下，急性试验低ｐＨ值对大型的２４ｈ和４８ｈＬＬ５０值及其９５％可信限分别为ｐＨ值４．６６±０．１９和４．９４±０．２０。慢性试验进行了１４天，对存活和生长，ｐＨ值１．７５有影响，ｐＨ值５．０没有影响；对生殖，ｐＨ值５．０有影响，ｐＨ值５．５没有影响。显示出低ｐＨ值对大型的毒性阈限在ｐＨ值５．００－５．５０之间。

试验用大型溞(Daphnia magna)的培养方法

<正> 由于大型溞(Daphnia magna)的生长周期短、易培养且是水生态系中的一种重要的代表性生物。因此,许多国际组织和国家都推荐用大型溞作为生态毒理试验的试验生物。然而,关于试验用的大型溞的培养方法多为互相传授,在文献中很少见到系统的报导。在许多有关大型溞毒性试验的操作规程中,如世界经济发展与合作组织(OECD)出版的。“化学物质试验方法指南”,只强调如何进行毒性试验及在试验中的注意事项,而对试验生物的要求只原则地提到要选用健康的个体。因此,在实际操作中常常遇到一些困难,由于未能获得健康的个体而影

Physico-chemical properties of alkaline phosphatases released by a planktonic crustacean, Daphnia magna (Cladocera)

Our studies investigated the physico-chemical properties of alkaline phosphatase excreted by D. magna. This cladoceran mainly released alkaline phosphatase, though it also released a small amount of acid phosphatase. The alkaline phosphatase showed a broad pH optimum (8.05-10.0), and had a broad optimum temperature (30-35 degrees C) with a temperature coefficient (Q(10)) of 2.45. The K-m of the enzyme is 0.15 +/- 0.02 mM when p-nitrophenyl phosphate is used as a substrate, and the V-max is 0.43 +/- 0.01 mu M pNP mg(-1) DW h(-1). Even though alkaline phosphatase had been incubated in chloroform saturated with WC medium for 13 days, its activity was 54% that of the original. The enzyme was strongly inactivated by EDTA, and appeared to be zinc dependent. The alkaline phosphatase activity remained constant when D. magna was fed different quantities of Chlorella sp. The sensitivity of D. magna phosphatase activity to phosphate was time-dependent. During the first 16 hrs, the enzyme was insensitive to phosphate addition, after 24 hrs incubation the enzyme became sensitive to phosphate addition.

Toxicity of cypermethrin to Daphnia magna HB

The acute toxic effect of the pesticide cypermethrin to Daphnia magna HB was examined. D. magna HB was exposed to cypermethrin at concentrations of 0, 1, 3, 5, 7, and 9 mg/L for 24 In. Data showed that the 24 h-LC50 of cypermthrin on D. magna HB was 4.81 mg/L. In contrast, the 24 h-LC50 of K2Cr2O7 (the national standard toxicant) to Daphnia magna was 0.38 mg/L in the current study. Results indicated that the Daphnia magna was very sensitive to pesticides. In addition, the effects of the culture condition(such as hardness, temperature and DO etc.) on Daphnia magna HB was also studied.

Long-term toxic impact of 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin on the reproduction, sexual differentiation, and development of different life stages of Gobiocypris rarus and Daphnia magna

The sexual ratio of Gobiocypris rarus exposed to 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) and 17 beta -estradiol from embryo to sexually mature revealed feminization and overdevelopment of connective tissue in male fish gonad in 2-30 pg/L TCDD concentration range. Daphnia magna was not sensitive to the high dose of TCDD (0.1-1000 ng/ml), but the reproduction of D. magna treated with TCDD decreased after the 8th day. 7-Ethoxyresorufin-O-deethylase (EROD) activities in newly fertilized eggs of G. rarus exposed to TCDD dosage groups (1000-100,000 pg/L) were significantly induced and increased with TCDD concentrations at the early life stage, while no difference was found between low TCDD dosage groups (<100 pg/L), but a good relationship between the EROD activity and the TCDD concentration was observed during a long-term developmental stage. There was a pericardial edema formed in a 2-week yolk-sac at the concentration of 1000 pg/L TCDD. But in the exposure group (2 pg/L TCDD for 120 days), the cell nuclei of hepatocytes was far from the center and packed toward the cell membrane; the cristae of most mitochondria in the cell dropped and collapsed; the rough endoplasmic reticulum broke into fragments; and numerous lipid droplets formed in the cell. (C) 2001 Academic Press.

OsBZR1和14-3-3蛋白在水稻BR信号转导中的功能研究

油菜甾醇类物质（Brassinosteroids, BRs）是植物生长发育必需的一类植物激素。在拟南芥中，BR可直接结合在位于细胞膜表面的受体激酶BRI1去激活BR的信号转导从而调节细胞核内的基因表达来调控植物的生长发育。为更好的了解水稻中BR信号的转导机理，我们利用反向遗传学研究了OsBZR1的功能并鉴定了一些与OsBZR1有相互作用的蛋白。利用RNAi干涉降低植物体内OsBZR1的表达可导致植株矮小，叶片直立，BR敏感性降低并改变一些BR响应基因的表达水平。此外我们利用酵母双杂交发现14-3-3蛋白可与OsBZR1发生相互作用，而去除推定的14-3-3结合位点的OsBZR1则不能与14-3-3蛋白在酵母和植物体内发生相互作用。去除14-3-3结合位点的OsBZR1转入拟南芥bri1-5突变体中可部分恢复bri1-5的表型而转野生的OsBZR1则对bri1-5的表型没有明显的影响。同时我们发现去除OsBZR1的14-3-3结合位点可影响OsBZR1在细胞内的分布，能增加OsBZR1在细胞核内的分布，这表明14-3-3蛋白至少可通过降低OsBZR1核内的分布来抑制OsBZR1的功能。这些结果有力的证明了OsBZR1和14-3-3蛋白在水稻BR信号转导中的重要功能。

油菜素内酯信号转导相关基因的克隆、鉴定和功能分析

油菜素甾醇类(Brassinosteroids，BRs)是一类新的植物内源激素，在植物整个生长发育周期中发挥着很重要的作用。拟南芥中BR信号转导途径基本清晰，从膜受体BRI1到细胞质中的负调控因子BIN2，再到核内的转录因子BZR1和BES1。但是从BR信号感知到细胞质内的传递，再到细胞核内的调控特异基因的表达都还有很多问题有待于进一步的探索。 本研究运用激活标签pDSK15-11对大约5000株拟南芥bzr1-1D进行了转化, 得到抗性植株约50000株，构建了一个拟南芥激活标签突变体库，从中筛选到和BR相关的突变体七个，并对其中的B26和B16突变体进行了详细的分析。此外还筛选到若干个和BR没有关系的突变体，并对其中的一个表皮毛缺陷的突变体B11进行了分析。 B26是一株恢复了bzr1-1D茎叶处打弯表型的突变体，并且具有矮化、叶色深绿、晚花等特点。B26部分抑制了bzr1-1D对BR合成抑制剂BRZ的不敏感性，但仍然对BR超敏感。BR上调的基因SAUR-AC1在bzr1-1D中表达上升，而在B26突变体中SAUR-AC1的表达量比bzr1-1D中有所下降。B26突变体显示的表型是依赖于bzr1-1D突变的。我们通过T-DNA侧翼序列，RT-PCR，以及重现实验证实造成突变表型的基因，并命名为BZS1。BZS1编码一个B类锌指蛋白，在植物发育的各个时期各个器官中都有表达。亚细胞定位分析显示BZS1定位于细胞质和细胞核中，以上这些结果说明BZS1可能在BR信号途径中是位于BZR1的下游，作为一个负的调节因子调控下游BR反应基因的表达。 B16是从突变体库中筛选得到的一个叶柄明显增长，营养生长期延长，开花晚，结实率比较低的突变体。T-DNA侧翼序列和基因表达分析显示B16突变体中T-DNA插入点附近的一个基因表达量升高，这一基因被命名为BZE1。BZE1编码一个含有bHLH结构域的蛋白。BZE1 RNAi转基因植株的叶柄比对照明显变短，说明BZE1调控叶柄的伸长。在B16突变体中，CPD和DWF4的表达较bzr1-1D中增强了，而SAUR-AC1的表达减弱了，这一结果说明BZE1过表达减弱了BZR1对CPD的反馈抑制。Pro35S:BZE1 /bzr1-1D转基因植株对BRZ的敏感度与bzr1-1D相似。BR不调节BZE1的转录水平，却可以促进BZE1蛋白在核内积累。这些结果都说明BR处理不改变BZE1的转录水平，只是通过促进BZE1在核内的积累增加，从而参与调控下游基因的表达，如CPD。随着这些突变体研究的进一步深入，将有助于我们更好的理解BR信号转导途径。 B11是一个叶片（包括莲座叶和茎生叶）和茎表皮毛缺失，但根毛发育正常的突变体，T-DNA侧翼序列和基因表达分析显示B11突变体表型是由于ETL1的过量表达造成的。ETL1可能是一个表皮毛特异表达的基因，对根毛的发育影响不大。功能缺失突变体etl1-1和野生型拟南芥具有相似的表皮毛数量和分布，根毛的数量和分布也没有明显的变化，这就说明ETL1可能与其他同源基因功能冗余。ETL1在gl1中表达量增加，由此推测ETL1在表皮毛的发育中可能起负调控的作用。

水稻OsGSR1调控赤霉素和油菜素内酯信号互作的分子机理研究

赤霉素（gibberellins，GAs）和油菜甾醇（brassinosteroids，BRs）在细胞伸长和植株形态建成等方面发挥重要的生理作用，但它们在分子水平上的相互作用仍然未知。在本实验室前期的芯片工作中筛选到受GA诱导表达的GAST家族基因OsGSR1(GA-stimulated gene in rice) (GenBank AY604180)。该基因全长cDNA为588 bp，编码110个氨基酸，OsGSR1具有GAST家族成员的共同特点。OsGSR1基因的表达受GA3诱导，同时受PAC抑制。基因表达模式分析表明OsGSR1在水稻的根、茎、幼穗和小花等多种组织和器官中表达。前期工作已获得转基因水稻。 本论文研究表明，OsGSR1 RNAi转基因水稻表现为初生根缩短、叶片直立、节间缩短和结实率降低等与GA和BR相关的表型。OsGSR1 RNAi转基因水稻对外源GA3敏感性降低，Real-time PCR分析表明在OsGSR1 RNAi转基因水稻中OsGA20ox2和SLR1的转录水平增高，GC-MS分析显示内源GA4含量增高，这些结果说明转基因材料中GA信号削弱。因此，OsGSR1是GA信号途径的正调控因子。另一方面，实验证据表明，外源BL处理可以抑制OsGSR1基因的表达，OsGSR1 RNAi转基因水稻不但可以响应外源BL处理，并且在叶夹角实验中显现出对外源BL更加敏感的特性。在OsGSR1 RNAi转基因水稻中，BR受体基因OsBRI1与合成基因OsDWARF表达量上调。外源添加BL可以恢复OsGSR1 RNAi转基因水稻矮化表型，上述结果说明OsGSR1可能作用于BR生物合成途径。酵母双杂交筛选、体外Pull-down结果和体内BiFC实验都证实OsGSR1可以与DIM/DWF1互作。在BR生物合成途径中，DIM/DWF1催化从24-亚甲基固醇（24-methylenecholesterol）到油菜甾醇（campesterol）的转化。GC-MS测定内源BRs含量结果进一步证实，转基因水稻中DIM/DWF1催化反应产物积累量减少，说明该反应受到明显抑制。所以，OsGSR1是通过直接作用于BR合成酶来调控BR生物合成。 综上所述，OsGSR1是GA信号途径的正调控因子，并且OsGSR1通过调节SLR1的表达参与到GA信号转导途径。OsGSR1和DIM/DWF1的互作说明OsGSR1直接参与了BR的生物合成过程。因此，我们的实验证明OsGSR1介导了GA和BR这两条激素信号转导途径的相互作用，从而调节了水稻植株的生长发育。

两种不同株铜绿微囊藻培养液对大型溞的毒性效应研究

为了探讨铜绿微囊藻对浮游甲壳动物溞类的毒害效应,试验选取了两种不同株系(产毒和非产毒)的藻种,采取利用其培养液的方法,以研究铜绿微囊藻在生长过程中向水体中释放的毒素或类毒素物质对溞类的效应以及比较不同株系间效应的差异性。研究结果表明:(1)试验所选铜绿微囊藻产毒和非产毒株系的培养液均能对大型溞(Daphnia magna)的生长繁殖构成影响,表现为低剂量起促进效应,高剂量起抑制效应;(2)铜绿微囊藻产毒株较非产毒株更能影响大型溞的存活;(3)铜绿微囊藻产毒和非产毒株对大型溞的生长影响差异不大,但对其繁殖却

用水毒理学方法评价家用洗涤剂的潜在危害

选用5种不同产地的常用类型的家用洗涤剂,用水毒理学方法研究它们对水生动物的毒性影响并由此判断对水生态系统的潜在危害.结果表明,在远低于日常使用量的浓度下,5种家用洗涤剂均对稀有鲫(Grobiocypris rarus)鱼苗和大型(Daphnia magna,HB)有急性毒性,离体条件下对鲫鱼(Carassius auratus)鳃ATP酶有较强的抑制作用;在无急性毒性浓度下暴露时对大型繁殖有明显影响;当暴露于家用洗涤剂对鱼24h半数致死浓度的5%时鲫鱼鳃ATP酶受到明显抑制;家用洗涤剂溶液存放一段时

一种耐高温大型溞HB的培养和生物学的初步研究

本文介绍了夏季在武汉鱼池所采的耐高温大型溞(Daphnia magna HB),对其生长繁殖及其实验室条件下溞的种群密度、食物、温度和光照强度对生长、发育的影响,并对其培养和保种方法进行了研究。连续3年实验室的培养表明,在以新鲜藻类为食物的情况下,此种溢在15—31℃时能正常生长、繁殖。在31℃时,其最大体长为3.65mm,最高怀卵量为26个。根据国际标准法组织所介绍的(ISO 6341)对标准毒物——重铬酸钾的敏感性试验,24hEC_(50)为0.92mg/L(20%)。

六六六对大型溞生态学的影响

在实验室条件下,测定了六六六对大型溞(Daphnia magna Straus)存活、生长和生殖的影响。在25℃时,以心跳停止为死亡标准,六六六(以丙体计)对大型溞48小时LC_(50)及其95%可信限为1.32±0.30ppm。以存活、生长和生殖为毒性标准,未觉察反应浓度(NOEC)为150ppb,最低觉察反应浓度(LOEC)为200ppb,其应用因子在0.11-0.15之间。内禀增长能力(r_m)是更为敏感的指标,六六六浓度要降低至50ppb才无明显影响。

武汉东湖周丛原生动物六新种

本文报道武汉东湖周丛原生动物的6种纤毛虫新种:绿累枝虫Epistylis chlorelligerumsp.nov.、斗鞘居虫Vaginicola cupulata sp.nov.、弯鞘居虫Vaginicola curvata sp.nov.、褶鞘居虫Vaginicola plicata sp.nov.、大靴纤虫Cothurnia magna sp.nov.、多纹平鞘虫Platy-cola multistriata sp.nov.。