体外分步诱导猕猴胚胎干细胞为肝细胞

采用分阶段诱导方法模拟肝细胞体内发育,建立体外诱导猕猴胚胎干细胞(rhesus monkey embryonic stem cells,rESCs)分化为成熟肝细胞的体系,对研究以ES细胞为基础的临床替代治疗人类晚期肝脏疾病具有重要的意义.将rESCs团块在含有10%FBS的DMEM培养基中悬浮培养11d,形成含有早期内胚层细胞的拟胚体(embryonic bodies,EB)并开始表达早期肝细胞的部分基因或蛋白,将11日龄EB接种至包被有ECM的组织培养皿,分阶段加入aFGF、BMP-4及OSM.经aFGF和BMP-4诱导7～10d后,分化细胞形态变为具有双核的多角形细胞,表达早期和中期肝细胞特异性的蛋白(AFP、ALB及CK18)和基因(AFP、ALB、APOH,G-6-P及TAT),并具有储存糖原的功能.撤除aFGF和BMP-4,添加OSM继续诱导7～10 d,分化的细胞表达成熟肝细胞所特有基因CYP1B1和ADH1C,并具有摄取靛青绿的能力.

不同培养基对发菜细胞生长和光合活性的影响

研究测定了发菜(NostocflagelliformeBorn.etFlah.)细胞在不同培养基中的生长速率、光合作用和叶绿素荧光活性。结果显示培养11d后:Detmer培养基中叶绿素a的含量为1.08mg/L,Kratz-Myers培养基中叶绿素a的含量为1.87mg/L,水生104号培养基中叶绿素a的含量为1.21mg/L,BG11培养基中叶绿素a的含量为2.18mg/L,表明在BG11培养基中培养的细胞具有最高生长速率;与另外4种不同浓度的BG11培养基相比,上述BG11培养基培养的发菜具有最大的光

藻-菌生物膜法改善富营养化水体水质的效果

将一种由改性高分子材料制成的人工水草作藻 菌生物膜的载体 ,来改善富营养化水体水质 .2次实验结果表明 :人工水草的布设可以明显抑制藻类的生长 ,在第 11d将水体透明度由 6cm提高到 6 2cm ;对CODMn、TP、TN和NH+ 4 N的削减率依次为 92 89%、4 9 2 5 %、94 97%和 70 15 % ;人工水草的布设对DO也能维持在一定水平 ;当人工水草高度与水深比为 0 7时 ,布设人工水草最经济、适宜的密度范围为 8～ 16株 /m2 .

种群起始密度对萼花臂尾轮虫休眠卵形成的影响

应用群体累积培养法 ,研究了种群起始密度对萼花臂尾轮虫休眠卵的形成及与之相关的混交雌体百分率和受精率的影响 .结果表明 ,在连续 11d的培养中 ,轮虫休眠卵的产量和形成效率以及种群中的平均混交雌体百分率以种群起始密度为 1 0～ 10 0ind·ml-1组最大 ,2 0 0ind·ml-1组次之 ,5 0 0ind·ml-1组最小 .各组间的平均混交雌体受精率则无显著差异 .对轮虫休眠卵最大形成效率及其出现的时间以及到达此时休眠卵产量的统计分析结果显示 ,在进行休眠卵的规模化生产时 ,宜选择种群起始密度

中华鲟仔鱼初次摄食时间与存活及生长的关系

研究了延迟投饵对中华鲟开口仔鱼存活及生长的影响。初次开口摄食在11—12日龄,13日龄卵黄基本吸收完毕,营养完全依靠外界供给。12日龄后,延迟投喂时间在1—10天的范围内,仔鱼成活率在46.67—73.33％之间,各组间无显著差异;延迟投喂时间为11d,成活率下降至13.3％;延迟投喂时间为12d,成活率为0。此外,延迟投喂时间在8d(20日龄)之内,42日龄后测量,仔鱼体长和体重与对照组无明显差异;延迟投喂超过9d,则体长和体重的指标明显低于对照组。仔鱼不摄食可以存活的最长时间是42日龄,但延迟投喂12

白腐菌选择性降解木质素的研究

对15株白腐真菌进行了以玉米秸秆为基质的初步筛选，从中获得一株选择性系数较高的菌株Y10，并对其降解玉米秸秆的情况进行了研究。结果表明，在30天的培养过程中菌株Y10对玉米秸秆降解的选择性系数都大于1，第15天选择性系数最高为3.88。对未经降解和降解过的玉米秸秆分别作了紫外光谱和红外光谱分析，结果表明，经该菌降解后玉米秸秆的化学成分发生了很大变化，且木质素的降解程度要大于纤维素的降解程度。对菌株Y10进行了ITS-5.8S rDNA序列鉴定，初步判定其为Cerrena sp.。 为了考查不同的外源添加物对菌株Y10降解玉米秸秆的影响，在以玉米秸秆为基质的固态发酵培养基中分别添加了7种金属离子、8种碳源、6种氮源。结果显示，这7种金属离子均能促进木质素的降解，并且一定浓度的某些离子明显抑制纤维素的降解；其中添加0.036%的MnSO4·H2O和0.36%的MgSO4·7H2O对纤维素降解的抑制作用比较强，降解率分别为0.96%和1.31%，木质素的选择性系数分别达到了34.40和20.17。8种碳源中除麦芽糖外都能促进木质素的降解，除微晶纤维素外都明显促进纤维素的降解。6种氮源中酒石酸铵、硫酸铵、草酸铵和氯化铵的添加都会使该菌生长变慢，而且氮源浓度越高菌丝生长越慢。外加碳源和金属离子对半纤维素降解和选择性系数的影响不大。 同时对菌株Y10在液态培养下产木质素降解酶的条件和培养基做了优化。结果表明，在初始产酶培养基中，菌株Y10的漆酶酶活在第10d达到最高，锰过氧化物酶酶活在第11d达到最高，基本上检测不到木质素过氧化物酶。菌株Y10产漆酶的最适温度为32℃，最适PH为6.0；产锰过氧化物酶的最适温度为32℃，最适PH为6.5。菌株Y10产漆酶的最佳碳源为甘露糖，最佳氮源为酒石酸铵，最适诱导剂VA浓度为3 mmol/L，最适表面活性剂TW-80浓度为1%。 利用响应面法对其产漆酶的培养基进行优化，优化后的培养基配方为葡萄糖10.00 g/L，酒石酸铵0.50 g/L，大量元素296.50 ml/L，微量元素100.00 ml/L，NTA 1.40 g/L，VA 5.00 mmol/L，吐温-80加入量为0.10%。进行了菌株Y10产漆酶的验证实验，实测酶活为5282.56 U/L，与预测酶活5162.73 U/L接近。在优化后培养基中，菌株Y10在第14 d达到生长的最高峰，第20 d时，漆酶酶活最高，为11325.00 U/L；第16 d时，锰过氧化物酶酶活最高，为30.77 U/L。 对菌株Y10的漆酶酶学性质做了初步的研究，结果显示，酶反应的最适温度为40℃-65℃，最适PH为3.0。在40℃，PH=3.0时，漆酶催化ABTS反应的米氏方程为 。 Fifteen white-rot fungi based on corn stalk were screened. One white-rot fungus Y10 with high selectivity value was obtained. The degradation of corn stalk was initially studied. The results indicated that the selectivity value was above 1 during the 30 day-cultivation and the highest was 3.88 after 15 days. The composition of untreated and treated stalk was analyzed through ultraviolet spectroscopy and infrared spectroscopy. It was found that the composition of treated stalk was greatly altered and the degree of the degradation of lignin is greater than the cellulose. Y10 was identified as Cerrena sp. by ITS -5.8S rDNA sequence analysis. The influence of metal ions, carbon sources and nitrogen sources on corn stalk degradation by white-rot fungus was studied. While all seven metal ions could promote lignin degradation, the cellulose degradation was best inhibited at certain ion concentrations. Notably, when 0.036% MnSO4·H2O and 0.36% MgSO4·7H2O were added into the medium, the cellulose degradation was restrained to the extents that the coefficients of lignin selectivity rose to 34.40 and 20.17 respectively. It was also found that all carbon sources except maltose can promote lignin degradation. The addition of carbon sources other than microcrystalline cellulose significantly promoted cellulose degradation. The addition of the nitrogen sources, ammonium tartrate, ammonium sulfate, oxalate, ammonium chloride, resulted in remarkable inhibition to mycelium growth; the larger the concentrations of nitrogen sources are, the slower the mycelium grew. The addition of carbon sources and metal ions had less impact on the degradation of hemicellulose and selectivity value. Meanwhile, we optimized the conditions and culture medium of the lignin-degrading enzyme production of strain Y10. The results showed that in the initial culture medium, the Lac activity was highest at the 10th day, the MnP activity was highest at the 11th day and the LiP could not be detected. The optimum condition of Lac was at temperature 32 and PH =6.0 and the optimum condition of MnP was at temperature 32 and PH =6.5. The optimum carbon source for Lac was seminose, the optimum nitrogen source was ammonium tartrate, the optimum content of VA was 3 mmol/L, the optimum content of TW-80 was 1%. PB and RSM were used to optimize the culture medium of laccase by white-rot fungus Y10. The optimum culture medium was consist of glucose 10.00 g/L, ammonium tartrate 0.50 g/L, macro elements 296.50 ml/L, trace elements 100.00 ml/L, NTA 1.40 g/L, VA 5.00 mmol/L, TW-80 0.10%. Under the optimal conditions, the activity of laccase was 5282.56 U/L and the experimental value agreed with the predicted value 5162.73 U/L. The biomass was highest at the 14th day, the Lac activity was highest at the 20th day, the MnP activity was highest at the 16th day. The results of the studies on the characteristics of Lac showed that the optimum temperature for Lac activity is 40℃-65℃ ; the optimum PH for Lac activity is 3.0 and under 40℃，PH=3.0, the Michaelis-menten equation of Lac catalized ABTS oxidation was .

垂直流人工湿地处理稠油废水的实验研究

采用垂直流人工湿地模拟装置对新疆油田外排含盐稠油废水进行了处理。实验表明:对于进水CODCr为402～406mg/L,盐度5701～5712mg/L,石油类40.62mg/L的含盐稠油废水,该系统的出水指标为CODCr35～38mg/L,盐度1535～1542mg/L,湿地系统对CODCr和盐分的去除率达到91%和73%;当水力停留时间为11d以上,出水石油类<5mg/L,处理后出水CODCr、石油类达到《污水综合排放标准》(GB8978-1996)的一级标准。

小青杨组织营养品质和舞毒蛾幼虫生长对大气CO_2浓度升高的响应

利用开顶式气室研究了1年生小青杨绿叶、细根、粗根和树皮内营养成分对CO2浓度升高的响应,并检验了上树取食的舞毒蛾幼虫的生长反应。结果表明:CO2浓度升高环境下小青杨绿叶、细根、树皮和粗根中的氮含量显著降低,绿叶、树皮和粗根中的碳氮比显著增加,但细根中碳氮比增加未达到显著水平;CO2浓度升高对所有杨树组织的总碳含量均无影响;CO2浓度升高显著增加了绿叶中总可溶性糖和总非结构碳水化合物的浓度,而绿叶淀粉含量仅在部分采样日期发生显著增加,除细根可溶性糖含量在CO2浓度升高处理下降低外,根系和树皮中各碳水化合物指标的浓度均未发生显著变化;CO2浓度升高环境下2龄舞毒蛾幼虫上树取食13d后体重显著低于自然CO2浓度处理下幼虫的体重,但幼虫继续在各自的实验处理下取食11d后,体重未表现出显著性差异。大气CO2浓度升高对杨树各组织内的营养成分含量均有影响,绿叶营养品质变差可能是导致低龄舞毒蛾幼虫生长受抑制的主要原因。

东北地区热量资源栅格化信息系统的建立和应用

利用东北地区172个气象台站30a(1961年～1990年)的整编温度资料和东北地区500m×500mDEM数据,建立了东北地区温度要素的空间分布模型。结果表明,温度要素的宏观本底值的模拟以三维二次幂级数展开法效果较好,其误差气温多在02℃～04℃,≥10℃初日、终日为11d～20d,≥10℃初终间隔日数为22d～29d,≥10℃积温为56℃·d～89℃·d。3省各温度要素的小地形影响程度不同,文中对小地形影响显著的要素进行了模型修正。利用建立的温度要素空间分布模型,构建了东北地区各温度要素的网格数字专题

南黄海浮游植物的固碳强度与污染物胁迫下海水碳源/汇格局的变化

本论文在解析了南黄海生态环境的基础上，首次研究揭示了浮游植物固碳强度的年际变化及生态反馈机制，获得了东中国近海浮游植物固碳强度及对海域源/汇格局的影响程度；同时，用室内模拟实验探讨了重金属和有机污染物胁迫下海水无机碳体系和源汇格局的变化过程，获得了一些新的认识。主要结论如下： 1. 南黄海浮游植物固碳强度具有明显的时空变化特征，与海域光照、流系和水团变化、海水磷的浓度等因素密切相关，并在一定程度上决定海区碳源/汇的性质。2005年秋季浮游植物日固碳量达9.5万吨，1983-2005年间，南黄海浮游植物固碳强度有降低的趋势，与海水关键营养盐－磷的限制有关。东中国近海浮游植物年总固碳量约为2.2亿吨，约占全球近海浮游植物的年固碳量的2.0%。 在综合分析秋季南黄海水文、化学、生物背景的基础上，系统阐明了海域浮游植物固碳体系的生物地球化学机制。结果表明，2005年秋季南黄海浮游植物固碳强度，即初级生产力变化在 97−701 mgC m-2 d-1之间，平均为307 mg C m-2 d-1；与其关系比较密切的环境因子为海水透明度、盐度、pH、氨氮 (NH4-N)、磷酸盐 (PO4-P) 以及Chl a。在这些因素中，PO4-P对初级生产力的影响最大，显然11月份南黄海的磷是浮游植物生长的限制因子，次之的影响因素是Chl a和NH4-N。 对南黄海源汇格局的研究发现，如果除去涌升流较为活跃的站位（A9、B7、B8、B9、C8、C9、 D9和A1），2005年秋季表层海水pCO2与浮游植物固碳强度明显负相关（r=-0.8，n=23, p<0.001）。在南黄海东部浮游植物固碳强度较高，pCO2值较低；而在西部海区浮游植物固碳强度较低的区域，其pCO2值较高。碳源/汇转折点浮游植物固碳强度为230 mgC m-2 d-1，即小于此值，海区为大气二氧化碳的源，反之为汇，并且CO2汇区浮游植物固碳强度平均值约是CO2源区的2倍多；浮游植物固碳作用，在某一时间和空间尺度内，基本决定了海区的源汇格局。估算结果显示，东中国近海浮游植物固碳量约为222×106t a-1，约为东中国近海通过海－气界面总表观碳汇强度每年1369万吨的16.2倍，仅就浮游植物的年固碳量而言，东中国近海约占全球近海浮游植物的年固碳量的2.0%。 研究揭示了近年来南黄海浮游植物固碳强度具有区域与年际变化明显这一显著特点。一般，近岸区（由黄海沿岸水和表层水控制）内，光照是浮游植物固碳的主要限制因子；从2001年后的大多数年份中，中央区（黄海冷水团控制）的浮游植物固碳强度均与磷酸盐浓度显著正相关，但与氮浓度的相关性不大，说明南黄海生态系统普遍存在着磷限制而非氮限制；混合区终年受黄、东海混合水控制，受到光照条件和营养盐浓度同时影响。根据本次观测所获数据，结合以前研究者的调查资料，我们发现从1983年到2005年，南黄海浮游植物优势种由Bacillariophyta变为Pyrrophyta，浮游植物细胞丰度和Chl a明显下降，浮游植物固碳强度几乎下降了二分之一 （由569.50 mgC m-2 d-1下降至306.83 mgC m-2 d-1），说明南黄海在世界边缘海固碳过程中的作用在降低。经过相关水质参数及生态环境变化的分析，以上现象是对关键营养盐磷的限制以及光限制响应的缘故。此外，研究还发现，由于南黄海初级生产者产量下降所引起的一些生态反馈信息，如浮游动物固碳量的下降和鱼类产量的锐减。 2. 室内模拟实验显示，重金属（铅、铜、镉和锌）及有机污染物（乙醇、丙酮、尿素和多灭磷）对水体生物固碳体系有重要影响，较低浓度时可提高水体的固碳能力，相应水体中的DIC、HCO3-和 Pco2 与对照组相比都明显下降 (P<0.01)；当污染物达到一定浓度后，水体生物的固碳能力明显下降，其有机碳可降解转化为无机碳。当污染物小于转折浓度水体为大气二氧化碳的汇，反之为源。 水体固碳体系对于不同种类、不同浓度的污染物质所表现的受胁迫情况不同，低浓度各污染物（包括重金属和有机污染物）添加组中（对于重金属为0.1和1µmol•L-1，醇和酮分别为<0.5 mol L-1和<0.75 mol L-1），藻干重及固碳量均要大于初始值，说明适量的外源污染可能会促进藻类生长，提高水体的固碳能力，相应水体中的DIC、HCO3- 和PCO2与对照组相比都明显下降 (P<0.01)。当污染物达到一定浓度后，由于其毒害作用，使得水体内生物的固碳能力下降，甚至分解并转化为无机碳，从会引起DIC、HCO3- 和PCO2含量的升高，其含量上升幅度会因固碳体系对不同种类污染物耐受程度的差异而不同。对于尿素和多灭磷，二者浓度分别达到80和20mgL-1时，水体中二氧化碳各参数仍呈现下降趋势，说明在该浓度范围内，大型藻类（如石莼）仍可利用添加物中的氮和磷，将其做为氮源或磷源，促进水体总固碳量的增加。 污染物胁迫对水体碳源汇能力及格局可起到一定的调控作用，与污染物的浓度密切相关，污染物存在着一转折浓度，分别为5µmol L-1（铜）、20µmol L-1（镉） 0.75mol L-1（酮），当污染物添加小于转折浓度并排除其他影响因素时，水体表现为大气CO2的汇，并且适量的增加污染物浓度会使海洋碳汇能力有所增强；而当污染物超出转折浓度时，水体成为CO2的源，其CO2的释放量是随着污染物浓度的增加而增大。对与研究中其他种类的污染物，在实验室设计范围内，水体始终表现为大气CO2的汇。